HS-SPME-GC-MS分析青皮揮發(fā)性成分

韓蔓 江漢美 馬銀宇

摘要：采用頂空固相微萃取法（HS-SPME）和氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS）對(duì)青皮的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析。結(jié)果表明，從青皮中分離出68個(gè)峰，鑒定出56種成分，占總揮發(fā)性成分的87.98%，分別有右旋萜二烯（15.06%）、芳樟醇（10.88%）、順式香芹醇（7.88%）、反式香芹醇（6.49%）、（E，Z）-α-法尼烯（6.26%）、α-松油醇（3.59%）等。首次采用HS-SPME-GC-MS聯(lián)用技術(shù)分析青皮揮發(fā)性成分，旨在為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：青皮;頂空固相微萃取;氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù);揮發(fā)性成分

中圖分類號(hào)：S666.2;O657.63 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2020）01-0142-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.01.032 ? ? ? ? ? 開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

Abstract： Using HS-SPME and GC-MS to extract and analyze the volatile constituents in Citri reticulatae pericarpium viride. The results showed that 68 peaks were detected from Mori folium， 56 components were identified， accounting for 87.98% of volatile components， including （+）-p-Mentha-1，8-diene（15.06%）， Linalool（10.88%）， cis-Carveol（7.88%）， trans-Carveol（6.49%）， α-Farnesene（6.26%）， α-Terpineol（3.59%）. HS-SPME-GC-MS combined technique was used to analyze the volatile components of Citri reticulatae pericarpium viride for the first time， providing reference for its further development and utilization.

Key words： Citri reticulatae pericarpium viride; HS-SPME; GC-MS; volatile component

青皮為蕓香科植物橘（Citrus reticulata Blanco）及其栽培變種的干燥幼果或未成熟果實(shí)的果皮，包括個(gè)青皮、四花青皮。青皮之名始載于《珍珠囊》，且《本草品匯精要》將其以“青橘皮”之名列于果部上品。2015版《中華人民共和國(guó)藥典》中收載有青皮，性味苦辛，微溫，歸肝、膽、胃經(jīng)，有疏肝破氣，消積化滯之功效，主要用于胸脅脹痛、疝氣疼痛、乳癖、乳癰、食積氣滯、脘腹脹痛[1]。青皮主要含有揮發(fā)油、黃酮類化合物、氨基酸類等化學(xué)成分，并對(duì)心血管、消化和呼吸系統(tǒng)有廣泛的藥理作用[2]，為臨床常用理氣藥。其中，揮發(fā)油是青皮主要活性成分之一，多采用傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾法提取，相較而言頂空固相微萃取更為快速、高效和簡(jiǎn)便。故本試驗(yàn)首次采用HS-SPME-GC-MS對(duì)青皮的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取和比較分析，旨在為青皮資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?儀器

手動(dòng)固相微萃取裝置（德國(guó)IKA公司）;氣相-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀（美國(guó)Hewlett-Packard公司，6890/5973型）;65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纖維頭（美國(guó)Supelco公司）;頂空瓶（15 mL）;JY1002型電子天平（上海浦春計(jì)量?jī)x器有限公司）。

1.2 ?試劑

青皮藥材購(gòu)于湖北強(qiáng)康中藥飲片有限公司，產(chǎn)地為廣州新會(huì)，經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室張秀橋教授鑒定為蕓香科植物橘的干燥幼果。將青皮藥材打成粉末，并過(guò)16目篩得青皮粉末。

1.3 ?方法

1.3.1 ?頂空固相微萃取條件 ?經(jīng)過(guò)綜合考察得出最佳固相微萃取條件：取青皮粉末0.5 g，置于15 mL頂空瓶中，插入裝有65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭的手動(dòng)進(jìn)樣器，110 ℃下預(yù)平衡15 min，再伸出萃取頭頂空萃取25 min，取出立即插入色譜儀進(jìn)樣口（溫度230 ℃）中，解吸6 min。

1.3.2 ?氣相色譜-質(zhì)譜條件

1）色譜條件。色譜柱HP-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;載氣He（99.999%）;流速0.8 mL/min;進(jìn)樣口溫度230 ℃;采用程序升溫，初始溫度為50 ℃，以10 ℃/min升溫至230 ℃。

2）質(zhì)譜條件。離子源為EI源;離子源溫度230 ℃;四級(jí)桿溫度150 ℃;電子能量70 eV;倍增管電壓1.2 kV;接口溫度230 ℃;質(zhì)荷比（m/z）35～550。

2 ?結(jié)果與分析

通過(guò)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和面積歸一化法對(duì)各總離子流中的各組分相對(duì)百分含量進(jìn)行計(jì)算，然后通過(guò)NIST 08質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)各峰的質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索，并結(jié)合其相對(duì)保留時(shí)間，確定各個(gè)組分。從青皮中分離出68個(gè)峰，鑒定出56種成分，占總揮發(fā)性成分的87.98%。其中，青皮中揮發(fā)性成分含量最高的為右旋萜二烯，占總揮發(fā)性成分的15.06%，其次為芳樟醇，占總揮發(fā)性成分的10.88%，順式香芹醇（7.88%）、反式香芹醇（6.49%）、（E，Z）-α-法尼烯（6.26%）、α-松油醇（3.59%）、（E）-β-金合歡烯（2.94%）等含量也較高。具體結(jié)果見(jiàn)圖1和表1。

3 ?討論

青皮中的揮發(fā)性成分主要包括脂肪烴類、烯類、醇類、單萜類、倍半萜等。其中，含量最高的右旋萜二烯可以抑制膽固醇的合成并有抗癌作用[3]。諸多體內(nèi)外試驗(yàn)表明，芳樟醇具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜催眠、抗焦慮、抗腫瘤、抗炎等藥理活性[4];香芹醇（葛縷醇）可抑制大鼠被動(dòng)皮膚過(guò)敏反應(yīng)和5-羥色胺引起的皮膚血管滲透性增強(qiáng)[5];松油醇具有平喘、抑菌作用[6];金合歡烯、大根香葉烯D、蓽澄茄烯等多種倍半萜均有抑菌解熱作用[7];（-）-4-萜品醇有鎮(zhèn)咳平喘和抗過(guò)敏作用[8];β-欖香烯具有較高的抗腫瘤活性，應(yīng)用前景廣闊[9];百里香酚具有較強(qiáng)的止痛、抗炎和抑菌作用[10]等，這些具有藥理作用的揮發(fā)性成分為青皮在臨床上用于胸脅脹痛、疝氣疼痛提供物質(zhì)基礎(chǔ)。同時(shí)，首次采用頂空固相微萃取-氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)青皮的揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行分析，也為青皮資源的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了參考依據(jù)。

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