亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽呼吸代謝生理響應

張曉瑩，么宗利，來琦芳，厲成新，周 凱，劉進紅，隋延鳴，馬慶男，高鵬程

（1.中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所，鹽堿水域漁業(yè)工程技術研究中心，上海 200090；2.上海海洋大學水產(chǎn)與生命學院，上海 201306；3.光明漁業(yè)有限公司，江蘇大豐 224153）

在池塘養(yǎng)殖中，高密度放養(yǎng)及飼料的過量投喂易破壞池塘的生態(tài)系統(tǒng)，造成水體亞硝酸鹽含量升高［1－3］。高濃度亞硝酸鹽會影響魚類攝食、活動及生長［4－5］，長期脅迫會降低魚類的免疫力，增加致病菌的易感性，嚴重脅迫甚至會引起死亡［6－7］。魚體為應對脅迫因子的影響，會產(chǎn)生一系列的生理生化響應，直接反應在其代謝率的變化，另一方面魚體的活動能力亦會受到影響［8］，監(jiān)測脅迫下魚類的代謝率可以反應其在不同水環(huán)境中的活動規(guī)律、生理代謝水平、能量需求水平［9－11］。

標準代謝率 （standard metabolic rate，SMR）是滿足魚體的最低能量需求［12－13］，能反應魚類的生態(tài)習性［14］，預測其能量分配［12］。魚體在應對不同環(huán)境因子脅迫時，均會啟用相應的調節(jié)機制，SMR 發(fā) 生 顯 著 變 化［8，15］。最 大 代 謝 率（maximum metabolic rate，MMR）是魚體力竭運動后的最大耗氧率，與魚體的行為和活動能力有密切關系，越活躍的魚類越能維持更高水平的耗氧量［16］，能反映出一些魚類特殊的代謝模式［14，17］。有氧代謝范圍（aerobic scope，AS）是MMR與SMR的差值，反映環(huán)境因子對魚體生理代謝的影響，通常用來評價滿足魚類基本生理代謝需求外，完成其它有氧代謝活動的能力。AS的下降會破壞魚體的代謝平衡，引起能量需求沖突，不利于魚體的健康生長［16，18］。亞硝酸鹽在魚體內會將血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白，導致魚體載氧能力下降，從而影響代謝［19－21］。

異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）是我國淡水養(yǎng)殖的主要種類之一，具有營養(yǎng)豐富、肉味鮮美、適應性強、生長快等特點［22－23］。本實驗旨在探索異育銀鯽在不同濃度亞硝酸鹽水環(huán)境下SMR、MMR、AS、MHb／Hb的變化規(guī)律，以期進一步揭示亞硝酸鹽對異育銀鯽呼吸生理、有氧代謝及運動能力的潛在生態(tài)毒性，為異育銀鯽的健康養(yǎng)殖、生長模型構建提供基礎數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗于2016年6－8月在光明漁業(yè)有限公司進行，實驗用的異育銀鯽幼魚取自光明食品集團上海市海豐標準化養(yǎng)殖池塘，放入體積為300 L、直徑為2 m的圓形魚缸中暫養(yǎng)2周，暫養(yǎng)期間水溫 （25.5±0.5）°C，pH 7.84±0.12，總氨氮濃度 （0.12 ±0.01）mg·L－1，亞硝酸鹽濃度（0.07±0.01）mg·L－1，溶氧水平不低于5 mg·L－1，每天投喂飼料1次，投喂量約為體重的5%，投餌后2 h吸走殘餌糞便，日換水量為30%。選取規(guī)格均勻、健壯的個體作為實驗對象。實驗用水采用過濾的河水加入一定量NaNO2（AR）配制而成，亞硝酸鹽濃度測定采用重氮-偶氮光度法［24］。

1.2 實驗方法

1.2.1 實驗設計

參照陳家長等［6］、譚樹華等［25］、單娜［26］的研究結果及預實驗的結果，呼吸代謝實驗的魚體質量為 （15.31±2.28）g、體長為 （9.03±0.55）cm，亞硝酸鹽設置3個濃度梯度，分別為0.5、1、1.5 mg·L－1，每組實驗設3個重復，每個重復放3尾異育銀鯽；MHb／Hb實驗的魚體質量為（58.79±4.94）g、體長為 （12.03±0.87）cm，亞硝酸鹽設置4個濃度梯度，分別為0.5、1、2、3 mg·L－1，每組實驗設3個重復，每個重復20尾異育銀鯽。以過濾的河水作為對照組，每隔6 h測定并調節(jié)亞硝酸鹽濃度，實驗期間不進行投喂，其它實驗條件與暫養(yǎng)期間一致。

