黔產(chǎn)苗藥見血青藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究

周和 王世俊 楊蘭

【摘 要】 目的：建立黔產(chǎn)苗藥見血青藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：對不同產(chǎn)地黔產(chǎn)見血青藥材進(jìn)行性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜鑒別;參照《中國藥典》2015年版四部通則方法對黔產(chǎn)見血青藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物進(jìn)行測定。結(jié)果：薄層色譜斑點(diǎn)清晰，分離好，專屬性強(qiáng)，無干擾;初步規(guī)定黔產(chǎn)見血青藥材水分不得過15.0%，總灰分不得過11.0%，酸不溶性灰分不得過6.0%，水溶性浸出物含量不得少于10.0%。結(jié)論：該方法操作簡便、結(jié)果可靠，能夠?yàn)榍a(chǎn)苗藥見血青藥材質(zhì)量評價提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 見血青;苗藥;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);薄層色譜

【中圖分類號】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2020）3-0044-03

Abstract：Objective To establish the preliminary quality standard for miao national herb Liparis nervosa（Thunb.Ex A.Murray）Lindl. produced in Guizhou province.Methods Trait identification， microscopic identification and TLC were used for qualitative identification of samples.According to the approaches listed in Chinese Pharmacopoeia published in 2015， some testing items including the moisture content， total ash，acid-insoluble ash and extract were established.Results TLC spots were clear， well-separated without interference and had a strong specificity.The moisture， total ash and acid-insoluble ash of samples were no more than 15.0%， 11.0%， 6.0%，respectively;The water-soluble extractives were no less than 10.0%.Conclusion The quality standard is simple， reliable and can provide some experimental data for the quality evaluation of miao national herb Liparis nervosa（Thunb.Ex A.Murray）Lindl.produced in Guizhou.

Keywords：Liparis nervosa Lindl;Miao National Herb;Quality Standard;TLC

見血青為蘭科植物見血青Liparis nervosa（Thunb.Ex A.Murray）Lindl.的干燥全草[1]，在夏、秋季節(jié)采收，除去雜質(zhì)，曬干。見血青在《全國中草藥匯編》第3版和《中國植物志》第十八卷均有記載[1-2]。文獻(xiàn)報(bào)道該植物中含有含脈羊耳蘭堿、原兒茶酸等成分[3-5]，具有涼血止血、清熱解毒的作用，主要用于胃熱吐血、肺熱咯血、熱毒瘡瘍、蛇咬傷。見血青同時作為貴州省少數(shù)民族藥材品種，民間中醫(yī)、民族地區(qū)使用廣泛，被譽(yù)為苗醫(yī)“止血圣藥”，苗族地區(qū)常用于治療刀傷、跌打損傷。作為貴州省民族藥材，現(xiàn)無質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制其質(zhì)量，且目前中國食品藥品檢定研究院無脈羊耳蘭堿對照品和見血青對照藥材。因此，本研究以貴州省藥檢所相關(guān)專家鑒定為正品的見血青藥材作為見血青對照藥材，對黔產(chǎn)苗藥見血青藥材的性狀、顯微、薄層、水分、總灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物進(jìn)行測定，并對水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物項(xiàng)目確定了檢查限度，初步建立了黔產(chǎn)見血青藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為該藥材質(zhì)量評價提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 DM2500光學(xué)生物顯微鏡（德國徠卡儀器公司）;DFC500圖像分析系統(tǒng)（德國徠卡儀器公司）;AB265-S梅特勒電子天平（梅特勒有限公司）;FW80高速萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.2 藥物與試劑 見血青藥材分別采集于貴州各地（詳見表1），經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥實(shí)驗(yàn)室江維克教授鑒定為蘭科植物見血青Liparis nervosa（Thunb.Ex A.Murray）Lindl.的干燥全草，憑證標(biāo)本存放于遵義市食品藥品檢驗(yàn)所。見血青對照藥材（批號：201710-06，貴州省食品藥品檢驗(yàn)所提供）。石油醚（批號：20170509，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）、乙酸乙酯（批號：20170509，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）、乙醚（批號：20180202，成都金山化學(xué)試劑有限公司）、無水乙醇（批號：20180312，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）均為分析純，硅膠G板（批號：20170818，青島海洋化工廠有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別 依據(jù)《藥用植物學(xué)》[6]對植物根莖葉花果的分類鑒別和《中國藥典》[7]2015版對其它藥材性狀的規(guī)范描述，觀察12個見血青樣品，其性狀特征總結(jié)如下：根狀莖上著生細(xì)長的須根數(shù)條。假鱗莖圓柱形，長2.5～7.0cm，具節(jié)，基部有灰白色膜質(zhì)葉柄殘基。單葉互生，2～5片，黃綠色，質(zhì)薄，略皺縮;展開后呈卵形或卵橢圓形，長5～16cm，寬2.5～6cm，先端尖，基部成鞘狀抱莖，脈3～8條?？偁罨ㄐ蝽斏仙？梢娝薮娴妮艄?蒴果紡錘形，長0.8～1.5cm，寬0.4～0.6cm。氣微，味苦。

