基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病的作用機(jī)制＊

譚雨晴，李 軍，陳恒文

（1. 中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院 北京 100053；2. 北京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院 北京 100029）

冠心病又稱冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。–oronary atherosclerotic heart disease，CHD），是指由于冠狀動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化病變致使血管管腔狹窄甚至閉塞，造成缺血缺氧損傷或壞死所致的心臟病[1]。目前，城鄉(xiāng)居民因心血管疾病死亡原因仍占居首位，日趨明顯的危險(xiǎn)因素導(dǎo)致患病人數(shù)持續(xù)上增，根據(jù)推算我國心血管病目前患病人數(shù)2.9 億，其中冠心病高達(dá)1100 萬[2]。結(jié)合既往防治策略，注重二級(jí)預(yù)防和心臟康復(fù)，以綜合防控[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)干預(yù)冠心病主要有藥物、介入和外科手術(shù)等方法[4]，對(duì)于患者的癥狀有極大的改善。中醫(yī)藥干預(yù)冠心病也具備其特有優(yōu)勢(shì)，如干預(yù)不能血運(yùn)重建的冠心病及支架術(shù)后再狹窄等問題，也可以改善心功能、緩解缺血缺氧損傷、預(yù)防再狹窄、調(diào)節(jié)心率[5]。病證結(jié)合的模式融合了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的辨病和傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的辨證，可以貫穿整個(gè)疾病發(fā)展過程，準(zhǔn)確對(duì)疾病的因、性、位、勢(shì)做出綜合判斷[6-7]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，冠心病屬于“痹”的范疇，病位在心，與其他臟腑密切相關(guān)，本虛標(biāo)實(shí)，本虛有氣虛、陽虛、陰虛等；標(biāo)實(shí)者為血瘀、痰濁、寒凝、氣滯等，為標(biāo)，冠心病緩解期，痰瘀來疾去緩，聚濕成痰，膠著互結(jié)，疾病遷延不愈；元?dú)馓澨摚瑹o力行血亦可致痰瘀。痰瘀貫穿疾病發(fā)展歷程，痰瘀互結(jié)是常見證型[8-9]。

瓜蔞薤白半夏湯方出《金匱要略》，專為胸痹心痛而設(shè)，具有通心陽，散瘀滯、化痰濕、止痹痛的功效[10]。目前對(duì)于瓜蔞薤白半夏湯以單味藥或者藥對(duì)的作用機(jī)制研究較多，復(fù)方研究多以臨床研究為主，藥物作用機(jī)制尚未深入[11]，對(duì)于經(jīng)典名方的開發(fā)利用造成了極大的阻礙。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的提出為中藥復(fù)方作用機(jī)制研究帶來了新的靈感與方法[12]。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)借助于計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，立足于疾病、單藥大數(shù)據(jù)的優(yōu)勢(shì)，對(duì)中藥、化學(xué)成分、靶點(diǎn)信息、信號(hào)通路進(jìn)行整合分析，與中醫(yī)復(fù)方整體調(diào)節(jié)，同病異治，異病同治的思想不謀而合[13]?；诖耍狙芯繑M借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的研究方法，構(gòu)建“中藥-化合物-靶點(diǎn)-疾病”的網(wǎng)絡(luò)，初步分析瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病的潛在作用機(jī)制，從復(fù)合網(wǎng)絡(luò)、生物功能、通路、分子等多個(gè)層面系統(tǒng)研究，為深入研究瓜蔞薤白半夏湯的實(shí)驗(yàn)機(jī)制研究提供基礎(chǔ)和方向。

1 研究方法

1.1 瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分獲取

檢索中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺(tái)TCMSP（https://tcmspw.com/index.php，Version 2.3），獲取瓜蔞薤白半夏湯的主要藥物的作用成分，分別收集瓜蔞、薤白、半夏的化合物，設(shè)定口服生物利用度（Oral bioavailability，OB）≥30% 且類藥性（Drug-likeness，DL）≥0.18 作為篩選條件，避免部分有效成分因不滿足OB 和DL 值設(shè)定條件被剔除，通過檢索論文查閱中國藥典對(duì)有效成分進(jìn)行補(bǔ)充，檢索數(shù)據(jù)庫以“中國知網(wǎng)”（https://www. cnki. net/）、“ 萬 方 數(shù) 據(jù)”（http://wanfangdata.com.cn/index.html）為主，閱讀篩選文獻(xiàn)，提取瓜蔞薤白半夏湯干預(yù)心血管疾病的有效成分，匯總建立瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分?jǐn)?shù)據(jù)庫。

