新型冠狀病毒肺炎疫情下治療藥物監(jiān)測實驗室氣溶膠產(chǎn)生風(fēng)險及應(yīng)對*

熊 歆，張現(xiàn)化，李曉娜，趙榮生，楊 麗△

（1.北京大學(xué)第三醫(yī)院藥劑科，北京100191；2.北京大學(xué)治療藥物監(jiān)測與臨床毒理中心，北京100191）

自2019年12月武漢出現(xiàn)首例新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）以來，疫情迅速蔓延至全國。截至2020年2月27日9：00，全國（含港、澳、臺）累計報告確診病例78 211例，累計死亡病例2 720例。目前發(fā)現(xiàn)，人群對嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2型（SARS-CoV-2）普遍易感。傳染源主要是COVID-19患者，包括無癥狀感染者[1-2]。除呼吸道飛沫傳播和密切接觸傳播外，在相對封閉環(huán)境中長時間暴露于氣溶膠也有感染可能[1]。醫(yī)療機構(gòu)中從事治療藥物監(jiān)測（TDM）工作的藥學(xué)實驗室，尤其是本次疫情定點醫(yī)院的TDM實驗室工作中，體液標(biāo)本前處理、檢測分析相關(guān)操作步驟可能產(chǎn)生氣溶膠，工作人員面臨微生物、化學(xué)試劑氣溶膠的職業(yè)暴露風(fēng)險與個人防護壓力，需防范和降低其危害[3]。目前，人們對氣溶膠的認(rèn)識尚待完善，現(xiàn)就氣溶膠的定義、分類、產(chǎn)生、操作控制及個人防護等方面進行總結(jié)，以期為一線TDM工作人員防控氣溶膠危害提供參考。

1 氣溶膠的定義及分類

氣溶膠是固體微?；蛞后w小質(zhì)點分散并懸浮在空氣介質(zhì)中形成的相對穩(wěn)定的膠體分散體系。氣溶膠顆粒的動力學(xué)直徑為0.001～100 μm，其分類依據(jù)成因、物理狀態(tài)、顆粒大小及來源的不同而不同[4]，詳見表1。不同粒徑氣溶膠顆粒傳播特點[5]見表2。

表1 氣溶膠分類

表2 不同粒徑氣溶膠的傳播特點

TDM實驗室樣本操作過程中容易產(chǎn)生微生物氣溶膠、化學(xué)氣溶膠，其中微生物氣溶膠的危害主要來源于微生物本身的感染力、致病力、毒害力、存活力等[4]。據(jù)報道，流感病毒在各種相對濕度范圍內(nèi)的氣溶膠中于一定時間內(nèi)保持穩(wěn)定，并具有傳染性（部分亞型如H1N1為1 h）[6-7]，嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）、中東呼吸綜合征（MERS）和埃博拉病毒在患者一定距離（1 m）范圍內(nèi)存在氣溶膠傳播可能[8-10]。對于SARS-COV-2，目前證實部分患者（尤其是危重癥患者）出現(xiàn)病毒血癥時，其血液標(biāo)本具有傳染性[11]。對于TDM實驗室，實驗人員在相對封閉的環(huán)境中有暴露于高濃度氣溶膠并經(jīng)氣溶膠感染的風(fēng)險[1]。因此，建議開展TDM檢測工作的實驗室，將所有確診和疑似患者標(biāo)本按照急性傳染性疾病防護措施進行管理，以保護工作人員的安全。

2TDM實驗室氣溶膠的產(chǎn)生途徑

TDM實驗室樣本接收、處理過程中，若操作不慎均可能產(chǎn)生氣溶膠。易產(chǎn)生氣溶膠的操作包括但不限于以下操作[4，12-13]。

微量移液器吹吸：樣本吸取、轉(zhuǎn)移等操作中，使用微量移液器的槍頭向外排液時，如力量過大會造成液滴飛濺，可能伴隨氣溶膠產(chǎn)生。

樣本混勻：使用振蕩器、渦旋儀及超聲清洗儀時，由于劇烈振蕩，本身可產(chǎn)生大量氣溶膠。若操作不當(dāng)，容器密封不嚴(yán)或電壓不穩(wěn)等情況，可能發(fā)生溶液飛濺、溢灑或混勻時容器內(nèi)液流紊亂等形成氣溶膠。

