老年動脈粥樣硬化性心肌梗死患者血清胱抑素C水平與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷相關(guān)性研究*

劉玉珊

青海省心腦血管病?？漆t(yī)院檢驗科(西寧 810000)

心肌梗死(Myocardium infarction，MI)是冠脈長期缺血缺氧所致的心肌壞死性病變，冠脈粥樣硬化(Coronary atherosclerosis，CAS)是MI發(fā)生的病理基礎(chǔ)[1-2]?！凹毙怨诿}綜合征”這一概念的提出，使人們明確MI與AS斑塊形成及破裂所致凝血酶形成、血小板激活及血栓形成有關(guān)。胱抑素C(Cystatin C，Cys C)是機體內(nèi)有核細(xì)胞分泌的非糖化的蛋白分子，僅可通過腎小球濾過被清除，因此是評估機體腎功能的理想標(biāo)志物。近年來，越來越多研究證實，Cys C通過參與動脈血管內(nèi)平滑肌細(xì)胞增殖和纖維組織增生等慢性炎癥反應(yīng)，參與AS形成及進展[3-4]。血管內(nèi)皮細(xì)胞是襯于淋巴管及血管內(nèi)表的單層上皮，具有吞噬衰老和壞死細(xì)胞組織、細(xì)菌和其它異物，參與機體免疫防御等功能?，F(xiàn)已證實，AS發(fā)生是各類損傷作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管內(nèi)皮功能失調(diào)而表達釋放各類細(xì)胞因子共同參與的慢性炎癥過程[5]。血管內(nèi)皮功能檢測在預(yù)防AS形成，判斷斑塊穩(wěn)定性和臨床治療效果等方面具有重要意義。本研究擬通過檢測一氧化氮(Nitric oxide，NO)、內(nèi)皮素-1(Endothelin-1，ET-1)、纖溶酶原激活物抑制劑-1(Plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)、血栓調(diào)節(jié)蛋白(Thrombomodulin，TM)評估老年動脈硬化性MI患者血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷情況，探討高Cys C與老年動脈硬化性MI患者血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的相關(guān)性。

資料與方法

1 一般資料 以2018年1月至2019年7月本院收入的42例MI患者(MI組)、35例心絞痛患者(心絞痛組)和同期進行健康體檢的35例健康志愿者(對照組)為研究對象。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：心絞痛及MI患者均經(jīng)冠脈造影(CAG)確診；排除近期服用過維生素B12、葉酸、激素等可能影響測定指標(biāo)的藥物；簽署知情協(xié)議書。對照組男22例，女13例；年齡60～86歲，平均(71.35±4.57)歲；合并糖尿病6例，合并高血壓11例，吸煙16例。心絞痛組男23例，女12例；年齡61～87歲，平均(71.51±4.55)歲；合并糖尿病8例，合并高血壓9例，吸煙18例。MI組男27例，女15例；年齡60～87歲，平均(71.84±4.50)歲；合并糖尿病8例，合并高血壓15例，吸煙20例。三組性別、年齡分布、合并癥占比及吸煙占比間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，組間具有可比性。

2 研究方法 分別收取三組受試者均于入組后次日空腹?fàn)顟B(tài)下肘靜脈血樣5 ml，加入離心管中，3500 r/min條件下離心10 min，分離血清保存，用于研究指標(biāo)的測定。Cys C測定選擇乳膠增強免疫投射比濁法，儀器選擇全自動蛋白分析儀(美國貝克曼庫爾特，型號IMMAGE 800)，試劑由武漢明德生物科技股份有限公司提供；血清NO測定選擇硝酸還原酶法；ET-1測定均選擇酶聯(lián)免疫吸附法，PAI-1測定選擇酶聯(lián)雙抗體夾心法；TM測定選擇放射免疫法。試劑盒均購自于上海紀(jì)寧實業(yè)有限。