1.2 瓜蔞薤白半夏湯有效成分靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

基于TCMSP平臺(tái)相關(guān)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)功能，查找瓜蔞薤白半夏湯主要成分所對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)信息，登陸Uniprot（https://www.uniprot.org/）數(shù)據(jù)庫，篩選物種信息為“homo sapiens”的數(shù)據(jù)，校正獲取的靶點(diǎn)蛋白，并將其轉(zhuǎn)換為標(biāo)準(zhǔn)基因名，創(chuàng)建瓜蔞薤白半夏湯靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫。

1.3 冠心病疾病靶點(diǎn)獲取

GeneCards 是一個(gè)集成數(shù)據(jù)庫，可檢索提供豐富的人類基因數(shù)據(jù)，在GeneCards 數(shù)據(jù)庫（https://www.genecards.org/，Version 5.0），以“coronary heart disease（冠心病）”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，查找冠心病相關(guān)基因，導(dǎo)出Excel格式，篩選Relevance score（相關(guān)度）≥30的基因，創(chuàng)建冠心病疾病靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫。

1.4 瓜蔞薤白半夏湯靶蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

使用Cytoscape 3.7.2 軟件，將各化合物與對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)，構(gòu)建“藥物-有效成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)，合并瓜蔞薤白半夏湯靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫與冠心病疾病靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫，取交集，創(chuàng)建“成分-共同靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)；將交集 靶 點(diǎn) 導(dǎo) 入STRING（https://string-db.org/，Version 11.0）數(shù)據(jù)庫，選擇“homo sapiens”篩選，設(shè)定置信度為中等0.400，構(gòu)建PPI 網(wǎng)絡(luò)，分析其網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)，得到關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.5 相關(guān)生物功能注釋和通路分析

為分析瓜蔞薤白半夏湯發(fā)揮藥理作用的主要信號(hào)通路及生物過程，將瓜蔞薤白半夏湯與冠心病映射靶點(diǎn)導(dǎo)入DAVID（https://david.ncifcrf.gov/，Version 6.8）生物信息平臺(tái)，對(duì)其進(jìn)行GO（Gene ontology）功能和KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）通路富集分析，以P值作為條件，篩選作用靶點(diǎn)可能參與生物學(xué)的途徑及通路，探討瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病可能的作用機(jī)制。

1.6 瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分與靶蛋白的分子對(duì)接

利用Uniprot 數(shù)據(jù)庫和RCSB PDB 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫（https://www.rcsb.org/）查找關(guān)鍵靶點(diǎn)的PDB ID（Protein Data Bank Identification），獲取蛋白信息，利用Pymol 軟件處理分子結(jié)構(gòu)，保存為pdb 格式。在TCMSP 數(shù)據(jù)庫下載靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)的藥物有效成分信息，保存為mol2 格式。利用SYBYL-X 2.0 軟件進(jìn)行分子對(duì)接，通過獲取的Total score分析結(jié)果。

1.7 瓜蔞薤白半夏湯作用機(jī)制文獻(xiàn)驗(yàn)證

檢索國內(nèi)外數(shù)據(jù)庫，查找瓜蔞薤白半夏湯干預(yù)冠心病相關(guān)研究的可能機(jī)制，為網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析提供文獻(xiàn)支撐。

2 結(jié)果

2.1 瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分獲取

通過TCMSP 檢索瓜蔞薤白半夏湯各藥物的化學(xué)成分，其中瓜蔞相關(guān)的化學(xué)成分11 個(gè)、薤白相關(guān)的化學(xué)成分11 個(gè)、半夏相關(guān)的化學(xué)成分13 個(gè)，結(jié)合藥典，增加了琥珀酸這一有效成分，檢索文獻(xiàn)對(duì)成分進(jìn)行補(bǔ)充，補(bǔ)充瓜蔞[14-15]5個(gè)有效成分如下：4-羥基-2-甲氧基苯甲酸、木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、油酸、β-谷甾醇，薤白[16-17]補(bǔ)充5 個(gè)有效成分，薤白苷a、薤白苷d、薤白苷e、薤白苷f、腺苷，半夏[18-19]補(bǔ)充3 個(gè)有效成分，麻黃堿、膽堿、腺苷，去除重復(fù)項(xiàng)，共得到46個(gè)化合物，其中腺苷為薤白、半夏共有的成分，β-谷甾醇為瓜蔞、薤白和半夏所共有的成分（表1）。