離心：離心機停止轉(zhuǎn)動后打開機蓋易產(chǎn)生氣溶膠，會飄散于在地板和臺面上，造成室內(nèi)空氣污染，增加室內(nèi)工作人員的感染風(fēng)險。

意外：若離心過程中樣本管破裂，會造成液體飛濺，在離心管管壁及離心機內(nèi)產(chǎn)生氣溶膠，可能發(fā)生感染性污染。

3TDM實驗室氣溶膠的控制

3.1 實驗技術(shù)操作的控制

3.1.1 血液樣本接收操作

確認(rèn)樣本標(biāo)識：鑒于SARS-CoV-2傳染性強，用于確診或疑似患者標(biāo)本轉(zhuǎn)運的轉(zhuǎn)運箱應(yīng)有統(tǒng)一特殊標(biāo)識。實驗人員接收時需確認(rèn)轉(zhuǎn)運者和轉(zhuǎn)運箱的特殊標(biāo)識，沒有標(biāo)識時應(yīng)拒收標(biāo)本。

消毒樣本外包裝：確認(rèn)裝箱前有消毒環(huán)節(jié)，開箱前用75%乙醇噴霧消毒，取出生物安全罐。在生物安全柜中再取出標(biāo)本密封袋，用75%乙醇噴霧消毒。打開密封袋后，用75%乙醇消毒，再取出血液標(biāo)本。

信息記錄：該類標(biāo)本屬于高風(fēng)險標(biāo)本，應(yīng)有采集、轉(zhuǎn)運、接收環(huán)節(jié)的簽字，以便回溯。

運送標(biāo)本轉(zhuǎn)運箱：運送確診或疑似患者標(biāo)本的轉(zhuǎn)運箱，需用含1 000 mg/L有效氯的消毒液進行表面擦拭[14]。

3.1.2 離心血液樣本操作

1）推薦使用塑料離心管，離心前應(yīng)檢查離心管管蓋密閉性，有無破損。

2）離心時，操作者不能離開離心機。

3）離心時若使用套管，應(yīng)將管內(nèi)殘留物清理干凈。離心前可在套管中加入適當(dāng)?shù)南疽海@樣即便離心管破裂，也可減少感染性氣溶膠的產(chǎn)生[15]。

4）若離心過程中有異常聲響或警報，停止離心30 min以上，小心開蓋，75%乙醇噴霧消毒后處理。

5）離心過程若無意外，停止離心10 min以上，開蓋噴霧消毒后進行后續(xù)處理。

6）由于離心后離心管內(nèi)會產(chǎn)生大量的氣溶膠，離心管的開蓋操作應(yīng)在生物安全柜中進行，打開離心管蓋時動作應(yīng)輕柔緩慢，并縮短打開管蓋的持續(xù)時間。

3.1.3 血液樣本的滅活操作

血清或血漿樣本：離心分離出血清或血漿樣本后，在保證待測藥物的穩(wěn)定性不受加熱影響的情況下，推薦采用60～65℃加熱20～30 min滅活處理。

熱不穩(wěn)定樣本：若加熱影響檢測結(jié)果，則未滅活的血液樣本應(yīng)按未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料處理，可在生物安全二級實驗室開展，加三級生物安全防護。3.1.4超聲血液樣本操作

建議超聲過程加蓋（因該過程會產(chǎn)生大量氣溶膠）；超聲結(jié)束后，樣本應(yīng)靜置10 min以上；打開樣品瓶蓋操作應(yīng)在生物安全柜中進行，動作應(yīng)輕柔緩慢。