1.2.2 呼吸代謝測定

為排除攝食對魚體代謝率的影響，實驗開始前48 h停止投喂［27］；實驗開始前及結束后均測定對照呼吸室（空白對照）中的溶氧變化，排除實驗水體中微生物耗氧對代謝率的影響［13，28］。

1.2.2.1 標準代謝率 （SMR）的測定

實驗采用魚類流水式呼吸室測定異育銀鯽的SMR，實驗水體為2 L，將實驗魚放入含有不同濃度亞硝酸鹽的呼吸室中脅迫96 h后，連續(xù)24 h每隔1 h監(jiān)測呼吸室中溶氧的變化，整個實驗過程保證水中溶氧水平不低于飽和溶氧的80%，每次測定時間為5 min。為保證呼吸室中水體充分混合并減少對魚體的驚擾，測定期間關閉呼吸室的外循環(huán)，打開內循環(huán)；未測定時打開外循環(huán)，關閉內循環(huán)。溶氧采用多參數(shù)水質測量儀 （YSI 6600，USA）監(jiān)測。整個實驗過程在黑暗環(huán)境中進行，根據(jù)代謝率公式計算相關數(shù)值，最小10%數(shù)據(jù)的平均值作為 SMR［12，29］。

代謝率MO2＝△O2·V／（t· m）

其中，△O2為實驗呼吸室中溶氧變化量與對照呼吸室（空白對照）溶氧變化量之差，V為呼吸室的體積，t為測定的總時間，m為實驗魚的體質量［8，30］。

1.2.2.2 最大代謝率 （MMR）的測定

將實驗魚放入不同濃度的亞硝酸鹽水環(huán)境中，實驗水體為100 L，脅迫96 h后將實驗魚放入環(huán)形水道內，參照JEROEN等［28］的方法，人工驅趕實驗魚5～10 min，使之力竭，力竭判斷標準為實驗魚不再游泳前進，在20 s內立刻將實驗魚轉移到呼吸室中，測定水中溶氧的變化，根據(jù)代謝率公式計算相關數(shù)值，以測量值的最大值作為MMR［16，29］。

1.2.2.3 有氧代謝范圍（AS）的測定

有氧代謝范圍 AS值為 MMR與 SMR之差［31］。

1.2.3 高鐵血紅蛋白比例 （MHb／Hb）測定

將實驗魚放入不同濃度的亞硝酸鹽水環(huán)境中脅迫，實驗水體為200 L，分別于脅迫 24、48、72、96 h后采樣，每次每組隨機采樣5 ind。MS-222進行麻醉，濕紗布裹住魚體，露尾部，用浸潤肝素鈉的2 mL注射器從實驗魚尾靜脈采集血液1 mL左右，時間不超過1 min，置于潔凈的2 mL離心管中，血樣保存于 -80℃ 冰箱中備用。MHb／Hb采用江蘇省南京建成生物工程研究所有限公司試劑盒進行測定，具體操作參照說明書，用Synergy H1酶標儀 （Bio-tek，USA）檢測其吸光值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

實驗數(shù)據(jù)均為平均值±標準差（x±SD）。數(shù)據(jù)處理使用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件，所有實驗結果用單因素方差分析 （one-way ANOVA）進行顯著性檢測，若方差分析差異顯著，則再用 Duncan進行多重比較，顯著水平 P為0.05；采用曲線模型進行回歸分析，顯著水平P為0.05。

2 結果與分析

2.1 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽呼吸代謝的變化

2.1.1 亞硝酸鹽脅迫下標準代謝率（SMR）的變化

與對照組（182.14±6.67）mg·（kg·h）－1相比，異育銀鯽SMR隨水環(huán)境亞硝酸鹽濃度的升高而顯著升高 （P＜0.05），當水環(huán)境亞硝酸鹽濃度為 0.5、1、1.5 mg·L－1時，SMR分別增加了16%、28%和40% （圖1）。通過回歸分析，SMR與水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈二次方回歸關系：y＝181．995＋67．237x－12．577x2，R2＝1．000，P＜0.05。

圖1 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽標準代謝率的變化Fig.1 Changes of standard metabolic rate of C．a(chǎn)uratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示試驗組與對照組具有顯著差異（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