2.2 瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)

通過TCMSP 數(shù)據(jù)庫共檢索出瓜蔞薤白半夏湯各成分對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)605 個(gè)，并通過Uniprot 數(shù)據(jù)庫予以校正，去除重復(fù)，最后獲得277 個(gè)靶點(diǎn)。繪制“瓜蔞薤白半夏湯-活性成分-藥物作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖，圖中活性成分取MOD ID 后5 位數(shù)字表示，共有326 個(gè)節(jié)點(diǎn)586條邊（圖1）。

圖1 瓜蔞薤白半夏湯-活性成分-藥物作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

2.3 瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病潛在作用靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

圖2 瓜蔞薤白半夏湯與冠心病靶點(diǎn)韋恩圖

表1 瓜蔞薤白半夏湯活性成分基本信息表

利用GeneCards 數(shù)據(jù)庫查找冠心病相關(guān)基因，根據(jù)1.3 中所提及的篩選條件進(jìn)行篩選，最后獲取了450個(gè)疾病靶點(diǎn)，與瓜蔞薤白半夏湯主要活性成分靶點(diǎn)取交集，得到82 個(gè)共同靶基因（圖2）。利用Cytoscape 3.7.2 對(duì)瓜蔞薤白半夏湯活性成分治療冠心病作用靶點(diǎn)的對(duì)應(yīng)關(guān)系進(jìn)行可視化處理（圖3）。分析可知，網(wǎng)絡(luò)圖有114 個(gè)節(jié)點(diǎn)、200 條邊，節(jié)點(diǎn)度值（Degree）可以反應(yīng)該節(jié)點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中的重要性，利用度值反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)圖中各節(jié)點(diǎn)面積大小，面積與度值成正比；就藥物成分而言，槲皮素（MOL000098）、木犀草素（MOL000006）、油酸（MOL000675）、柚皮素（MOL004328）、β-谷甾醇（MOL000358）、黃 芩 素（MOL002714）、卡 文 定 堿（MOL002670）與多個(gè)靶點(diǎn)關(guān)聯(lián)，可能是瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病的主要活性成分。前列腺素G/H 合成酶2（PTGS2）、β-2 腎上腺素能受體（ADRB2）、鈉通道蛋白5型亞基α（SCN5A）、半胱天冬酶3（CASP3）、核受體 亞 家 族3 組C 成 員2（NR3C2）、雄 激 素 受 體（Androgen receptor，AR）可能是網(wǎng)絡(luò)的核心節(jié)點(diǎn)，與多個(gè)化合物有靶向關(guān)系。

圖3 中藥化合物-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 瓜蔞薤白半夏湯PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

登陸STRING 數(shù)據(jù)庫，輸入82 個(gè)交集靶點(diǎn)，構(gòu)建PPI 網(wǎng)絡(luò)圖（圖4）。圖中82 個(gè)潛在靶點(diǎn)均有相互作用，1538 條邊表明了各個(gè)蛋白之間的作用。平均度值為37.5，高于平均度值的靶蛋白有45 個(gè)，關(guān)聯(lián)度排名前10 的分別是：胰島素（Insulin，INS）、白介素-6（Interleukin-6，IL6）、RAC-α絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（RAC-alpha serine/threonine-protein kinase，AKT1）、腫瘤壞死因子（Tumor necrosis factor，TNF）、血管內(nèi)皮生長 因 子 A（Vascular endothelial growth factor A，VEGFA）、C-C 基序趨化因子2（C-C motif chemokine 2，CCL2）、表皮生長因子（Pro-epidermal growth factor，EGF）、白介素1β（Interleukin-1 beta，IL1B）、基質(zhì)金屬蛋白酶-9（Matrix metalloproteinase-9，MMP9）、內(nèi)皮型一氧化氮合成酶（Nitric oxide synthase，endothelial，NOS3），這些靶蛋白在整個(gè)蛋白相互作用關(guān)系中出于關(guān)鍵地位，可能是瓜蔞薤白半夏湯干預(yù)冠心病的重要靶標(biāo)。

