探討HE4、CEA、ProGRP、CYFRA21-1以及NSE聯(lián)合檢測在肺癌診斷中的應(yīng)用

周小斌，王 艷

（1.泰州市人民醫(yī)院 檢驗科；2.泰州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇 泰州 225300）

肺癌（lung cancer，LC）是全球癌癥及與癌癥相關(guān)死亡的主要原因。非小細(xì)胞肺癌（Nonsmall cell lung cancer，NSCLC）占多數(shù)，為85%，其余主要為小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）[1]。盡管目前肺癌相關(guān)診療技術(shù)在不斷發(fā)展，但患者五年生存率總體約為18%，其主要取決于肺癌診療時間點，早期干預(yù)治療生存率可達(dá)55%，而晚期則只有4%[2]。因此，肺癌的早期診斷及適當(dāng)治療對于改善預(yù)后至關(guān)重要。肺癌診療的前提在于病理學(xué)診斷與分期，由于目前主要通過病理活檢或者脫落細(xì)胞檢測對肺癌進(jìn)行診斷，往往患者確診時已處于疾病晚期[3]。此外，當(dāng)活檢樣本不足或制片質(zhì)量不高時，則可影響診斷和組織學(xué)分型。對于部分身體狀態(tài)較差的患者，有時甚至無法進(jìn)行活檢，由此可見急需一種非侵入性的診斷方法。目前尚無比較理想的可用于肺癌診斷的單個血清腫瘤標(biāo)志物，但是組合檢測可能有助于提高肺癌診斷的敏感性和特異性。在本次研究中，我們分析了五種腫瘤標(biāo)志物的血清水平（HE4、CEA、ProGRP、CYFRA21-1以及NSE），用以評估聯(lián)合檢測對肺癌診斷的應(yīng)用價值。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 研究對象 肺癌患者104例，其中男性68例，女性36例，年齡37～72歲，平均年齡48歲，為2019年1月至2019年12月期間泰州市人民醫(yī)院腫瘤科門診及住院患者，其中小細(xì)胞肺癌21例，非小細(xì)胞癌83例；肺炎患者62例；健康體檢者75例。三組研究對象性別與年齡均匹配。

1.1.2 試劑和儀器 ProGRP檢測試劑盒，HE4檢測試劑盒，CEA檢測試劑盒，CYFRA21-1檢測試劑盒，雅培ARCHITECTi2000SR全自動免疫分析儀（美國雅培公司）；NSE檢測試劑盒，新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI 4000 Plus全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（深圳新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 使用含分離膠的真空負(fù)壓管無菌采集各組研究對象靜脈血并及時離心以分離出血清。

1.2.2 結(jié)果檢測 采用化學(xué)發(fā)光法檢測三組研究對象血清中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1水平。五種腫瘤標(biāo)記物生物參考區(qū)間分別為：NSE＜6ng/mL；ProGRP＜63pg/mL；HE4＜70pmol/L；CEA＜5ng/mL；CYFRA21-1＜3.07ng/mL。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS18.0軟件對三組研究對象檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)值變量以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用q檢驗，P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 通過分析三組實驗對象血清中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1水平顯示，肺癌組中五種腫瘤標(biāo)志物表達(dá)水平均高于肺炎組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。肺炎組NSE水平略高于健康對照組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其它四種腫瘤標(biāo)志物血清水平與健康對照組無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）（見表1）。

2.2 進(jìn)一步對兩種肺癌病理分型中五種腫瘤標(biāo)志物血清水平進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，SCLC組ProGRP、NSE血清水平高于NSCLC組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。相比于SCLC，CYFRA 21-1、HE4、CEA血清水平在NSCLC組較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（見表2）。

2.3 通過分析發(fā)現(xiàn)，單個血清腫瘤標(biāo)志物對于肺癌診斷的敏感性和特異性分別為：NSE為50%和68%；ProGRP為20%和91%；HE4為68%和61%；CEA為73%和39%；CYFRA21-1為75%和80%。聯(lián)合檢測五種腫瘤標(biāo)志物敏感性和特異性為82%和74%。

