血紅蛋白電泳與MCV對(duì)新生兒地中海貧血篩查的臨床診斷效果分析

李肖妹 馮王富 姚靖

【摘要】 目的：探究血紅蛋白（Hb）電泳與平均紅細(xì)胞體積（MCV）對(duì)新生兒地中海貧血篩查的臨床診斷效果。方法：選取2018年1月-2019年6月本院收治的疑似地中海貧血患兒352例，其中基因檢測(cè)陽(yáng)性的218例作為地貧組，另選取同期本院體檢的健康新生兒85例作為對(duì)照組。所有研究對(duì)象均行Hb電泳及MCV檢測(cè)。比較兩組血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo);比較不同類型地中海貧血者血液學(xué)檢測(cè)指標(biāo);以基因檢測(cè)作為金標(biāo)準(zhǔn)，比較Hb電泳、MCV單獨(dú)檢測(cè)和兩者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性。結(jié)果：地貧組MCV、HbA均明顯低于對(duì)照組，而HbF明顯高于對(duì)照組（P<0.05）;α-地中海貧血者M(jìn)CV、HbF均明顯低于β-地中海貧血者，而HbA明顯高于β-地中海貧血者（P<0.05）;根據(jù)ROC曲線圖顯示，Hb電泳臨界值為115 g/L，MCV臨界值為58 fL，聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性均明顯高于單獨(dú)檢測(cè)Hb電泳和MCV（P<0.05）。結(jié)論：Hb電泳、MCV檢測(cè)在新生兒地中海貧血篩查中具有一定價(jià)值，兩者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性更高，對(duì)地中海貧血患兒早期診斷、治療及預(yù)后具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 Hb電泳 MCV 地中海貧血

[Abstract] Objective： To explore the clinical diagnostic effect of hemoglobin （Hb） electrophoresis and mean erythrocyte volume （MCV） on neonatal thalassemia screening. Method： A total of 352 children suspected of thalassaemia admitted to our hospital from January 2018 to June 2019 were selected， including 218 cases with positive gene test as the thalassaemia group. And 85 healthy newborns underwent physical examination in our hospital during the same period were selected as the control group. All subjects underwent Hb electrophoresis and MCV detection. The hematological test indicators were compared between the two groups. The hematological indicators of patients with different types of thalassemia were compared. Gene test was used as the gold standard to compare the sensitivity， specificity and accuracy of Hb electrophoresis， MCV alone and combined detection. Result： MCV and HbA in the thalassemia group were significantly lower than those in the control group， while HbF was significantly higher than that in the control group （P<0.05）. The MCV and HbF of patients with α-thalassemia were significantly lower than those with β-thalassemia， while the HbA was significantly higher than those with β-thalassemia （P<0.05）. According to the ROC curve， the critical value of Hb electrophoresis was 115 g/L?and the critical value of MCV was 58 fL. The sensitivity， specificity and accuracy of the combined detection were significantly higher than that of Hb electrophoresis and MCV detection alone （P<0.05）. Conclusion： Hb electrophoresis and MCV detection have certain value in screening neonatal thalassemia. The sensitivity， specificity and accuracy of combined detection of Hb electrophoresis and MCV are higher， which is of great significance for early diagnosis， treatment and prognosis of children with thalassemia.[Key words] Hb electrophoresis MCV ThalassemiaFirst-authors address： Maternal and Child Health Hospital of Yangjiang City， Yangjiang 529500， China

地中海貧血（地貧）又稱海洋性貧血或珠蛋白生成障礙性貧血，是一種隱性基因遺傳疾病，好發(fā)于新生兒，病因是遺傳的基因缺陷致使血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺如或不足所導(dǎo)致的貧血或病理狀態(tài)[1]。該病是全世界分布最廣泛，發(fā)病人數(shù)最多的一種單基因病[2]。有相關(guān)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，廣西是我國(guó)地貧多發(fā)地，約20%人群為地貧攜帶者，其他發(fā)病率較高的地區(qū)還有廣東、江西、四川及臺(tái)灣等地區(qū)[3]。若不能有效篩查出地貧新生兒，則容易發(fā)生飲食不合理，盲目醫(yī)治等情況[4]。當(dāng)前地貧診斷的金標(biāo)準(zhǔn)為基因檢測(cè)，但操作繁瑣，設(shè)備要求高，價(jià)格昂貴，難以廣泛開(kāi)展。因此，尋找一種經(jīng)濟(jì)有效的篩查地貧患兒的方法顯得十分重要。本文采用血紅蛋白電泳與MCV對(duì)地貧患兒進(jìn)行分析與診斷，探究這兩者方法對(duì)地貧患兒篩查的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月-2019年6月本院疑似地中海貧血患兒352例，納入標(biāo)準(zhǔn)：在本院接受體檢發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞脆性<60%或紅細(xì)胞分布寬度≤16%。排除標(biāo)準(zhǔn)：有其他貧血癥者;有其他系統(tǒng)疾病者。其中經(jīng)基因檢測(cè)確診為陽(yáng)性的218例患兒作為地貧組，另選取同期本院體檢的健康新生兒85例作為對(duì)照組。所有患兒家屬均知情同意并簽署知情同意書(shū)，本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 抽取所有研究對(duì)象空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血2～5 mL，放置于無(wú)菌試管中并做好標(biāo)記，搖晃均勻后進(jìn)行抗凝離心（參數(shù)：5 000 r/min，5 min）;去血漿后用10倍0.9%氯化鈉溶液洗滌紅細(xì)胞3次，取10 μL紅細(xì)胞于裝有130 μL溶血素的試管中搖勻，溫室培育5 min備用。取抗凝靜脈血2 mL，用Sysmex KX-21血液分析儀，嚴(yán)格依照說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)血液平均紅細(xì)胞體積（MCV）;使用Hb電泳儀、掃描儀和分析系統(tǒng)檢測(cè)Hb指標(biāo)（包括HbA、HbF）?；驒z測(cè)：取疑似地中海貧血患兒靜脈血3 mL，采用人體細(xì)胞DNA提取試劑盒提取樣本DNA，采用GAP-PCR結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交法診斷α-地貧，采用PCR結(jié)合反向斑點(diǎn)雜交法診斷β-地貧，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) （1）比較兩組血液學(xué)指標(biāo)，包括MCV、HbA及HbF;（2）比較不同類型地貧患兒血液學(xué)指標(biāo);（3）以基因檢測(cè)為金標(biāo)準(zhǔn)，比較Hb電泳、MCV單獨(dú)檢測(cè)和兩者聯(lián)合檢測(cè)診斷地貧的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性。MCV正常參考值為80 fL

