• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      TQ17對(duì)大鼠胚胎-胎仔發(fā)育毒性研究

      2020-04-11 02:13:54龔夏實(shí)毛閃閃龐聰周文李繼洪
      醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2020年2期
      關(guān)鍵詞:胎鼠環(huán)磷酰胺小劑量

      龔夏實(shí),毛閃閃,龐聰,周文,李繼洪

      (1.武漢大學(xué)藥學(xué)院,武漢 430079; 2.湖北天勤生物科技有限公司武漢分公司, 武漢 430071)

      類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種全身性自身免疫性疾病,臨床上以對(duì)稱性、破壞性的關(guān)節(jié)病變?yōu)橹?,患者可表現(xiàn)為晨僵、關(guān)節(jié)腫脹及功能下降[1],嚴(yán)重影響人們的健康生活。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎累及人群較廣,患有風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等免疫性疾病的孕婦,需用藥物緩解疼痛和其他炎癥并發(fā)癥,而具有選擇性的環(huán)氧合酶(cyclooxygenase,COX)抑制劑在孕期中應(yīng)用普遍[2],妊娠期用藥需謹(jǐn)慎,從而避免藥物對(duì)胎兒的不良影響[3]。研究表明:治療RA的代表藥物塞來昔布可引起非洲爪蟾蜍COX-2基因表達(dá)增加[4],因此在孕期使用非甾體抗炎藥時(shí),需對(duì)此類藥物進(jìn)行孕期風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。TQ17是一種新型的非甾體類抗炎藥,作用機(jī)制是選擇性抑制COX-2,從而抑制花生四烯酸,最終生成前列腺素(prostaglandin,PG),即減少前列腺素。筆者對(duì)TQ17的胚胎-胎仔發(fā)育毒性進(jìn)行研究,為臨床安全用藥提供依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 10~11周齡無特定病原體(SPF)級(jí)SD大鼠,雌鼠120只,雄鼠90只。動(dòng)物體質(zhì)量,雌性215.40~273.49 g,雄性341.86~437.34 g。由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(京)2016-0011 ,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào):SYXK(鄂)2016-0090。飼料為北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供的專用鼠顆粒飼料,飲水為高壓滅菌水。室溫20~26 ℃,相對(duì)濕度40%~70%,光照為明12 h,暗12 h。

      1.2藥品與試劑 TQ17(湖北天勤生物科技有限公司武漢分公司,批號(hào):170307);環(huán)磷酰胺(山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司,批號(hào):K94718,含量:97%,實(shí)驗(yàn)時(shí)用0.9%氯化鈉注射液稀釋配成所需的受試濃度);羧甲基纖維素鈉(CMC-Na,湖州展望藥業(yè)有限公司,批號(hào):20160301);0.9%氯化鈉注射液(武漢濱湖雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號(hào):1604250711);苦味酸(天津市大茂化學(xué)試劑廠,批號(hào):20170123);甲醛(批號(hào):20161011)、冰醋酸(批號(hào):20160728)、氫氧化鉀(批號(hào):20150527)、甘油(批號(hào):20161205)、茜素紅(批號(hào):20151204)均由國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供。

      1.3儀器 電子天平(美國(guó)Ohous公司); LS220A電子天平(普利賽斯公司,感量:0.1 mg);E200MV生物顯微鏡(日本NIKON公司);DQ-8UV超純水機(jī)(Millipore);數(shù)顯游標(biāo)卡尺。

      1.4給藥劑量設(shè)計(jì) 參照文獻(xiàn)[5-7],TQ17大鼠藥效學(xué)有效劑量為6 mg·kg-1·d-1。小劑量組:30 mg·kg-1·d-1,為大鼠藥效學(xué)有效劑量的5倍;大劑量組:350 mg·kg-1·d-1,約為大鼠藥效學(xué)有效劑量的58倍。模型對(duì)照組:給予同體積0.5%CMC-Na溶液(溶媒)1 mL·(100 g)-1。環(huán)磷酰胺組:環(huán)磷酰胺15 mg·kg-1·d-1。