結(jié) 果

1 三組受試者基礎(chǔ)生化資料比較 見表1。單因素方差分析顯示，三組血清肌酸激酶(CK)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，但兩組尿素氮(BUN)、空腹血糖(FBG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。LSD檢驗顯示，MI組血清CK水平明顯高于心絞痛組和對照組(P<0.01)，但心絞痛組和對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；MI組和心絞痛組血清CHOL、TG、LDL-C水平均顯著高于對照組(P<0.01)，但MI組和心絞痛組血清CHOL、TG、LDL-C水間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表1三組受試者基礎(chǔ)生化資料比較

注：與對照組比，*P<0.01；與心絞痛組比，#P<0.01

2 三組受試者Cys C和血管內(nèi)皮細(xì)胞因子表達水平比較 見表2。單因素方差分析顯示，三組血清Cys C、NO、ET-1、API-1、TM水平間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。LSD檢驗顯示，MI組和心絞痛組血清Cys C、ET-1、API-1、TM水平均顯著高于對照組(P<0.01)，血清NO水平明顯低于對照組(P<0.05)；MI組血清Cys C、ET-1、API-1、TM水平均顯著高于心絞痛組，血清NO水平顯著低于心絞痛組(P<0.01)。

3 MI患者血清Cys C與CK、CHOL、TG、LDL-C及血管內(nèi)皮功能因子相關(guān)性分析 見表3。Pearson相關(guān)系數(shù)分析顯示，MI患者血清Cys C水平與CK、CHOL、TG、LDL-C、ET-1、PAI-1和TM均呈顯著正相關(guān)，與NO水平呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。

表2三組受試者Cys C和血管內(nèi)皮細(xì)胞因子表達水平比較

注：與對照組比，*P<0.05，△P<0.01；與心絞痛組比，#P<0.01

表3MI患者血清Cys C與CK、CHOL、TG、LDL-C及血管內(nèi)皮功能因子相關(guān)性

討 論

冠心病已成為威脅全球人生命健康的主要心血管疾病，MI是冠心病的最嚴(yán)重發(fā)病類型，表現(xiàn)在起病急，病情變化兇險，病死率高等。AS作為MI主要發(fā)病基礎(chǔ)，其形成是一個受多種因素影響的復(fù)雜的生理病理過程，包括年齡、吸煙、糖尿病、高血壓、高血脂、家族病史、性格等。但近年來，有報道稱，約20%左右的AS患者并未存在上述危險因素[6-7]。Cys C是臨床應(yīng)用廣泛的反應(yīng)患者腎功能情況的良好生化指標(biāo)。然而，近年來，越來越多研究指出，Cys C可能參與AS形成，其血漿水平升高會增加機體心血管疾病患病風(fēng)險[8]，故可作為心血管疾病發(fā)生發(fā)展的獨立預(yù)測因子[9]。

