HIF-2α、CD73、Ki-67在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義

田玉增 (新疆喀什地區(qū)第一人民醫(yī)院，新疆 喀什 844000)

我國(guó)肺癌發(fā)病率與死亡率均排第一位，包括原發(fā)性肺癌非小細(xì)胞肺癌與小細(xì)胞肺癌，其中非小細(xì)胞肺癌占80%～85%，非小細(xì)胞肺癌包括鱗癌、腺癌、大細(xì)胞癌、低分化或未分化癌。HIF是缺氧誘導(dǎo)因子，既往研究顯示其表達(dá)在腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移的過(guò)程中發(fā)揮重要的作用，其可能參與腫瘤的血管生成、細(xì)胞分化、細(xì)胞代謝等過(guò)程[1]。CD73在人體多種組織細(xì)胞表面廣泛表達(dá)，有研究顯示CD73在缺氧情況下發(fā)揮免疫抑制作用，有研究證實(shí)其在肺癌的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著一定的作用[2-3]。Ki-67是一種核抗原，在細(xì)胞G1、S、G2和M期出現(xiàn)，可準(zhǔn)確反映細(xì)胞增殖活性，廣泛應(yīng)用于多種腫瘤增殖活性的測(cè)定[4-5]。本研究探討HIF-2α、CD73、Ki-67在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及臨床意義，以期為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料：選擇2016年7月～2019年6月在我院診斷治療的非小細(xì)胞肺癌患者100例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18周歲；②病理確診為非小細(xì)胞肺癌；③手術(shù)治療，術(shù)前未行放化療治療；④行Ki-67、CD73、HIF-2α檢測(cè)；⑤臨床資料完整，對(duì)治療知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①小細(xì)胞肺癌；②術(shù)前放化療治療；③合并其他系統(tǒng)腫瘤。100例患者中男61例，女39例，年齡48～73歲，平均(64.4±5.5)歲；其中肺腺癌74例，肺鱗癌26例；TNM分期：Ⅰ期65例，Ⅱ期22例，ⅢA期13例。

1.2檢驗(yàn)指標(biāo)及方法：腫瘤組織送病理，采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)HIF-2α、CD73以及Ki-67的表達(dá)。Ki-67陽(yáng)性為細(xì)胞核棕色顆粒；HIF-2α著色定位在腫瘤細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)，呈棕黃色或者黃色顆粒，部分細(xì)胞核可見(jiàn)染色；CD73定位在細(xì)胞膜上，棕黃色或者黃色顆粒，少部分細(xì)胞質(zhì)也可染色。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)采用免疫反應(yīng)積分的方法，每例隨機(jī)觀察5個(gè)高倍視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分：0分為無(wú)色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為棕褐色。陽(yáng)性細(xì)胞百分比評(píng)分：0分為陰性，1分為≤10%，2分為11%～50%，3分為51%～75%，4分為>75%。最終評(píng)分為染色得分×陽(yáng)性細(xì)胞得分：弱陽(yáng)性(+)1～4分，中等陽(yáng)性(++)5～8分，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)9～12分。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1非小細(xì)胞肺癌HIF-2α、Ki-67以及CD73陽(yáng)性表達(dá)：100例患者中CD73有25例呈強(qiáng)陽(yáng)性，37例呈中等陽(yáng)性，11例呈弱陽(yáng)性，總陽(yáng)性率73.0%；HIF-2α 16例呈強(qiáng)陽(yáng)性，33例呈中等陽(yáng)性，17例呈弱陽(yáng)性，總陽(yáng)性率66.0%。Ki-67 23例呈強(qiáng)陽(yáng)性，38例呈中等陽(yáng)性，14例呈弱陽(yáng)性，總陽(yáng)性率75.0%。

2.2不同臨床特征患者Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率：腺癌、中低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.3不同臨床特征患者HIF-2α陽(yáng)性表達(dá)率：腺癌、中低分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者HIF-2α陽(yáng)性表達(dá)率更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.4不同臨床特征患者CD73陽(yáng)性表達(dá)率：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1～N3、肺癌分期ⅢA期的患者CD73陽(yáng)性表達(dá)率更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

3 討論

肺癌是世界上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,已成為我國(guó)城市人口惡性腫瘤死亡原因的第1位。非小細(xì)胞型肺癌包括鱗狀細(xì)胞癌(鱗癌)、腺癌、大細(xì)胞癌，與小細(xì)胞癌相比其癌細(xì)胞生長(zhǎng)分裂較慢,擴(kuò)散轉(zhuǎn)移相對(duì)較晚。非小細(xì)胞肺癌約占所有肺癌的80%，約75%的患者發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于中晚期，5年生存率很低。

表1 不同臨床特征患者Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率[例(%)]

臨床特征例數(shù)陽(yáng)性(n=75)陰性(n=25)χ2值P值性別男6144(72.13)17(27.87)0.6870.407女3931(79.49)8(20.51)年齡≥60歲5843(74.14)15(25.86)3.3840.050<60歲4232(76.19)10(23.81)組織類型腺癌7464(86.49)10(13.51)20.0280.000鱗癌2611(42.31)15(57.69)分化程度高分化7644(57.89)32(42.11)11.9940.001中低分化3431(91.18)3(8.82)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N03113(41.94)18(58.06)26.1960.000N1～N36962(89.86)7(10.14)肺癌分期Ⅰ級(jí)6544(67.69)21(32.31)6.7300.035Ⅱ級(jí)2218(81.82)4(18.18)ⅢA級(jí)1313(100.00)0(0.00)