3.1.5 移液操作

血液樣本前處理過程中會涉及多步移液操作，移液器的吹吸過程易產(chǎn)生氣溶膠。建議對血液樣本進行的所有移液操作均應(yīng)在生物安全柜中進行；使用移液器移液時，生物安全柜臺面上應(yīng)鋪一層浸有消毒液的一次性吸水材料，以免樣本滴落臺面造成污染；向樣本處理管中加入血液樣本時，槍頭應(yīng)貼壁緩慢吹出，避免產(chǎn)生氣溶膠；不使用移液器吹打混勻血液樣本。

3.1.6 混勻血液樣本操作

振蕩前，應(yīng)檢查樣本處理管蓋的密閉性、有無破損，確保高速振蕩時不會漏液；血樣振蕩完成后，靜置10 min以上；打開樣品蓋操作在生物安全柜中進行。

3.1.7 意外灑落處理操作

在實驗操作過程中，樣本發(fā)生意外灑落時會產(chǎn)生氣溶膠污染，可使用高質(zhì)量濃度（5 500 mg/L）含氯消毒液的毛巾或紙巾覆蓋污染區(qū)，消毒30 min以上，并進行實驗室通風(fēng)換氣。如果有玻璃，用鑷子夾取，置銳器盒中，脫掉污染的外層手套，更換新手套。處理后的污染物也應(yīng)按照醫(yī)療廢物的相關(guān)規(guī)定進行規(guī)范處置。

3.1.8 檢測后樣本處理操作

SARS-CoV-2致病性高、風(fēng)險高，確診或疑似患者標(biāo)本不適宜長期保存。檢測剩余血液標(biāo)本應(yīng)在生物安全柜中重新加蓋管帽，當(dāng)日高壓消毒后再按醫(yī)療廢物處理。如果實驗室沒有高壓消毒條件，則建議雙層包裝袋密封后由專人運送到指定地點集中高壓消毒后按醫(yī)療廢物處理。標(biāo)本及包裝袋應(yīng)有特殊標(biāo)識，并單獨放置。嚴(yán)格按《醫(yī)療廢物管理條例》《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》有關(guān)規(guī)定進行規(guī)范處置。

3.2 設(shè)備的安全使用

3.2.1 移液器

TDM實驗室通常使用的是內(nèi)置活塞式移液器，液體與活塞間有一段空氣隔離，活塞與液體不接觸，但在移液過程中，樣本與空氣接觸可能會發(fā)生氣霧交叉污染，不僅造成樣品的交叉污染，還會威脅實驗室人員的健康。因此，推薦使用濾芯吸頭，可有效屏蔽氣溶膠對移液器的潛在污染，保護實驗人員健康；對于存在氣溶膠污染的移液器，使用完畢用75%乙醇擦拭徹底消毒，可放置于紫外燈下消毒0.5 h；建議移液器專用，不與其他移液器混用，放置生物安全柜中專用。

3.2.2 渦旋振蕩儀

使用時可能產(chǎn)生氣溶膠，建議所有進行渦流攪拌的樣本應(yīng)放置一段時間后，置生物安全柜內(nèi)再進行開蓋操作；使用完畢后用75%乙醇徹底消毒，小型渦旋振蕩儀可放置于紫外燈下消毒0.5 h。

3.2.3 離心機

離心機在高速運轉(zhuǎn)的過程中，周圍的空氣流動很快，會從離心機周圍和下方吸收污染物，并擴散到實驗室的空氣中形成氣溶膠。而離心的患者標(biāo)本或含有提取液的標(biāo)本，含有病原微生物、生物分子和前處理過程加入的有機試劑，同樣也會產(chǎn)生氣溶膠，對實驗人員健康造成危害。因此，推薦使用帶有防生物污染密封蓋的離心機，確保高速運轉(zhuǎn)過程中產(chǎn)生的氣溶膠能被安全隔離；且離心機能快速裝卸轉(zhuǎn)頭，方便把轉(zhuǎn)頭和樣本整體卸下，搬運至生物安全柜中進行操作；離心機使用完畢后用75%乙醇徹底消毒，如有條件，可置紫外燈下消毒0.5 h。

