培養(yǎng)皿暴露時間對醫(yī)院空氣中細(xì)菌計(jì)數(shù)的影響

摘要：醫(yī)院是人流量大，且空氣細(xì)菌數(shù)量多，種類復(fù)雜的公共場合。其空氣細(xì)菌含量的檢測對預(yù)防疾病和細(xì)菌感染具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)用自然沉降法采集醫(yī)院空氣細(xì)菌，通過對培養(yǎng)皿暴露時間長短的不同進(jìn)行細(xì)菌計(jì)數(shù)。結(jié)果表明，空氣中的細(xì)菌并沒有隨培養(yǎng)皿暴露的時間越長而增多，這為自然沉降法測定細(xì)菌數(shù)和醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：自然沉降法;空氣細(xì)菌;培養(yǎng)皿暴露時間

醫(yī)院感染問題是世界范圍內(nèi)矚目的難題，如果醫(yī)院性感染大暴發(fā)，不僅會導(dǎo)致大量醫(yī)療資源的浪費(fèi)，以及加重患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，而且嚴(yán)重的甚至?xí)鹕鐣只牛虼?，要加?qiáng)對醫(yī)源性感染的認(rèn)識和理解，特別是提高醫(yī)護(hù)工作人員的思想意識[1]。

目前針對醫(yī)院感染的控制，關(guān)鍵是在于控制感染源、自身預(yù)防和切斷傳播途徑?？諝鈧鞑ネ緩桨w沫、飛沫核和塵埃傳播方式，是細(xì)菌傳播的主要途徑之一。其傳播范圍廣，傳播速度快，途徑易實(shí)現(xiàn)且發(fā)病率高，對患者和兒童、老人等免疫力低下的人群感染性極高。因此檢測空氣中細(xì)菌含量是公共區(qū)域空氣質(zhì)量和衛(wèi)生的參數(shù)之一。此外，對于醫(yī)院病區(qū)的清潔消毒的質(zhì)量，特別是微生物檢測的結(jié)果缺少深入調(diào)研，基礎(chǔ)數(shù)據(jù)匱乏。因此，本實(shí)驗(yàn)通過對醫(yī)院大廳的空氣細(xì)菌進(jìn)行采樣、檢測和初步分析，為醫(yī)院感染預(yù)防提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，并為醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考。

1 實(shí)驗(yàn)條件與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

牛肉膏蛋白胨營養(yǎng)瓊脂、蒸餾水。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備

培養(yǎng)皿、錐形瓶、燒杯、量筒、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、電子秤、酒精燈、牛皮紙、濾紙、紗布。

1.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及過程

1.3.1 消毒滅菌

對實(shí)驗(yàn)需要使用的所有器具用蒸餾水洗凈并進(jìn)行滅菌，采用高壓蒸汽滅菌法，103.4KPa，121.3℃，30min。

1.3.2 配制培養(yǎng)基

準(zhǔn)備培養(yǎng)皿，取40個大小相同，規(guī)格為直徑9cm的培養(yǎng)皿。利用營養(yǎng)瓊脂制作培養(yǎng)基，培養(yǎng)基應(yīng)顏色不深、無絮狀物、無沉淀、無分層以及無氣泡為佳[2]，然后進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，30分鐘，分裝后進(jìn)行無菌檢查，24-48小時后取出觀察，若無細(xì)菌生長則為合格。

1.3.3 放置取樣

（1）采菌地點(diǎn)：某醫(yī)院的大廳（室內(nèi)面積>30m2）。

（2）采樣方法：采取自然沉降法，由于室內(nèi)面積>30m2，因此可以選取房間五點(diǎn)采取法，設(shè)房間四角及中央5點(diǎn)，4角采樣點(diǎn)距墻1m處，都距離地面0.5m，采樣時間分別為5min，10min，15min，每次采取分為五組。采樣結(jié)束后扣上皿蓋，用記號筆做好標(biāo)記。

1.3.4 培養(yǎng)