表2 不同臨床特征患者HIF-2α陽(yáng)性表達(dá)率[例(%)]

臨床特征例數(shù)陽(yáng)性(n=66)陰性(n=34)χ2值P值性別男6140(65.57)21(34.43)0.0130.910女3926(66.67)13(33.33)年齡≥60歲5837(63.79)21(36.21)0.2990.584<60歲4229(69.05)13(30.95)組織類型腺癌7459(79.73)15(20.27)23.9090.000鱗癌267(26.92)19(73.08)分化程度高分化7636(47.37)40(52.63)16.3470.000中低分化3430(88.24)4(11.76)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N03110(32.26)21(67.74)22.7940.000N1～N36956(81.16)13(18.84)肺癌分期Ⅰ級(jí)6533(50.77)32(49.23)19.4990.000Ⅱ級(jí)2220(90.91)2(9.09)ⅢA級(jí)1313(100.0)0(0.00)

表3 不同臨床特征患者CD73陽(yáng)性表達(dá)率[例(%)]

臨床特征例數(shù)陽(yáng)性(n=73)陰性(n=27)χ2值P值性別男6144(72.13)17(27.87)0.0600.807女3929(74.36)10(25.64)年齡≥60歲5835(60.34)23(39.66)11.2210.001<60歲4238(90.48)4(9.52)組織類型腺癌7454(72.97)20(27.03)0.0010.992鱗癌2619(73.08)7(26.92)分化程度高分化7655(72.37)21(27.63)0.0640.800中低分化2418(52.94)6(47.06)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N03111(35.48)20(64.52)32.0850.000N1～N36962(89.86)7(10.14)肺癌分期Ⅰ級(jí)6542(64.62)23(35.38)13.4290.000Ⅱ級(jí)2218(81.82)4(18.18)ⅢA級(jí)1313(100.00)0(0.00)

Ki-67是在細(xì)胞G1、S、G2和M期出現(xiàn)的核抗原，由于其半衰期短，可以準(zhǔn)確反映細(xì)胞的增殖活性，已廣泛應(yīng)用于多種腫瘤增殖活性測(cè)定[6-7]。Ki-67在多種腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)，研究顯示其在宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)-1中的陽(yáng)性表達(dá)率為57.1%，在CIN-2陽(yáng)性表達(dá)率為76.9%，在CIN-3陽(yáng)性表達(dá)率為81.8%；在子宮鱗癌與腺癌中Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)明顯增強(qiáng)，并且在腺癌中的表達(dá)93.8%要高于鱗癌中的88.5%；在本研究中也顯示肺腺癌中的表達(dá)要高于肺鱗癌，并且與腫瘤細(xì)胞遠(yuǎn)處淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)。

HIF-2α是在缺氧狀態(tài)下特異性發(fā)揮活性的核轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控多種靶基因的轉(zhuǎn)錄，生物學(xué)效應(yīng)多，在多種缺氧性疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中均發(fā)揮著顯著的作用[8-9]。HIF-2α可集合HRE后啟動(dòng)靶基因的表達(dá)能力，例如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、葡萄糖載體蛋白、腎上腺髓質(zhì)素、白細(xì)胞介素、脂肪細(xì)胞分化相關(guān)蛋白。腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中消耗大量的能量，其中脂類通過(guò)氧化磷酸化分解是重要的能量來(lái)源之一，HIF-2α在該代謝途徑中發(fā)揮重要的作用。研究證實(shí)，在多種腫瘤中HIF-2α均呈高表達(dá)，通過(guò)調(diào)控血管生成、細(xì)胞增殖、腫瘤干細(xì)胞等多方面參與腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程。在本研究中，非小細(xì)胞肺癌HIF-2α呈高表達(dá)，并且腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率更高，并且與患者的臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等相關(guān)。

CD73是胞外5′-核苷酸酶，錨釘在細(xì)胞膜外，在多種腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達(dá)。其高表達(dá)可促進(jìn)腫瘤增殖，與腫瘤分期、預(yù)后密切相關(guān)。其可參與嘌呤核苷酸代謝以及補(bǔ)救合成途徑，還是一種免疫信號(hào)負(fù)調(diào)控分子，可催化形成免疫抑制性介質(zhì)腺苷，有利于腫瘤細(xì)胞的逃逸[10]。目前的研究認(rèn)為靶向CD73可能具有抗腫瘤的作用，是一種腫瘤生物免疫療法。在本研究中CD73在非小細(xì)胞肺癌中呈高表達(dá)，并且與患者的臨床分期以及淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)。

綜上所述，非小細(xì)胞肺癌組織中HIF-2α、CD73、Ki-67均呈高表達(dá)，腺癌中Ki-67、HIF-2α表達(dá)更高，而CD73的表達(dá)與病理類型無(wú)明顯的關(guān)系，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肺癌分期與三者的表達(dá)均有一定的關(guān)系。