2.1.2 亞硝酸鹽脅迫下最大代謝率 （MMR）的變化

與對照組（549.52 ±14.81）mg·（kg·h）－1相比，異育銀鯽MMR隨水環(huán)境亞硝酸鹽濃度的升高而顯著降低（P＜0.05），當水環(huán)境亞硝酸鹽濃度為 0.5、1、1.5 mg·L－1時，MMR分別減少了12%、16%和18% （圖2）。通過回歸分析，MMR與水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈二次方回歸關系：y＝548．662－143．193x－54．502x2，R2＝0．997，P＜0.05。

圖2 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽最大代謝率的變化Fig.2 Changes of the maximum metabolic rate of C．a(chǎn)uratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示試驗組與對照組具有顯著差異（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

2.1.3 亞硝酸鹽脅迫下有氧代謝范圍 （AS）的變化

與對照組（367.38±4.78）mg·（kg·h）－1相比，異育銀鯽AS隨水環(huán)境亞硝酸鹽濃度的升高而顯著降低（P＜0.05），當水環(huán)境亞硝酸鹽濃度為 0.5、1、1.5 mg·L－1時，AS分別減少了25%、39%和45% （圖3）。通過回歸分析，AS和水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈二次方回歸關系：y＝366．668－210．431x＋67．079x2，R2＝0.999，P＜0.05。

圖3 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽有氧代謝范圍的變化Fig.3 Changes of aerobic scope of C．a(chǎn)uratus gibelio under nitrite stress注：“*”表示試驗組與對照組具有顯著差異（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

2.2 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽高鐵血紅蛋白比例 （MHb／Hb）的變化

隨水環(huán)境亞硝酸鹽濃度的升高，異育銀鯽MHb／Hb顯著升高 （P＜0.05）。異育銀鯽在亞硝酸鹽濃度為0.5 mg·L－1及3 mg·L－1的水環(huán)境中96 h后MHb／Hb分別為0.05±0.00和0.23±0.01，是對照組的2.2和10倍 （圖4）。通過回歸分析，MHb／Hb和水環(huán)境亞硝酸鹽濃度存在三次方回歸關系：y＝0．017＋0．072x－0．05x2＋0．015x3，R2＝0.998，P＜0.05。在本實驗范圍內，異育銀鯽MHb／Hb在48 h內趨于穩(wěn)定。

圖4 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽高鐵血紅蛋白比例的變化Fig.4 Methemoglobin proportion of C．a(chǎn)uratus gibelio exposed to nitrite stress注：“*”表示試驗組與對照組具有顯著差異（P＜0.05）Note：“*” represents significant differences between the experiment group and control group（P＜0.05）

3 討論

3.1 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽標準代謝率（SMR）及最大代謝率（MMR）的變化規(guī)律

在本實驗范圍內，異育銀鯽SMR與水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈正相關，MMR則與之呈負相關，MMR和SMR反映了生物體有氧能量代謝的上限和下限［16］。結果表明，在高亞硝酸鹽脅迫下，維持異育銀鯽基本生存的能量需求升高，可提供的有氧代謝總能量降低。根據(jù)陳家長等［6］、單娜［26］、TONI等［32］的研究，在高亞硝酸鹽水環(huán)境中，魚體血液中溶菌酶、堿性磷酸酶、補體 C3、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶的活性均顯著降低，導致機體免疫力下降，增加了對致病菌的易感性，因此異育銀鯽所需能量增加，用于修復自身機能并維持基本生理功能［8，33］。INSEOK等［34］的研究表明，在高亞硝酸鹽水環(huán)境中，葡萄糖和總蛋白含量顯著下降，證明了魚體內大量能量物質的損耗；STORMER等［35］發(fā)現(xiàn)魚體乳酸含量隨亞硝酸鹽含量的升高而顯著升高，說明魚體無氧代謝能力增強，間接說明了魚體有氧代謝能力下降，導致游泳能力下降，逃逸、捕食及繁殖等行為均受到限制［36－37］。