      1.5實(shí)驗(yàn)方法 參照文獻(xiàn)[5-8],SPF級(jí)SD大鼠按雌雄1:1和2:1比例合籠,合籠時(shí)間為5 d,每日對(duì)雌鼠進(jìn)行陰栓或陰道涂片檢查,以查到陰栓或精子日定為妊娠第0天,交配期間每日記錄交配情況。90只交配成功的雌鼠按隨機(jī)分到TQ17大、小劑量組,環(huán)磷酰胺組,模型對(duì)照組;TQ17大、小劑量組23只,環(huán)磷酰胺組、模型對(duì)照組各22只。模型對(duì)照組和TQ17 小、大劑量組于妊娠第6天至第15天灌胃給藥,每日1次;環(huán)磷酰胺組于妊娠第12天頸背部皮下注射給藥。孕鼠于妊娠第20天解剖。

      1.6觀察指標(biāo) 記錄黃體數(shù)、著床數(shù)、吸收胎數(shù)、活胎數(shù)、死胎數(shù)和連胎子宮質(zhì)量?;钐プ兄鹨粰z查外觀、性別,稱定體質(zhì)量,并測(cè)量頂臀長(zhǎng)和尾長(zhǎng)。每窩取1/2胎仔放入Bouin氏液固定,作內(nèi)臟檢查,另1/2胎仔固定于體積分?jǐn)?shù)75%乙醇做骨骼畸形檢查。

      2 結(jié)果

      2.1TQ17對(duì)孕鼠體質(zhì)量的影響 與模型對(duì)照組比較,TQ17大劑量組孕鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)顯著減慢,妊娠第7天至第15天、第20天顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);環(huán)磷酰胺組在大鼠妊娠第13天和第20天顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。見表1。

      2.2TQ17對(duì)孕鼠攝食量的影響 與模型對(duì)照組比較,TQ大劑量組在妊娠第7天、第14天攝食量極顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表2。

      2.3TQ17對(duì)孕鼠生殖能力的影響 與模型對(duì)照組比較,TQ17大,小劑量組著床數(shù)、活胎和死胎差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表3。

      2.4TQ17對(duì)胚胎形成及外觀的影響 與模型對(duì)照組比較,TQ17各組對(duì)胚胎形成及外觀差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);環(huán)磷酰胺組胎鼠平均體質(zhì)量、身長(zhǎng)、尾長(zhǎng)和連胎子宮重極顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),胎鼠露腦、肢畸型、趾畸型極顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01 或P<0.05),見表4,5。

      2.5TQ17對(duì)胎鼠內(nèi)臟的影響 與模型對(duì)照組比較,TQ17小、大劑量組胎鼠內(nèi)臟無顯著性影響,環(huán)磷酰胺組胎鼠內(nèi)臟畸形率極顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表6。

      2.6TQ17對(duì)胎鼠骨骼的影響 與模型對(duì)照組比較,環(huán)磷酰胺組胎鼠骨骼的畸形或變異顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01或P<0.05);TQ17大劑量致胎鼠胸骨的畸形或變異顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表7[7]。

      3 討論

      COX是花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素的限速酶,有COX-1、COX-2和COX-3三種表現(xiàn)形式,其中COX-2是體內(nèi)多種細(xì)胞響應(yīng)創(chuàng)傷和炎癥而產(chǎn)生的[9-10]。研究表明,在小鼠胃黏膜急性損傷期,COX-2 mRNA及蛋白質(zhì)水平升高,COX-2 mRNA及蛋白質(zhì)可修復(fù)胃黏膜損傷[11],COX-2選擇性抑制劑對(duì)胃腸道可能有一定毒副作用。前列腺素不僅為疼痛遞質(zhì),還可調(diào)節(jié)骨細(xì)胞功能[10],即前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)可以刺激成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的分化[12],而COX-2作為PGE2合成的限速酶,通過調(diào)節(jié)PGE2影響骨生成。COX-2抑制劑亦可引起胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩,影響骨骼發(fā)育[13]。