血管內(nèi)皮是機體內(nèi)最大的內(nèi)分泌、旁分泌、自分泌組織，通過分泌各種活性分子，調(diào)節(jié)血管舒縮功能、抑制血栓形成及白細(xì)胞的粘附作用。有研究顯示，血管內(nèi)皮功能異?；驌p傷是AS及血栓形成的始動環(huán)節(jié)，且與其發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，臨床可將血管內(nèi)皮細(xì)胞功能及相關(guān)活性因子測定作為心腦血管疾病判斷及臨床診治效果評估的直接指標(biāo)[10]。NO主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)NO合酶作用于L精氨酸而成的血管內(nèi)皮依賴性舒張因子，其表達水平受凝血酶、5羥色胺、P物質(zhì)和剪切應(yīng)力等影響。NO不僅是維持機體血管正常舒張功能的重要分子，且是介導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞中多種抗AS作用的介質(zhì)，可抑制血小板和單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮組織聚集粘附[11]。血管內(nèi)皮細(xì)胞受損則NO合成釋放量下降時，則有助于單核細(xì)胞向內(nèi)皮遷移粘附，參與AS早期發(fā)生[12]。ET是維持心血管系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)和基礎(chǔ)血管張力的活性多肽類物質(zhì)，具有控制血管收縮、調(diào)節(jié)血液流量的作用，其代謝異常可引發(fā)心肌缺血、機體代謝紊亂等。ET-1是功能最強的縮血管物質(zhì)，正性肌力作用強。正常生理狀態(tài)下，ET-1表達水平較低，分別通過內(nèi)皮素受體A和受體B發(fā)揮縮血管和輸血管效應(yīng)，依靠兩者動態(tài)平衡維持血管張力；此外，其對血管平滑肌細(xì)胞增殖具有明顯促進作用，參與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的發(fā)生發(fā)展。王錫惠等[13]測定分析發(fā)現(xiàn)，在慢性心衰合并發(fā)顫患者體內(nèi)，Cys C表達與ET-1呈顯著正相關(guān)，其上調(diào)會增加心衰患者并發(fā)房顫的風(fēng)險系數(shù)；趙新華等[14]分析顯示，穩(wěn)定型心絞痛、不穩(wěn)定型心絞痛和MI患者體內(nèi)ET-1變化趨勢與Cys C水平相一致，均隨冠心病病變程度加重而升高。PAI-1是血管內(nèi)皮細(xì)胞合成釋放的單鏈糖蛋白，是血液中重要的纖溶酶原活劑抑制劑，具有較強穩(wěn)定性。近年來，許多研究指出，PAI-1異常表達與AS形成相關(guān)[15]。TM是內(nèi)皮細(xì)胞在基礎(chǔ)狀態(tài)下合成的跨膜糖蛋白，與細(xì)胞表面受體結(jié)合，并在蛋白酶S協(xié)同下，發(fā)揮抗凝作用；同時其與受體結(jié)合還具有抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用。血管內(nèi)皮功能受損，TM釋放進入血液，引起血清TM異常增加，故成為目前臨床反應(yīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能損傷的內(nèi)源性活性分子。馬進等[16]研究中發(fā)現(xiàn)，在不同頸動脈狹窄程度、斑塊大小及病灶大小患者中，其血管內(nèi)皮損傷因子NO、TM表達變化趨勢與Cys C水平相似。本研究通過對比分析顯示，MI組血清ET-1、PAI-1和TM明顯高于心絞痛患者和對照組受試者，NO水平明顯高于心絞痛組和對照組。表明MI患者均存在較明顯的血管內(nèi)皮細(xì)胞，該結(jié)果與以往報道相吻合[17]。Gao等[18]在系統(tǒng)性紅斑狼瘡急性發(fā)作患者的研究中發(fā)現(xiàn)，活動期患者血清Cys水平明顯升高，且其升高程度與肱動脈內(nèi)徑呈顯著負(fù)相關(guān)，與血管內(nèi)皮生長因子水平呈正相關(guān)；Li等[19]研究顯示，阻斷血管內(nèi)皮生長抑制因子A表達，會促進Cys C表達，顯著抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移。本研究進一步分析顯示，MI患者血清Cys C與ET-1、PAI-1和TM均呈顯著正相關(guān)，與NO水平呈顯著負(fù)相關(guān)。表明，老年動脈粥樣硬化性MI患者長期高水平Cys C會損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞功能失衡，細(xì)胞因子ET-1、PAI-1和TM合成分泌量增加，NO合成釋放減少。

綜上所述，老年動脈粥樣硬化性MI患者血清Cys C水平與血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度顯著相關(guān)。高水平Cys可能通過介導(dǎo)機體內(nèi)皮細(xì)胞損傷，參與MI的發(fā)生發(fā)展。臨床可通過測定老年動脈粥樣硬化患者血清Cys C水平，反應(yīng)機體血液內(nèi)皮細(xì)胞功能狀態(tài)，從而為MI早期預(yù)防及治療提供參考依據(jù)。