2.2 顯微鑒別[8] 通過對12個藥材樣品的粉末進(jìn)行觀察和測量，其顯微鑒別特征總結(jié)如下：本品粉末棕黃色或棕褐色;厚壁細(xì)胞呈不規(guī)則形;單細(xì)胞非腺毛，壁厚或螺紋狀紋理;導(dǎo)管為梯紋導(dǎo)管或網(wǎng)紋導(dǎo)管，直徑5～30μm;草酸鈣針晶較細(xì)，長25～80μm ，多成束存在。如圖1所示。

2.3 薄層鑒別[9] 分別取貴州12個產(chǎn)地見血青藥材粉末約1.0g，加石油醚（60～90℃）10mL，超聲處理30分鐘，濾過，水浴蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴?mL溶解，作為供試品溶液。另取見血青對照藥材1.0g，同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法（2015年版《中國藥典》四部通則0502）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙醚 （3∶[KG-*3/5]2）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。詳見圖2。

2.4 檢查

2.4.1 水分測定水分測定 按2015年版《中國藥典》通則0832第二法測定，12批見血青藥材水分測定結(jié)果為11.03～13.62%，平均值12.51%，暫定水分不得過15.0%。結(jié)果詳見表2。

2.4.2 總灰測定分灰分測定 按2015年版《中國藥典》通則2302測定，12批見血青藥材測定結(jié)果為8.62～9.66%，平均值9.16%，暫定總灰分不得過11.0%。結(jié)果詳見表2。

2.4.3 酸不溶性灰分灰分測定 按2015年版《中國藥典》通則2302測定， 12批樣品測定結(jié)果為4.71～5.54%，平均值5.14%，暫定酸不溶性灰分不得過6.0%。結(jié)果詳見表2。

2.5 水溶性浸出物含量測定浸出物測定 按2015版《中國藥典》通則2201冷浸法測定，測定12批樣品的結(jié)果為12.02～13.56%，平均值12.67%，測定結(jié)果詳見表2。根據(jù)測定結(jié)果，暫定浸出物標(biāo)準(zhǔn)不得少于10.0%。

3 討論

黔產(chǎn)見血青為貴州常用民族藥材，本研究對不同產(chǎn)地的黔產(chǎn)見血青藥材性狀特征、顯微特征進(jìn)行了歸納總結(jié)。摸索了TLC條件，分別以石油醚（60～90℃）-乙醚（5∶[KG-*3/5]1）、石油醚（60～90℃）-乙醚-乙酸乙酯 （5∶[KG-*3/5]2∶[KG-*3/5]0.1）、石油醚（60～90℃）-乙醚 （3∶[KG-*3/5]2）為展開劑，展開，作為展開劑，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。其中以石油醚（60～90℃）-乙醚 （3∶[KG-*3/5]2）為展開劑的薄層色譜圖斑點(diǎn)明顯、熒光斑點(diǎn)清晰、專屬性強(qiáng)，并按照國家藥典委員會《中藥分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則實(shí)施細(xì)則》的相關(guān)要求進(jìn)行方法學(xué)耐用性考察，重現(xiàn)性好。分別用無水乙醇、80%乙醇、70%乙醇、水作溶劑，采用冷浸法和熱浸法依次測定黔產(chǎn)見血青浸出物含量。根據(jù)測定結(jié)果，以水為溶劑，冷浸法效果最佳，初步確定浸出物限量。按2015年版《中國藥典》通則方法對水分、總灰分和酸不溶性灰分進(jìn)行測定，初步確定各限量標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，本研究能夠?yàn)榍a(chǎn)苗藥見血青藥材質(zhì)量評價提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。筆者將繼續(xù)對該藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)深入研究，以規(guī)范苗藥見血青的生產(chǎn)，促進(jìn)苗藥現(xiàn)代化發(fā)展。

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