2.5 相關(guān)生物功能注釋和通路分析

對(duì)瓜蔞薤白半夏湯和冠心病的交集靶點(diǎn)進(jìn)行富集分析，包括生物學(xué)過程（Biological function，BP）、細(xì)胞組分（Cellular component，CC）、分子功能（Molecular function，MF）三個(gè)方面，以P＜0.01 進(jìn)行篩選，獲取生物學(xué)過程266 個(gè)條目，主要涉及RNA 聚合酶II 啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控、轉(zhuǎn)錄正調(diào)控，DNA 模板、藥物反應(yīng)、基因表達(dá)的正調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、缺氧反應(yīng)、凋亡過程的負(fù)調(diào)控、細(xì)胞增殖的正調(diào)控、炎癥反應(yīng)等；細(xì)胞組分包括24個(gè)條目，主要涉及細(xì)胞外間隙、質(zhì)膜、胞外區(qū)、胞質(zhì)、細(xì)胞外泌體、細(xì)胞表面、細(xì)胞質(zhì)核周區(qū)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等；分子功能包括41個(gè)條目，主要涉及蛋白質(zhì)結(jié)合、酶結(jié)合、蛋白質(zhì)同源二聚體活性、細(xì)胞因子活性、受體結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性等，以基因富集數(shù)目降序排列，各選取3個(gè)方面排序前10 的條目，P值取負(fù)對(duì)數(shù)，繪制條形圖（圖5）。對(duì)瓜蔞薤白半夏湯和冠心病的交集靶點(diǎn)進(jìn)行通路富集分析，有112 條通路與之相關(guān)，以P＜0.05 并且基因數(shù)目大于等于10 進(jìn)行篩選，得到30 條通路。主要包括癌癥相關(guān)通路以及PI3K-Akt 信號(hào)通路、HIF-1信號(hào)通路、TNF 信號(hào)通路等。以富集數(shù)降序排列，選取前20項(xiàng)條目，繪制氣泡圖（圖6），圖中將P值取負(fù)對(duì)數(shù)，顏色表示P值大小，基因數(shù)目以氣泡面積表示。

圖4 瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖

圖5 瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病靶點(diǎn)富集分析圖

圖6 瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病KEGG分析氣泡圖

2.6 瓜蔞薤白半夏湯有效成分與疾病靶點(diǎn)分子對(duì)接分析

選取PPI 網(wǎng)絡(luò)中5 個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)：INS、IL6、AKT1、TNF、VEGFA，獲取PDB ID 和靶點(diǎn)結(jié)構(gòu)，將5 個(gè)靶點(diǎn)分別于其相對(duì)應(yīng)的有效成分進(jìn)行對(duì)接，靶點(diǎn)與化合物結(jié)構(gòu)結(jié)合時(shí)，對(duì)接分?jǐn)?shù)越高，靶點(diǎn)與化學(xué)物結(jié)合越穩(wěn)定，能量最低（表2）。對(duì)接分?jǐn)?shù)均高于4分，顯示結(jié)合強(qiáng)度較好，其中得分高于7 分的有2 個(gè)，5-7 分的有7 個(gè)，提示核心靶點(diǎn)與瓜蔞薤白半夏湯有效成分具有較好的結(jié)合能力?；衔锎蟛糠峙c核心靶點(diǎn)以氫-氫鍵連接，以對(duì)接分?jǐn)?shù)降序排列，前3 分別為：INS 與油酸在CYS6 處形成氫鍵；IL6 與木犀草素在ASN169、ASN145、SER37、ARG40、ASP34、GLN175處形成氫鍵；AKT1 與 槲 皮 素 在 GLU228、THR291、ASP292、ALA230、LYS179 處形成氫鍵，對(duì)接分?jǐn)?shù)大于6 的對(duì)接結(jié)構(gòu)圖如下（圖7）。

表2 核心靶點(diǎn)與藥物成分對(duì)接分?jǐn)?shù)

圖7 分子對(duì)接模式圖

2.7 瓜蔞薤白半夏湯干預(yù)冠心病文獻(xiàn)驗(yàn)證

查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，瓜蔞薤白作為經(jīng)典藥對(duì)，可用于治療心肌缺血、再灌注損傷、心肌纖維化、動(dòng)脈硬化、高脂血癥，其作用機(jī)制可能與抑制氧化反應(yīng)、下調(diào)自噬基因、抑制成纖維細(xì)胞增殖、改善血液流變性、增強(qiáng)巨噬細(xì)胞吞噬作用、調(diào)節(jié)脂蛋白水平有關(guān)。通過抑制p53、casepase-3 表達(dá)，調(diào)節(jié)Bcl-2/Bax 的水平，抑制心肌細(xì)胞凋亡，以保護(hù)心肌[20]。瓜蔞薤白半夏湯還可以抑制缺血再灌注的炎癥損傷，減少IL-6、IL-1β的產(chǎn)生，促進(jìn)IL-10 的表達(dá)。通過抑制NF-κB，調(diào)節(jié)IL-1、IL-6、TNF-α的表達(dá)，保護(hù)心肌再灌注損傷[21]。綜上，已有的實(shí)驗(yàn)研究也一定程度上說明了瓜蔞薤白半夏湯通過抗炎、抗氧化、抗纖維化、降脂等作用干預(yù)冠心病。