      表1 4組孕鼠不同時(shí)間體質(zhì)量比較

      組別大鼠/只第0天第3天第7天第8天第9天第10天模型對(duì)照組22247.84±12.82272.85±13.04302.57±14.40308.71±15.33314.88±16.62320.93±15.82環(huán)磷酰胺組22248.37±13.32273.16±13.41302.16±15.44306.83±14.31314.40±14.95320.66±14.64TQ17 小劑量組23249.67±17.82274.74±18.08297.43±21.95306.02±19.54310.47±22.22318.84±20.17 大劑量組23249.62±14.75273.66±13.85286.13±13.31①285.36±12.61①287.35±11.48①294.12±12.66①組別第11天第12天第13天第14天第15天第20天模型對(duì)照組329.32±16.39335.73±16.71341.65±16.65349.28±15.69357.90±16.00434.38±21.01環(huán)磷酰胺組326.57±15.72334.26±14.27328.22±15.41②341.14±13.62348.21±13.52399.16±21.05①TQ17 小劑量組323.71±23.44331.68±20.34335.88±23.76344.40±21.74355.05±23.15437.04±30.94 大劑量組295.63±13.30①297.96±15.07①305.01±16.49①307.94±18.42①312.96±21.42①406.71±24.51①

      ①與模型對(duì)照組比較,P<0.01,②與模型對(duì)照組比較,P<0.05。

      ①Compared with model control group,P<0.01,②compared with model control group,P<0.01.

      表2 4組孕鼠不同時(shí)間攝食量的比較

      組別大鼠/只劑量/(mg ·kg-1)妊娠第0天妊娠第7天妊娠第14天妊娠第20天模型對(duì)照組22-8.13±0.669.30±2.787.71±0.576.89±0.86環(huán)磷酰胺組22157.70±0.549.60±1.357.90±0.916.82±0.66TQ17 小劑量組23308.23±0.528.09±1.227.88±0.756.37±0.99 大劑量組233508.17±0.61 5.91±2.69① 5.98±1.92①7.91±1.27

      ①與模型對(duì)照組比較,P<0.01。

      ①Compared with model control group,P<0.01.

      表3 TQ17 對(duì)致畸敏感期孕鼠的影響

      組別大鼠/只劑量/(mg ·kg-1)著床數(shù)活胎數(shù)死胎數(shù)模型對(duì)照組22-15.32±2.0114.95±2.170.05±0.21環(huán)磷酰胺組221516.50±1.7115.55±2.320.32±0.65TQ17 小劑量組233015.48±3.2515.13±3.510.00±0.00 大劑量組2335015.39±2.0214.83±2.610.00±0.00

      表4 TQ17對(duì)胚胎形成的影響

      組別孕鼠/只劑量/(mg ·kg-1)子宮連胎質(zhì)量/g吸收胎數(shù) 黃體數(shù)個(gè)模型對(duì)照組22-85.72±11.640.32±0.5720.41±2.61環(huán)磷酰胺組221557.59±12.89①0.64±1.2619.45±2.39TQ17 小劑量組233088.89±20.640.35±0.7119.91±3.74 大劑量組2335087.11±14.160.57±1.3121.09±3.63

      ①與模型對(duì)照組比較,P<0.01。

      ①Compared with model control group,P<0.01.

      表5 TQ17對(duì)致畸敏感期胎仔生長(zhǎng)發(fā)育及外觀影響

      組別劑量/(mg ·kg-1)大鼠/只性別比(雄/雌)胎鼠身長(zhǎng)胎鼠尾長(zhǎng)cm胎鼠體質(zhì)量/g模型對(duì)照組-220.93±0.513.81±0.191.37±0.103.84±0.36環(huán)磷酰胺組15221.21±0.692.85±0.40①1.17±0.17①2.29±0.51①TQ17 小劑量組30230.78±0.433.79±0.221.37±0.173.89±0.32 大劑量組350230.90±0.553.83±0.181.38±0.093.87±0.37組別皮下出血露腦肢畸型趾畸型只模型對(duì)照組2.23±3.150.00±0.000.00±0.000.00±0.00環(huán)磷酰胺組2.09±3.662.59±4.94①4.23±5.82②7.32±6.03②TQ17 小劑量組1.57±1.670.00±0.000.00±0.000.00±0.00 大劑量組1.83±1.800.00±0.000.00±0.000.00±0.00

      ①與模型對(duì)照組比較,P<0.01;②與模型對(duì)照組比較,P<0.05。

      ①Compared with model control group,P<0.01;②Compared with model control group,P<0.05.