3.2.4 生物安全柜

生物安全柜是用于提供防護感染性材料濺出或微生物氣溶膠的主要裝置。建議使用二級生物安全柜，有保護工作人員的定向氣流，保護實驗材料的垂直層流和保護環(huán)境的排氣系統(tǒng)，A2，B1，B2型均可[11，16]；需年檢合格、性能驗證通過、運行指標(biāo)符合規(guī)范要求，并執(zhí)行每日功能監(jiān)測、清潔消毒等；每次開機時要用煙霧法或絲線檢測操作口的氣流方向；用75%乙醇擦拭消毒，作用30 min后，紫外線消毒30 min，風(fēng)機運行5 min后方可開始使用；使用時，最好一次性把需要的物品全部放入，不能在柜內(nèi)進行劇烈的實驗操作，不能在柜內(nèi)點酒精燈，操作時不能說話、咳嗽等，避免可能引發(fā)火災(zāi)事故和感染；使用完畢后風(fēng)機運行5 min，擦拭掉表面可見污物，并用75%乙醇擦拭，再用清水擦拭，然后打開紫外燈消毒0.5 h。

4 工作環(huán)境的防護

4.1 分區(qū)管理

TDM實驗室必須劃分出污染區(qū)、半污染區(qū)（緩沖區(qū)）和清潔區(qū)，以保護實驗人員的安全。對于基于體液標(biāo)本進行處理、測定分析的TDM實驗室，樣本接收、保存、前處理及分析檢測等工作區(qū)域均屬于污染區(qū)，走廊屬于緩沖區(qū)，而試劑耗材儲存區(qū)、辦公室、會議室以及文件室等屬于清潔區(qū)。對于污染區(qū)，負(fù)壓環(huán)境最理想[17]。

4.2 醫(yī)療垃圾管理

被污染的一次性手套、帽子、一次性口罩、鞋套、一次性隔離衣、接觸過標(biāo)本的醫(yī)療廢物如移液槍槍頭、離心管等需要放入專門的雙層醫(yī)用垃圾袋并標(biāo)注，實驗結(jié)束后進行高壓消毒[17]。高壓消毒后醫(yī)療廢棄物需用專門的醫(yī)療垃圾轉(zhuǎn)運箱及轉(zhuǎn)運車轉(zhuǎn)運，每日對醫(yī)療垃圾桶、轉(zhuǎn)運箱及轉(zhuǎn)運車消毒。高壓洗消間要設(shè)立窗戶，安裝紫外燈、防蟲燈，必要時安裝防鼠等設(shè)施[17]。

4.3 環(huán)境消毒管理

樣本接收及制備室實驗臺面采用含1 000 mg/L有效氯的消毒劑擦拭，地面采用同樣的消毒劑進行消毒。實驗完畢后，打開窗戶及機械通風(fēng)裝置進行通風(fēng)，以降低氣溶膠的殘留，或進行空氣消毒，如紫外線、空氣過濾或空氣消毒劑的方式。

在靠近樣本前處理的區(qū)域設(shè)立高壓洗消間，配備高壓滅菌器或其他清除污染的工具，要有應(yīng)急噴淋裝置。此外，所用的含氯消毒劑要新鮮配制，24 h內(nèi)使用完畢。紫外燈要符合國家標(biāo)準(zhǔn)[11]，定期檢測性能、完整記錄使用時間，不能超時使用。

5 實驗人員的個人防護

5.1 操作人員分級防護

操作人員可根據(jù)工作內(nèi)容的不同進行分級防護[3]。相關(guān)要求見表3。

表3 不同級別生物安全防護要求

5.2 人員培訓(xùn)

實驗室工作人員必須接受SARS-CoV-2相關(guān)微生物學(xué)、感染病學(xué)、流行病學(xué)、感染控制學(xué)等方面的培訓(xùn)，掌握相應(yīng)技術(shù)規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、生物安全防護知識和實際操作技能，經(jīng)考核合格后方可上崗。此外，從業(yè)人員還要接受相關(guān)的心理疏導(dǎo)及培訓(xùn)，使工作人員保持良好的精神狀態(tài)。針對患者隱私保護方面，工作人員也需進行相關(guān)的培訓(xùn)及考核，確保不會泄漏患者隱私。