3 討論

瓜蔞薤白半夏湯是最為常用的“胸痹心痛”經(jīng)方，其臨床療效已得到臨床試驗(yàn)證實(shí)。一項(xiàng)納入20 個(gè)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)1810 例患者的系統(tǒng)綜述[22]顯示，瓜蔞薤白半夏湯加減方可提高冠心病心絞痛患者的心絞痛、心電圖和中醫(yī)癥候療效，且安全性較好。本方也被納入《冠心病穩(wěn)定型心絞痛中醫(yī)診療指南》[23]，作為冠心病心絞痛痰濁閉阻證的首選方劑。然而，然而本方治療冠心病的具體作用機(jī)制研究尚未闡明，利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法有助于系統(tǒng)分析本方與冠心病的作用關(guān)系，挖掘潛在的作用靶點(diǎn)。

本研究基于Cytoscape 3.7.2 軟件建立“中藥-作用成分-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)模型，共篩選出瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病的46 個(gè)活性成分、277 個(gè)靶點(diǎn)。對(duì)瓜蔞薤白半夏湯中藥化合物-作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，槲皮素、木犀草素、油酸、柚皮素、β-谷甾醇、黃芩素、卡文定堿等化學(xué)物在網(wǎng)絡(luò)圖占據(jù)重要地位，可能是瓜蔞薤白半夏湯發(fā)揮治療作用的主要成分。研究表明，槲皮素可以改善動(dòng)脈粥樣硬化，可通過抗氧化，抗炎癥作用進(jìn)而減輕內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙[24]。此外還可以降血壓，擴(kuò)張血管，抑制血小板聚集和血管平滑肌細(xì)胞增殖，對(duì)心臟具有保護(hù)作用[25]。

木犀草素可以保護(hù)肝臟和心血管，具有抗炎抗氧化的功能，促進(jìn)免疫器官的分化，提高CD4+和CD8+T細(xì)胞水平，增強(qiáng)免疫力，作用機(jī)制可能與下調(diào)PI3K/AKT 通路有關(guān)[26]。油酸是重要的不飽和游離脂肪酸，游離脂肪酸，與動(dòng)脈粥樣硬化和糖尿病的發(fā)展密切相關(guān)[27]。柚皮素可以調(diào)節(jié)代謝，直接影響血管壁，可以預(yù)防內(nèi)皮功能障礙具有明顯抑制動(dòng)脈粥樣硬化作用，還具有降脂、降壓、抗炎的特性[28-29]。β-谷甾醇是一種天然的抗氧化劑，可以保護(hù)氧化應(yīng)激損傷，調(diào)節(jié)能力代謝，保護(hù)心肌[30-31]，抑制炎性因子的聚集和釋放，增強(qiáng)阿司匹林的抗炎作用[32]。黃芩素可以通過作用于PI3K/Akt、MAPKs 和NF-κB/p65 信號(hào)通路，干預(yù)信號(hào)分子，保護(hù)心肌細(xì)胞缺血/缺氧損傷[33]?？ㄎ亩▔A可抑制炎性因子，具有抗炎作用[34]。豆甾醇具有廣泛的生物學(xué)活性，是一種天然的抗炎抗氧化劑，有鎮(zhèn)痛、降脂、調(diào)節(jié)血糖的作用[35]。