3.2 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽有氧代謝范圍（AS）的變化規(guī)律

在本實驗范圍內，異育銀鯽的AS與水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈負相關，即在高濃度亞硝酸鹽水環(huán)境中完成有氧代謝活動的范圍變窄，包括攝食、生長及繁殖等［18］。當生存環(huán)境惡化時，魚體需要更多的能量應對脅迫，而可提供的有氧代謝能量減少，CLAIREAUX等［30］的研究結果表明，低AS不能滿足魚類攝食消化的能量需求，易造成生理與活動過程對能量需求的沖突，尤其不利于幼魚的生長并且會降低魚體應對環(huán)境變化的能力，導致死亡率顯著升高［37－38］。JEROEN等［29］發(fā)現(xiàn)歐洲鱸 （Perca fluviatilis Linneaus）在臨近致死溫度（CTmax）的水環(huán)境中，通過增加溶氧水平能增加AS，在高亞硝酸鹽水環(huán)境中能否通過升高溶氧水平來增加異育銀鯽的AS，以增強魚體應對脅迫的能力，有待進一步研究。

3.3 亞硝酸鹽脅迫下異育銀鯽高鐵血紅蛋白比例 （MHb／Hb）變化規(guī)律

在高亞硝酸鹽水環(huán)境下，異育銀鯽血液中MHb／Hb顯著升高，說明其載氧能力下降。高亞硝酸鹽使亞鐵血紅蛋白（Fe2＋）迅速轉化成高鐵血紅蛋白（Fe3＋），同時失去攜氧功能，導致魚體載氧能力顯著下降，造成魚體組織缺氧，有氧代謝能力下降［35］，因此推測高亞硝酸鹽環(huán)境中的異育銀鯽AS下降應與MHb／Hb密切相關。此外，在本實驗中MHb／Hb與水環(huán)境亞硝酸鹽濃度呈三次方回歸關系，亞硝酸鹽濃度由2 mg·L－1上升至3 mg·L－1時，MHb／Hb快速升高，說明在此范圍異育銀鯽對亞硝酸鹽脅迫有敏感點，這與陳家長等［6］對尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）的研究結果相似，亞硝酸鹽濃度小于1.5 mg·L－1時，尼羅羅非魚血清非特異性免疫酶（溶菌酶、堿性磷酸酶、補體C3）活性與對照組相比無顯著性差異，高于3 mg·L－1的脅迫會顯著降低魚體血清非特異性免疫酶的活性。

4 小結

本研究結果顯示在高濃度亞硝酸鹽脅迫下，異育銀鯽一方面通過各項生理活動來應對脅迫的影響，導致SMR升高，另一方面由于 MHb／Hb上升導致魚體載氧能力的下降，MMR下降，AS減小，因此從有氧代謝角度考慮，可以探索在高亞硝酸鹽水環(huán)境中通過增加溶氧量緩解高亞硝酸鹽對魚體的脅迫。

參考文獻：

［1］ 王鴻泰，胡德高.池塘中亞硝酸鹽對草魚種的毒害及防治［J］.水產(chǎn)學報，1989，13（3）：207－213.WANG H T，HU D G.Toxicity of nitrite to grass carp（Ctenopharyngodon idellus）in ponds and its way of prevention［J］.Journal of Fisheries of China，1989，13（3）：207－213.

［2］ HILMY A M.Acute and chronic toxicity of nitrite to Clarias lazera［J］.Comparative Biochemistry Physiology Part C：Pharmacology Toxicology，1987，86（2）：247－254.

［3］ LI Y L，CLAUDE E B.Laboratory tests of bacterial amendments for accelerating oxidation rates of ammonia，nitrite and organic matter in aquaculture pond water［J］.Aquaculture，2016（460）：45－58.

［4］ SUN H J，LI J J，TANG L S，et al.Responses of crucian carp Carassius auratus to long-term exposure to nitrite and low dissolved oxygen levels［J］.Biochemical Systematics and Ecology，2012（44）：224－232.

［5］ XU Z X，LI E C，XU C，et al.Response of AMP-activated protein kinase and energy metabolism to acute nitrite exposure in the Nile tilapia Oreochromis niloticus［J］.Aquatic Toxicology，2016（177）：86－97.

［6］ 陳家長，臧學磊，孟順龍，等.亞硝酸鹽氮脅迫對羅非魚（GIFT Oreochromis niloticus）血清非特異性免疫酶活性的影響［J］.生態(tài)環(huán)境學報，2012，21（5）：897－901.CHEN JC，ZANGX L，MENGSL，et al.Effect of nitrite nitrogen stress on the activities of nonspecific immune enzymes in serum of tilapia（GIFT Oreochromis niloticus） ［J］.Ecology and Environmental Sciences，2012，21（5）：897－901.