5.3 不同崗位人員防護要求

樣本接收人員：確診或疑似患者樣本運送到實驗室之前，應(yīng)進行表面消毒及塑料袋封口、置轉(zhuǎn)運箱的生物安全罐內(nèi)保存，接收到的樣本應(yīng)保持原塑料包裝并單獨分開。因此，樣本接收人員受到氣溶膠的影響較小，在樣本接收室操作時可按二級防護要求執(zhí)行[3]。

樣本前處理人員：其可能接觸到因離心、取樣、渦旋、超聲及意外灑落等步驟產(chǎn)生的氣溶膠，風(fēng)險較高，人員必須具備相應(yīng)的工作資質(zhì)、崗位認(rèn)可能力，需接受專業(yè)培訓(xùn)并考核合格。工作時按照生物安全三級防護[3]。如需離開樣本前處理區(qū)域進入其他操作區(qū)進行操作，必須在緩沖區(qū)進行手衛(wèi)生防護后摘掉面屏及護目鏡，二次手衛(wèi)生防護后脫掉防護服和外層手套，第3次手衛(wèi)生防護后脫掉內(nèi)層手套并直接進行手衛(wèi)生防護，再更換新手套后方進入其他操作區(qū)域，如有化學(xué)污染，還須佩戴化學(xué)防噴濺眼鏡。此外，由于樣本前處理可能涉及化學(xué)氣溶膠污染，因此涉及有機溶劑移取、吹干等過程的，必須在通風(fēng)櫥進行，且打開實驗室機械通風(fēng)系統(tǒng)，以降低對操作人員的傷害。工作人員一定要掌握正確的手衛(wèi)生時機及方式，工作期間禁止隨意觸碰皮膚、眼睛、鼻等黏膜相關(guān)部位。疫情期間，建議剪短長發(fā)，禁止佩戴首飾。

溶液配制及試劑保存人員：不涉及生物污染，但可能受到化學(xué)氣溶膠的影響，因此需佩戴防噴濺眼鏡，根據(jù)需要佩戴一次性口罩或防毒口罩、聚酯手套。

上機檢測人員：通常僅涉及提取滅活后的樣本，生物危險性較低，但仍可能涉及化學(xué)氣溶膠，因此需佩戴防噴濺眼鏡，可根據(jù)需要選擇佩戴一次性醫(yī)用口罩或防毒口罩、一次性乳膠手套或聚酯手套等防護用品，在工作站電腦上進行操作前必須脫掉手套并進行正確的手衛(wèi)生防護。

5.4人員消毒

所有人員一定要掌握正確的手衛(wèi)生時機及方式，在穿脫防護裝備時根據(jù)需要隨時用速干消毒劑進行手衛(wèi)生。檢測確診或疑似患者樣本時，實驗結(jié)束后或遇緊急情況時必須正確脫掉相關(guān)防護裝備且手衛(wèi)生后，采用實驗室的洗眼器進行眼部及鼻部清洗，必要時采用應(yīng)急噴淋裝置進行噴淋。佩戴過的防護面屏及護目鏡采用75%乙醇擦拭后置紫外燈下徹底消毒。

6 小結(jié)

作為存在暴露風(fēng)險的人群，TDM相關(guān)工作人員每天會接觸臨床患者的血液或其他樣本，應(yīng)高度重視COVID-19疫情防控和職業(yè)暴露保護。對于進行體液標(biāo)本處理、測定分析的TDM實驗室，血液樣本前處理步驟中涉及高速離心、開蓋、振蕩混勻、移液、超聲等易產(chǎn)生生物氣溶膠的操作時需采取有效措施進行防范。從該類實驗室產(chǎn)生氣溶膠的途徑、操作控制策略、人員防護和消毒等方面進行分析，提出的相應(yīng)措施和建議，可供此次疫情下TDM實驗室工作的安全開展參考。