探討S100A6蛋白在甲狀腺癌中的表達及臨床意義

王 蓉，羅 軍，孟憲杰，魏 莉

（1.新疆醫(yī)科大學(xué)，新疆 烏魯木齊 830011；

2.新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院血管甲狀腺外科，新疆 烏魯木齊 830011；3.新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院病理科，新疆 石河子 832000）

S100蛋白家族由23個家族成員組成，屬于EF-手鏈鈣結(jié)合蛋白，S100A2、S100A4、S100A6、S100A7、S100B等家族成員和腫瘤相關(guān)。S100A6也叫做鈣周期蛋白，資料表明[1]：在結(jié)直腸癌、卵巢癌、胰腺癌、肺癌、黑色素瘤等惡性疾病中，S100A6蛋白都有高表達。在腫瘤發(fā)展的過程中，S100A6蛋白可能是正性調(diào)節(jié)因子。有學(xué)者研究了28種健康的組織和21種腫瘤組織后發(fā)現(xiàn)[2]，在腫瘤組織種，S100A6蛋白都有表達，但健康組織中比較少見?，F(xiàn)階段，有關(guān)SA100A6蛋白和甲狀腺癌的研究非常少，本研究用免疫組化方法檢測甲狀腺腫瘤組織中S100A6蛋白的表達，探討S100A6蛋白的臨床意義，詳細內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月～2017年1月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院行甲狀腺手術(shù)后石蠟組織標(biāo)本的患者117例作為研究對象，其中男36例、女71例；年齡23～65歲，平均年齡（42.67±4.36）歲；甲狀腺濾泡型腺瘤39例、甲狀腺癌68例，其中47例乳頭狀癌、21例濾泡狀癌。另選取同期35例癌旁正常甲狀腺組織作為對照組。

1.2 試劑及免疫組織化學(xué)檢驗方法

采用免疫組織化學(xué)法進行檢測：使用10%的福爾馬林固定標(biāo)本，石蠟包埋后，4um厚連續(xù)切片。然后石蠟切片，并脫蠟和水化。采用免疫組織化SP法進行染色：首先在常溫下孵育15min，消除內(nèi)源性過氧化物酶作用，PBS漂洗過后，一抗孵育過夜，溫度保持在4℃，后加入二抗，通過DAB顯色，用蘇木素再次染色[3]。

S100A6蛋白免疫著色主要位于細胞質(zhì)，其次是細胞核。如果細胞質(zhì)和/或細胞核中存在清晰（出現(xiàn)）的棕黃色以及黃色顆粒，則判定為S100A6蛋白表達陽性。染色強度分為四個等級：①（－）：陽性細胞數(shù)＜5%或者沒有陽性染色。②（＋）：陽性細胞數(shù)5%～25%。③（＋＋）：陽性細胞數(shù)為26%～50%。④（＋＋＋）：陽性細胞數(shù)＞50%。S100A6抗體是兔抗人濃縮型單克隆抗體。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行處理，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以例數(shù)（n），百分數(shù)（%）表示，采用x2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同甲狀腺組織中S100A6蛋白的表達

在甲狀腺癌中S100A6陽性率顯著高于在與甲狀腺瘤和癌旁正常甲狀腺組織中的陽性率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1、圖1。

表1 不同甲狀腺組織中S100A6蛋白的表達

圖1 S10046蛋白在甲狀腺乳頭狀癌和甲狀腺濾泡狀癌組織中的表達

2.2 甲狀腺癌組織中的S100A6蛋白和患者病理特點的關(guān)系

患者的頸部淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移與甲狀腺癌組織中S100A6蛋白的表達密切相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 甲狀腺癌組織中的S100A6蛋白和患者病理特點的關(guān)系（n）

3 討 論

資料顯示：S100A6蛋白在胰腺癌細胞胞核中的表達較高，且顯著高于在細胞胞質(zhì)中的表達，且細胞胞核中S100A6蛋白表達較高，則預(yù)示該例患者治療預(yù)后較差；且與良性腫瘤相比，惡性腫瘤細胞的S100A6蛋白明顯更高。胰腺癌發(fā)生后，S100A6蛋白在細胞胞核中陽性率提升，也許會對患者治療的預(yù)后產(chǎn)生不同程度影響。經(jīng)本次研究發(fā)現(xiàn)，S100A6蛋白在細胞質(zhì)中存在高表達，細胞核中也有著色，甲狀腺癌中S100A6蛋白在胞核中的著色有待深入研究。

資料顯示[4]：S100A6蛋白在多種惡性腫瘤中都具有高表達，如乳腺癌、黑色素瘤、神經(jīng)母細胞瘤、肺癌、胰腺癌和結(jié)直腸癌等。另有研究表明：S100A6的高表達可有效的提升Wnt/β-Catenin信號活性，因此也可能判斷S100A6參與到甲狀腺腫瘤發(fā)展的機制之一；S100A6蛋白可能是潛在的鑒別甲狀腺良惡性腫瘤的生物標(biāo)志物；甲狀腺乳頭狀癌中S100A6蛋白表達高于濾泡狀癌，且甲狀腺乳頭狀癌呈現(xiàn)S100A6蛋白高表達[5]；與本次研究結(jié)果相仿。本次研究顯示：S100A6蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的表達顯著高于濾泡狀癌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。說明甲狀腺乳頭狀癌的早期發(fā)展中，S100A6蛋白起到重要作用。與腫瘤的其它部位相比，腫瘤浸潤邊緣的S100A6蛋白的表達更高，說明腫瘤細胞朝周圍組織浸潤、侵襲的程度和S100A6蛋白的表達相關(guān)，這本次研究結(jié)果提示，S100A6蛋白染色程度深度越深者，淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移的可能性越大，因此可將S100A6作為甲狀腺癌的一個潛在指標(biāo)，其表達與甲狀腺癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

綜上所述：因S100A6蛋白在甲狀腺癌組織中的高表達，可將其視為甲狀腺癌乳頭狀癌的重要生物學(xué)指標(biāo)；同時S100A6蛋白可用于對甲狀腺腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移危險性的預(yù)測。