      表6 TQ17對(duì)胎鼠內(nèi)臟的影響

      ①當(dāng)1只胎仔出現(xiàn)兩種畸形時(shí)畸形數(shù)僅計(jì)算1次;②與模型對(duì)照組比較,P<0.01。

      ①the deformity is counted as one when two deformities exist in a foetus;②Compared with model control group,P<0.01.

      表7 TQ17對(duì)胎鼠骨骼發(fā)育的影響

      ①與模型對(duì)照組比較,P<0.01;②當(dāng)1只胎仔出現(xiàn)兩種畸形時(shí)畸形數(shù)僅計(jì)算1次。

      ①Compared with model control group,P<0.01;②the deformity is counted as one when two deformities exist in a foetus.

      TQ17為治療RA的非甾體抗炎藥,選擇性抑制COX-2,可能對(duì)胃腸道產(chǎn)生影響,致使大劑量組孕鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)緩慢。本實(shí)驗(yàn)特設(shè)環(huán)磷酰胺為環(huán)磷酰胺組,環(huán)磷酰胺組對(duì)胎兒宮內(nèi)骨骼發(fā)育產(chǎn)生明顯毒性反應(yīng)[14]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,環(huán)磷酰胺對(duì)胚胎形成有極顯著阻礙作用,胎鼠外觀畸形極顯著增加,胎鼠內(nèi)臟和骨骼的畸形或變異顯著增加;TQ17小劑量對(duì)胚胎形成、胎鼠外觀形態(tài)、內(nèi)臟發(fā)育和骨骼發(fā)育均無明顯影響;大劑量對(duì)胎鼠胸骨的畸形或變異較模型對(duì)照組相比有顯著性升高,但對(duì)胚胎形成、胎鼠外觀形態(tài)、內(nèi)臟發(fā)育均無明顯影響,可能對(duì)胸骨發(fā)育有影響。在實(shí)試驗(yàn)條件下,TQ17 30 mg· kg-1·d-1對(duì)母體一般狀況和子代發(fā)育沒有影響,350 mg· kg-1·d-1對(duì)胎鼠胸骨發(fā)育有毒性作用,TQ17有致畸風(fēng)險(xiǎn)。

      猜你喜歡
      胎鼠環(huán)磷酰胺小劑量
      環(huán)磷酰胺聯(lián)合潑尼松治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床療效觀察
      小劑量激素治療在更年期綜合征治療中的應(yīng)用探究
      甘肅科技(2020年21期)2020-04-13 00:34:14
      小劑量 大作用 肥料增效劑大有可為
      全反式蝦青素對(duì)環(huán)磷酰胺誘發(fā)小鼠睪丸氧化損傷的保護(hù)作用
      胚胎大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元原代培養(yǎng)及神經(jīng)元鑒定
      不同胎齡胎鼠脊髓源性神經(jīng)干細(xì)胞特性比較
      1例兒童靜脈滴注異環(huán)磷酰胺致癲癇樣大發(fā)作的護(hù)理體會(huì)
      維甲酸誘導(dǎo)BALB/c近交系小鼠腭裂動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究
      小劑量輻射比格犬模型的初步研究
      VPA-906A型全自動(dòng)小劑量包裝機(jī)
      黑河市| 宣化县| 沛县| 双柏县| 大宁县| 册亨县| 庄河市| 青海省| 宁城县| 沙湾县| 周宁县| 大关县| 汤原县| 大同市| 汉川市| 龙里县| 房产| 东辽县| 安义县| 丹巴县| 阿克陶县| 鄂托克前旗| 荔浦县| 水城县| 昭苏县| 客服| 环江| 页游| 南开区| 迁西县| 黄浦区| 平和县| 来凤县| 卢氏县| 上高县| 建昌县| 花莲县| 石阡县| 赤壁市| 北票市| 栾川县|