［7］ JIA R，LIU B L，HAN C，et al.The physiological performance and immune response of juvenile turbot（Scophthalmus maximus）to nitrite exposure［J］.Comparative Biochemistry Physiology Part C：Pharmacology Toxicology，2016（181－182）：40－46.

［8］ XIA J G，CAO Z D，PENG J L，et al.The use of spontaneous behavior，swimming performances and metabolic rate to evaluate toxicity of PFOS on topmouth gudgeon Pseudorasbora parva［J］.Acta Ecologica Sinica，2014（34）：284－289.

［9］ 陳松波，陳偉興，范兆廷.魚類呼吸代謝研究進展［J］.水產(chǎn)學雜志，2004，17（1）：82－89.CHEN S B，CHEN W X，F(xiàn)AN Z T.Advances in research on fish respiration metabolism［J］.Chinese Journal of Fisheries，2004，17（1）：82－89.

［10］ PECK M A，MOYANO M.Measuring respiration rates in marine fish larvae：challenges and advances［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：173－205.

［11］ EDITORIAL.Metabolic rate in fishes：definitions，methods and significance for conservation physiology［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：1－9.

［12］ CHABOT D，STEFFENSEN J F，F(xiàn)ARRELL A P.The determination of standard metabolic rate in fishes［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：81－121.

［13］ ENDERSEC，BOISCLAIR D.Effects of environmental fluctuations on fish metabolism：Atlantic salmon Salmo salar as a case study［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：344－358.

［14］ 徐革鋒，尹家勝，韓 英.溫度對細鱗鮭幼魚最大代謝率和代謝范圍的影響［J］.水生態(tài)學雜志，2014，35（3）：56－60.XU G F，YIN J S，HAN Y.Effects of temperature on maximum metabolic rate and metabolic scope of juvenile manchurian trout，Brachymystax lenok（Pallas）［J］.Journal of Hydroecology，2014，35（3）：56－60.

［15］ 呂 富，潘魯青，王愛民，等.鹽度對異育銀鯽呼吸和氨氮排泄生理的影響［J］.水生生物學報，2010，34（1）：184－189.LV F，PAN L Q，WANG A M，et al.Effects of salinity on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of allogynogemetic crucian carp［J］.Acta Hydrobiologica Sinica，2010，34（1）：184－189.

［16］ NORIN T，CLARK T D.Measurement and relevance of maximum metabolic rate in fishes［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：122－151.

［17］ 楊 陽，曹振東，付世建.溫度對鳊幼魚臨界游泳速度和代謝范圍的影響［J］.生態(tài)學雜志，2013，32（5）：1260－1264.YANG Y，CAO Z D，F(xiàn)U S J.Effects of water temperature on the critical swimming speed and metabolic scope of juvenile Parabramis pekinensis［J］.Chinese Journal of Ecology，2013，32（6）：1260－1264.

［18］ DAVOODI F，CLAIREAUX G.Effects of exposure to petroleum hydrocarbons upon the metabolism of the common sole Solea solea［J］.Marine Pollution Bulletin，2007，54（7）：1－9.

［19］ 魏泰莉，余瑞蘭，聶湘平，等.水中亞硝酸鹽對彭澤鯽血紅蛋白及高鐵血紅蛋白的影響［J］.大連水產(chǎn)學院學報，2001，16（1）：67－71.WEI T L，YU R L，NIE X P，et al.Harmful effect of nitrite on hemoglobin and ferrihemoglobin of crucian carp［J］.Journal of Dalian Fisheries University，2001，16（1）：67－71.

［20］ SJANNIE L，F(xiàn)RANK B J，DO T H，et al.Haematological and ion regulatory effects of nitrite in the air-breathing snakehead fish Channa striata［J］.Aquatic Toxicology，2012（118－119）：48－53.

［21］ 趙元鳳，祝國芹，呂景才.亞硝酸鹽對尼羅羅非魚的毒性及其機理的研究［J］.大連水產(chǎn)學院學報，1991，6（1）：62－65.ZHAO Y F，ZHU G Q，LV J C.A study on toxicity and mechanism of nitrite to Tilapia nilotica［J］.Journal of Dalian Fisheries University，1991，6（1）：62－65.

［22］ SHAO L Y，ZHU X M，YANG Y X.Effects of dietary vitamin A on growth，hematology，digestion and lipometabolism of on-growing gibel carp（Carassius auratus gibelio）［J］.Aquaculture，2016（460）：83－89.