預(yù)測(cè)瓜蔞薤白半夏湯與冠心病交集靶點(diǎn)82個(gè)，對(duì)靶點(diǎn)蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，瓜蔞薤白半夏湯可能通過作用于INS、IL6、AKT1、TNF、VEGFA、CCL2、EGF、IL1B、MMP9、NOS3、CASP3、MAPK1、EDN1、PTGS2、CXCL8、TP53、IL10 等蛋白發(fā)揮治療作用。INS 可以提高葡萄糖代謝，從而發(fā)揮缺血缺氧心肌的保護(hù)作用，血糖升高作為心血管疾病的危險(xiǎn)因素，胰島素對(duì)于血糖的調(diào)節(jié)作用尤為重要[36]。IL6與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，它可以通過激活巨噬細(xì)胞、刺激巨噬細(xì)胞低密度脂蛋白受體的表達(dá)，促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成，并刺激基質(zhì)金屬蛋白酶合成，降低粥樣斑塊纖維帽的穩(wěn)定性，導(dǎo)致斑塊破裂[37]。AKT1 參與多種生物學(xué)過程，如細(xì)胞代謝、細(xì)胞存活、周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控等，在心血管疾病、炎癥、癌癥及糖尿病的發(fā)生發(fā)展中均可發(fā)揮作用[38]。TNF 與炎癥反應(yīng)關(guān)系密切，TNF-α刺激相關(guān)血管生長因子的表達(dá)，可促進(jìn)缺血后血管再生[39]。VEGFA 涉及內(nèi)皮細(xì)胞的血管舒張、增殖、通透性、遷移和存活，與血管生成密切相關(guān)[40]。瓜蔞薤白半夏湯作用于靶點(diǎn)可能與調(diào)節(jié)炎癥因子，作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞，參與氧化還原反應(yīng)有關(guān)。

GO 功能分析結(jié)果提示，生物學(xué)過程對(duì)于基因的調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、缺氧的反應(yīng)、細(xì)胞增殖或凋亡過程的調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)等均與冠心病聯(lián)系密切；細(xì)胞組分主要涉及細(xì)胞外間隙、質(zhì)膜、胞外區(qū)、胞質(zhì)、細(xì)胞外泌體、細(xì)胞表面、細(xì)胞質(zhì)核周區(qū)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等；分子功能主要涉及蛋白質(zhì)結(jié)合、酶結(jié)合、蛋白質(zhì)同源二聚體活性、細(xì)胞因子活性等。富集分析進(jìn)一步表示，瓜蔞薤白半夏湯作用于多層面通過復(fù)雜機(jī)制調(diào)節(jié)冠心病。

KEGG 分析結(jié)果提示，有5 條通路與心血管關(guān)系密切，PI3K-Akt 信號(hào)通路、TNF 信號(hào)通路、HIF-1 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路、FoxO 信號(hào)通路。PI3K-Akt 通路在細(xì)胞存活、增殖、凋亡中起著關(guān)鍵作用，影響動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。作為通路，參與了細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，同時(shí)對(duì)能量代謝也有重要作用[41-42]。TNF 信號(hào)通路與炎癥和免疫相關(guān)，TNF-α參與細(xì)胞生長、增殖、死亡等過程，協(xié)同IL-6、IL-1 等炎性因子導(dǎo)致心臟炎性反應(yīng)[43]。HIF-1，可以調(diào)節(jié)缺氧引起的生理病理變化，如氧化應(yīng)激、缺氧損傷、血管新生、炎癥反應(yīng)、代謝等，參與調(diào)控多種細(xì)胞的增殖、分化、凋亡[44]。MAPK信號(hào)通路有助于細(xì)胞各項(xiàng)生理活動(dòng)，如轉(zhuǎn)錄、合成蛋白、細(xì)胞周期等，參與了血管內(nèi)皮細(xì)胞炎癥損傷，還可以調(diào)節(jié)泡沫細(xì)胞和動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成[45]。FoxO可以促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡，抑制其表達(dá)可以助于心肌再生。FOXO1/3 可以抑制心肌纖維化，提示在早期可能起到保護(hù)心肌的功能，而在后期加速了疾病的發(fā)展進(jìn)程[46]。

本研究存在一定的局限性，僅基于TCMSP數(shù)據(jù)庫檢索藥物成分及靶點(diǎn)，中藥數(shù)據(jù)庫較多，數(shù)據(jù)日漸完善，TCMSP 作為綜合考慮最優(yōu)選的數(shù)據(jù)庫之一仍然存在部分藥物缺失、有效成分不全等問題，在今后的研究過程中，應(yīng)盡量結(jié)合多個(gè)數(shù)據(jù)庫及文獻(xiàn)資料對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行補(bǔ)充。綜上，瓜蔞薤白半夏湯治療冠心病涉及多個(gè)有效成分、作用靶點(diǎn)及信號(hào)通路，與中藥多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的特點(diǎn)吻合，瓜蔞薤白半夏湯具有的抗炎、抗動(dòng)脈硬化、血管保護(hù)、抗缺血缺氧損傷等作用，一定程度上體現(xiàn)了其干預(yù)機(jī)制，為后續(xù)治療冠心病的研究提供了新的理論基礎(chǔ)和探索方向。