將采集好的培養(yǎng)皿倒置并用紗布包裹，迅速送至培養(yǎng)箱進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)時間為2448小時。在整個過程中都要做好樣品質(zhì)量及采樣過程質(zhì)量的控制，提高結(jié)果準(zhǔn)確性及可行性[3]。

1.3.5 數(shù)據(jù)處理

對每個培養(yǎng)基上的細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)，并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。然后用SPSS19對數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)采樣結(jié)果可將實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行不同時間段以及采菌布點(diǎn)進(jìn)行分析。根據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，通過t檢驗(yàn)可得結(jié)果：平皿暴露5min和10min的數(shù)據(jù)處理后，P=0.11，P>0.05，表明平皿暴露5分鐘和10分鐘對細(xì)菌數(shù)量變化影響不大;平皿暴露5min和15min的數(shù)據(jù)t檢驗(yàn)得出結(jié)果P=0.06，P>0.05，表明平皿暴露5分鐘和15分鐘對細(xì)菌數(shù)量變化影響不大。由此可見，自然沉降法中，平皿暴露時間并不是越長越好，5分鐘、10分鐘和15分鐘測得的數(shù)據(jù)并無顯著差異。

各采樣點(diǎn)不同時間段細(xì)菌菌落數(shù)的比較表

5min10min15min中112034東南615758東北184745西北102147西南495858

3 結(jié)果分析與討論

通過數(shù)據(jù)對五個地點(diǎn)進(jìn)行培養(yǎng)皿暴露時間的比較，得出同一方位的細(xì)菌總數(shù)含量并不隨時間的增長而增加，因此，人們不用擔(dān)心在醫(yī)院的時間越長，越易發(fā)生醫(yī)源性感染。通過對不同方位進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)東南和西南的細(xì)菌總數(shù)明顯多于西北和東北的細(xì)菌總數(shù)，由于做實(shí)驗(yàn)時，西南角為繳費(fèi)處，人流量大，東南角，靠近樓梯，空間較小，空間流通速度慢，加之人流量大，在綜合因素影響下，數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，此兩處空氣細(xì)菌的計(jì)數(shù)總數(shù)較多;東北角靠近走廊，空氣流通速度快，人流量較少，西北角，人數(shù)少，偶爾有人，在綜合因素影響下，數(shù)據(jù)結(jié)果顯示，此兩處空氣細(xì)菌的計(jì)數(shù)總數(shù)較少。由此可見，空氣細(xì)菌總數(shù)還受人流量、空氣濕度，空氣流通速度以及空間大小等不確定因素的影響。

通過本次研究，檢測醫(yī)院空氣細(xì)菌的總數(shù)反映了培養(yǎng)皿的暴露時間與細(xì)菌總數(shù)無多大的關(guān)系，但很好的反映了細(xì)菌計(jì)數(shù)還受其他因素影響因素。同時，為對減少醫(yī)源性感染和為醫(yī)院的清潔消毒工作提供了參考，以便醫(yī)院采取相應(yīng)的措施，來改善空氣質(zhì)量，避免醫(yī)源性感染。

參考文獻(xiàn)：

[1]魏世剛，汪亞麗，張姚.檢驗(yàn)科醫(yī)源性感染的危險(xiǎn)因素分析與預(yù)防控制[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（2）：472474.

[2]解偉嘉.微生物檢驗(yàn)中不同領(lǐng)域培養(yǎng)基質(zhì)量控制及管理[J].中國醫(yī)藥指南，2019，17（14）：297298.

[3]謝紹霞.微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制方法分析[J].智慧健康，2018，15（8）：1516.

課題來源：山東協(xié)和學(xué)院大學(xué)生實(shí)驗(yàn)室開放項(xiàng)目“醫(yī)院空氣細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)的影響因素研究”，課題編號：2019SYKF14

作者簡介：羅金鳳（2000），女，四川南充人，山東協(xié)和學(xué)院2018級醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)專業(yè)本科生。

*通訊作者：遲雙會（1982），女，黑龍江樺川人，碩士研究生，副教授，山東協(xié)和學(xué)院教師，研究方向?yàn)榛A(chǔ)醫(yī)學(xué)、教育學(xué)。