3 討論

NSE是一種糖酵解酶，在各類神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，尤其是SCLC中表達(dá)增高。目前NSE已作為SCLC診斷、治療、監(jiān)測和判斷預(yù)后的首選腫瘤標(biāo)志物[4]。然而，NSE的敏感性相對較低[5]。有研究顯示，CYFRA 21-1是區(qū)分肺部良性病變以及NSCLC分型的最敏感指標(biāo)[6]。CEA是一種復(fù)雜的可溶性糖蛋白，其不僅在胚胎性腫瘤組織中表達(dá)，在人的胃腸、肺等也有表達(dá)。血清CEA水平對肺癌尤其是肺腺癌具有重要的診斷價值[7]。人附睪蛋白4（HE4）是一種新型腫瘤標(biāo)志物，在卵巢癌組織中高表達(dá)，而在正常組織中表達(dá)極低，因此在臨床上主要用于卵巢癌的早期診斷以及監(jiān)測卵巢腫瘤的治療效果和預(yù)后。近年來，有文獻(xiàn)報道HE4也可用于肺癌的早期診斷[8]。除惡性腫瘤外，血清HE4水平還受多種因素影響，如女性絕經(jīng)前參考區(qū)間為＜70pmol/L，絕經(jīng)后為＜140pmol/L。ProGRP是一種新型腫瘤標(biāo)志物，主要存在于成人胃腸道和呼吸道中；GRP為神經(jīng)肽激素，最初從豬胃組織中分離出來；ProGRP是GRP的血清前體肽，在血清中穩(wěn)定，可以用作SCLC的診斷[9]。

表1 三組實驗對象NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

表1 三組實驗對象NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

注：與肺癌組比較，a P＜0.05；與肺炎組比較b P＜0.05

組別肺癌組肺炎組健康對照組n 104 62 75 NSE（ng/mL）25.62±6.14 8.41±2.82a 3.38±0.29a/b ProGRP（pg/mL）85.64±9.52 40.88±2.74a 34.26±2.81a HE4（pmol/L）81.26±3.04 31.42±1.41a 36.14±2.63a CEA（ng/mL）25.87±3.62 4.42±2.16a 3.84±1.83a CYFRA21-1（ng/mL）4.74±1.36 1.26±0.84a 1.63±1.02a

表2 兩種肺癌病理分型中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

表2 兩種肺癌病理分型中NSE、ProGRP、HE4、CEA、CYFRA21-1血清水平比較（±s）

注：與SCLC組比較，a P＜0.05；與NSCLC組比較，b P＜0.05

組別SCLC組NSCLC組n 21 83 NSE（ng/mL）32.21±6.76 15.87±3.12a ProGRP（pg/mL）96.35±7.85 73.42±3.63a HE4（pmol/L）73.17±8.44b 86.73±5.14 CEA（ng/mL）21.26±3.89b 33.75±4.15 CYFRA21-1（ng/mL）3.73±1.28b 6.12±2.56

根據(jù)組織學(xué)分型可將肺癌分為兩類：小細(xì)胞肺癌（SCLC）和非小細(xì)胞肺癌（NSCLC），兩者治療方法和預(yù)后均不相同。相比于后者，SCLC對化學(xué)療法和放射療法高度敏感，但SCLC通常于患者晚期才發(fā)現(xiàn)，在診斷時已發(fā)生區(qū)域淋巴結(jié)或器官轉(zhuǎn)移[10]。血清腫瘤標(biāo)志物已在肺癌的診斷、治療和預(yù)后監(jiān)測中得到廣泛應(yīng)用。然而，由于它們的敏感性較低或組織學(xué)分型特異性不高，導(dǎo)致臨床應(yīng)用價值仍存在爭議。本研究中，相比于健康對照組和肺炎組，肺癌組血清HE4、CEA、ProGRP、NSE和CY?FRA21-1五種血清標(biāo)志物血清水平均顯著增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。此外，肺炎組NSE水平略高于健康對照組，提示肺部炎性病變可能會增加NSE血清水平。通過進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，SCLC組NSE和ProGRP血清水平較高；而CYFRA 21-1、CEA、HE4血清水平在NSCLC組中較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。由此可見，HE4作為一種新型腫瘤標(biāo)志物，不但在卵巢癌患者血清中表達(dá)升高，而且在肺癌患者血清中也有高表達(dá)。提示HE4可能是肺癌診斷和預(yù)后的潛在標(biāo)志物，具有重要的臨床應(yīng)用價值。此外，NSE檢測結(jié)果易受標(biāo)本質(zhì)量影響，標(biāo)本溶血或放置時間過久可導(dǎo)致結(jié)果異常，因此ProGRP在SCLC診斷中的應(yīng)用價值優(yōu)于NSE。

本研究中，單項腫瘤標(biāo)志物肺癌診斷敏感性和特異性分別是：CYFRA21-1為75%和80%；HE4為68%和61%；ProGRP為20%和91%；NSE為50%和68%；CEA為73%和39%；聯(lián)合檢測敏感性為82%。因此組合檢測可以提高肺癌臨床診斷效能，有利于肺癌患者的治療和預(yù)后。