陳美紅,何雯娟,丘麗萍
(福建省立金山醫(yī)院 福建省立醫(yī)院南院檢驗科,福建 福州 350028)
精液常規(guī)分析是一項評估男性生育能力、提供不育癥診斷和療效觀察的重要依據(jù),在臨床中越來越被重視[1-3]。人工顯微鏡分析方法是傳統(tǒng)的檢測方法,但手工分析檢測項目有限,不能很好地滿足臨床需求,且由于檢驗人員的主觀性,缺少量化的判斷指標(biāo),重復(fù)性較差,差異較大[4]。隨著標(biāo)本量的增加,工作量大,效率低,不宜大批量作業(yè),給臨床男性不育癥的診治和科研工作帶來一定的困難。隨著檢測技術(shù)的不斷提高,計算機在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用,計算機輔助分析精液質(zhì)量逐步應(yīng)用于男性不育癥的檢測中[5]。目前,我院引進了一臺上海BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀,通過對精子圖像的分析,記錄精子的運動軌跡,獲得標(biāo)本的精子濃度、精子存活率和精子總活力等數(shù)據(jù),并輔助檢驗人員進行精子形態(tài)學(xué)統(tǒng)計,具有準(zhǔn)確、客觀、快速等優(yōu)點[6]。本文通過對BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡法檢測的主要參數(shù)進行比較分析,探討B(tài)EION S3全自動精子質(zhì)量分析儀的臨床實用性[7]。
1.1 標(biāo)本來源 取自2017年1月至2017年10月本院泌尿外科門診患者的精液,年齡25~45歲,平均年齡(33±5)歲,除去無精癥患者和無活動精子標(biāo)本,隨機抽取210例精液標(biāo)本分別同時用BEION S 3全自動精子質(zhì)量分析儀和人工顯微鏡進行檢測。
1.2 儀器與試劑 上海BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀;儀器配套一次性精子計數(shù)板;日本奧林巴斯CKX53倒置相差顯微鏡;人工檢測用Makler精子計數(shù)板。
1.3 方法
1.3.1 標(biāo)本的采集 患者禁欲3~7d后,用手淫法(不能使用避孕套)將一次性射出的精液直接排入廣口有刻度的精液容器內(nèi),立即送檢,置于37℃溫箱內(nèi)溫育 30~60min,待精液液化后檢測[8,9]。
1.3.2 人工顯微鏡分析 待精液液化后嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的標(biāo)準(zhǔn)和方法進行分析[10]。
1.3.3 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀分析 同一份標(biāo)本同步嚴(yán)格按照BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀操作手冊進行分析。
1.3.4 重復(fù)性分析 以顯微鏡測定的精子濃度為標(biāo)準(zhǔn),選取檢測結(jié)果從低到高的4份標(biāo)本,在BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀上分別重復(fù)計數(shù)5次,計算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。
1.3.5 統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS22.0軟件進行數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計學(xué)分析。各檢測指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。兩種方法檢測結(jié)果的相關(guān)性用散點圖和回歸方程表示。采用wilcoxon秩和檢驗對兩種方法的檢測結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。以α=0.05為檢驗水準(zhǔn),P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 兩種方法測定結(jié)果的相關(guān)性分析 分別以人工顯微鏡法檢測的精子濃度、精子存活率和精子總活力的結(jié)果為X軸,以BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀的結(jié)果為Y值,將所有結(jié)果作散點圖,進行相關(guān)性分析[11]。得出相關(guān)系數(shù)r分別為0.996,0.967,0.983,P 值均<0.05,見圖 1、圖 2、圖 3,結(jié)果表明二者相關(guān)性良好。
圖1 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子濃度相關(guān)性分析
圖2 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子存活率相關(guān)性分析
2.2 兩種方法測定結(jié)果的比較分析 兩者測定結(jié)果比較P值均>0.05,差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見表1。
2.3 重復(fù)性
2.3.1 標(biāo)本分組 按照顯微鏡檢測得出的精子濃度對標(biāo)本進行分組。其中,精子濃度在分組(20~100)×106/ml之間標(biāo)本例數(shù)最多。見表2。
圖3 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與顯微鏡精子總活力相關(guān)性分析
表1 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡檢測結(jié)果的比較
表2 精子濃度分組
2.3.2 重復(fù)性分析 在各濃度分組內(nèi)分別隨機選取一份標(biāo)本在BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀上重復(fù)測定5次,精子濃度、精子存活率和精子總活力的重復(fù)性均良好,CV均小于15%,見表3。
目前,男性不育診斷、治療和研究的一項基本檢查是精液分析,而計算機精液分析儀正逐步廣泛地應(yīng)用于臨床。評估男性生育能力的重要參考指標(biāo)是精子濃度、精子存活率和A+B級精子總活力,其檢測結(jié)果的質(zhì)量保證與臨床效果息息相關(guān)[12]。傳統(tǒng)的人工顯微鏡分析方法因檢測者的經(jīng)驗不同及技術(shù)水平差異等人為因素,難以標(biāo)準(zhǔn)化,給臨床和研究帶來不利影響[13]。如今,隨著臨床標(biāo)本量的增多,操作繁瑣,工作量大,人工顯微鏡法逐步被計算機精液分析儀代替。近年來,國內(nèi)外研制的采用電-光學(xué)設(shè)計且可定量評估男性精液的計算機精液質(zhì)量分析儀,能更好地服務(wù)于臨床[14]。
表3 BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀的重復(fù)性分析
本文結(jié)果表明,BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀檢測的主要參考指標(biāo)精子濃度、精子存活率、精子總活力的結(jié)果CV均小于15%,有較好的重復(fù)性,避免了精液常規(guī)分析因技術(shù)人員水平和實驗室條件等原因造成的誤差。通過對比分析BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀與人工顯微鏡分析法的結(jié)果,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),說明兩者具有良好的一致性[15]。但是,計算機精液分析儀測定精子濃度的準(zhǔn)確性和精子總活力受精液中細(xì)胞成分和非精子顆粒物質(zhì)的影響。而且計算機精液分析儀分析精子形態(tài)特征,只能按精子頭部大小來定,導(dǎo)致計算機精液分析儀精子濃度計數(shù)偏高、畸形率偏低的不足[16]。然而,BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀具有人工修正的功能,可降低該誤差。且在精子濃度大于200×106/ml時,可進行手工稀釋上機檢測,按稀釋比例換算檢測結(jié)果,使檢測結(jié)果具有更好的準(zhǔn)確性和客觀性,為臨床和研究提供了更為科學(xué)的依據(jù)。
綜上所述,BEION S3全自動精子質(zhì)量分析儀能客觀反映精液質(zhì)量與生育能力的情況,且能實現(xiàn)分析過程的自動化控制,操作簡便快速、直觀實用,提高了實驗室的診斷水平,是值得在臨床上推廣使用的。