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，采用ROC曲線分析Hb電泳與MCV檢測(cè)的截?cái)嘀?，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 地貧組男105例，女113例;孕周37～40周，平均（38.5±0.7）周，年齡3～34 d，平均（21.4±3.1）d;α型116例，β型102例。對(duì)照組男42例，女43例，孕周37～41周，平均（38.9±0.8）周，年齡2～35 d，平均（21.8±3.3）d。兩組一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果比較 地貧組MCV與HbA均明顯低于對(duì)照組，而HbF明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 不同類型地貧患兒的血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果比較 α-地貧者M(jìn)CV與HbF均明顯低于β-地貧者，HbA明顯高于β-地貧者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 不同診斷方法對(duì)地貧的診斷價(jià)值 根據(jù)ROC曲線圖顯示，單獨(dú)檢測(cè)Hb電泳以臨界值為115 g/L時(shí);單獨(dú)檢測(cè)MCV臨界值為58 fL;三種檢測(cè)方法診斷地貧的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性均明顯高于單獨(dú)檢測(cè)Hb電泳和MCV，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3，圖1。

3 討論

地貧是一組單基因遺傳性疾病，最早出現(xiàn)于希臘、意大利等地中海沿岸國(guó)家，并由此而得名[5]。緣于基因缺陷的復(fù)雜性與多樣性，使缺乏的珠蛋白鏈類型、數(shù)量及臨床癥狀變異性較大。根據(jù)所缺乏的珠蛋白鏈種類，地貧可為α型、β型、δβ型和δ型4種，其中以α型、β型最為常見(jiàn)[6-7]。該病患病人數(shù)高，好發(fā)于新生兒，危害性大，且目前無(wú)特效治療方法，地貧重癥患兒僅可通過(guò)輸血、藥物等維持生命，但預(yù)后較差，發(fā)生較多不良反應(yīng)和并發(fā)癥等，生存質(zhì)量下降[8-9]。當(dāng)前，我國(guó)臨床鑒定地貧主要是通過(guò)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查和基因檢測(cè)，但由于檢測(cè)條件、技術(shù)操作及檢測(cè)價(jià)格較昂貴，基因檢測(cè)難以廣泛開(kāi)展[10-12]。因此，探索一種廣泛有效的篩查方法尤為重要。

Hb電泳是臨床檢測(cè)地貧的常用方法，具有快速、操作簡(jiǎn)單、特異度高等優(yōu)點(diǎn)，能定量檢測(cè)HbA、HbF而將患者分為α型或β型地貧[13]。但該方法易受檢測(cè)試劑、樣品處理等諸多因素干擾，出現(xiàn)誤診、漏診等情況[14]。本研究結(jié)果顯示，地貧組MCV、HbA均明顯低于對(duì)照組，HbF明顯高于對(duì)照組（P<0.05），α-地貧的MCV、HbF均明顯低于β-地貧，HbA明顯高于β-地貧（P<0.05），提示Hb電泳、MCV檢測(cè)均可有效篩查地貧。且HbA在對(duì)照組中最高，α-地貧次之，β-地貧最低;HbF在β-地貧中最高，α-地貧次之，對(duì)照組最低，提示Hb電泳對(duì)地貧類型有一定程度的應(yīng)用價(jià)值，原因在于Hb電泳通過(guò)分離不同等電點(diǎn)Hb并鑒定Hb的技術(shù)，但對(duì)輕度且無(wú)明顯癥狀的地貧篩查效果不佳，因此只能一定程度上提示α型或β型地貧[15-17]。根據(jù)ROC曲線圖顯示，單獨(dú)檢測(cè)MCV特異度最低，原因在于地貧患兒MCV降低，且缺鐵性貧血等情況也會(huì)發(fā)生MCV降低的狀況，因而單獨(dú)檢測(cè)MCV對(duì)篩查地貧效果不佳[18-19]。Hb電泳+MCV聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確性均明顯高于單獨(dú)檢測(cè)Hb電泳和MCV（P<0.05），提示Hb電泳+MCV聯(lián)合檢測(cè)可更有效篩查出地貧。

綜上所述，Hb電泳、MCV檢測(cè)在新生兒地中海貧血篩查中具有一定價(jià)值，Hb電泳+MCV聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性更高，對(duì)地中海貧血患兒早期治療及預(yù)后具有重大意義。

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（收稿日期：2019-09-04） （本文編輯：田婧）