［23］ 陳 勇，周洪琪，余奇文，等.異育銀鯽實驗性免疫抑制模型的建立［J］.水產(chǎn)學報，2005，29（2）：227－231.CHEN Y，ZHOU H Q，YU QW，et al.Preliminary study on establishing the experimental immunosuppression model of allogynogenetic silver crucian carp［J］.Journal of Fisheries of China，2005，29（2）：227－231.

［24］ 雷衍之.養(yǎng)殖水環(huán)境化學實驗［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：50－60.LEI Y Z.Aquaculture water environmental chemistry experiment［M］.Beijing：China Agriculture Press，2006：50－60.

［25］ 譚樹華，何典翼，嚴 芳.亞硝酸鈉對鯽魚肝臟丙二醛含量和總抗氧化能力的影響［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報，2005（24）：21－24.TAN SH，HE D Y，YAN F.Effects of NaNO2on malondialdehyde content and total antioxidative capacity in the liver of Carassius auratus［J］.Journal of Agro-Environment Science，2005（24）：21－24.

［26］ 單 娜.不同環(huán)境和生物源性因素對異育銀鯽血漿生化指標的影響［D］.上海：上海海洋大學，2016.SHAN N.Effects of different environmental and biological stresses on biochemical indexes in the plasma of gibel carp Carassius auratus gibelio［D］.Shanghai：Shanghai Ocean University，2016.

［27］ ROSEWARNE PJ，WILSON JM，SVENDSEN JC.Measuring maximum and standard metabolic rates using intermittent-flow respirometry：A student laboratory investigation of aerobic metabolic scope and environmental hypoxia in aquatic breathers［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：265－283.

［28］ RODGERS G G，TENZING P，CLARK T D.Experimental methods in aquatic respirometry：the importance of mixing devices and accounting for background respiration［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：65－80.

［29］ JEROEN B，F(xiàn)REDRIK J，TIMOTHY D，et al.Experimental manipulations of tissue oxygen supply do not affect warming tolerance of European perch［J］.The Journal of Experimental Biology，2015（218）：2448－2454.

［30］ CLAIREAUX G，CHABOT D.Responses by fishes to environmental hypoxia：integration through fry’s concept of aerobic metabolic scope［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：232－251.

［31］ REIDY SP，KERR SR，NELSON JA.Aerobic and anaerobic swimming performance of individual Atlantic cod［J］.Journal of Experimental Biology，2000（203）：347－357.

［32］ TONI C，F(xiàn)ERREIRA D，KREUTZ L C，et al.Assessment of oxidative stress and metabolic changes in common carp（Cyprinus carpio）acutely exposed to different concentrations of the fungicide tebuconazole［J］.Chemosphere，2011（83）：579－584.

［33］ LUCASJ，BONNIEUX A，LYPHOUT L，et al.Trophic contamination by pyrolytic polycyclic aromatic hydrocarbons does not affect aerobic metabolic scope in zebrafish Danio rerio［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：433－442.

［34］ INSEOK P，JINHWAN L，JUNWOOK H，et al.Acute toxicity and sublethal effects of nitrite on selected hematological parameters and tissues in dark-banded rockfish，Sebastes inermis［J］.Journal of the World Aquaculture Society，2007，38（2）：188－199.

［35］ STORMER J，JENSEN F B，RANKIN J C.Uptake of nitrite，nitrate，and bromide in rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）：effects on ionic balance［J］.Canadian Journal of Fisheries＆ Aquatic Sciences，2011，53（9）：1943－1950.

［36］ 張 怡，夏繼剛，曹振東，等.急性銅暴露對中華倒刺幼魚游泳能力的影響［J］.生態(tài)學雜志，2013，32（9）：2451－2456.ZHANG Y，XIA J G，CAO Z D，et al.Effects of acute copper exposure on the swimming performances of juvenile Spinibarbusb sinensis［J］.Chinese Journal of Ecology，2013，32（9）：2451－2456.

［37］ METCALFE N B，LEEUWEN T E，KILLEN S S.Does individual variation in metabolic phenotype predict fish behaviour and performance［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：298－321.

［38］ ELIASON E J，F(xiàn)ARRELL A P.Oxygen uptake in Pacific salmon Oncorhynchus spp.：when ecology and physiology meet［J］.Journal of Fish Biology，2016（88）：359－388.