不同類型標(biāo)本及儀器對(duì)血糖檢測(cè)結(jié)果的影響

侯進(jìn)軍，陳尚剛

1.江蘇省南京市棲霞區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科,江蘇南京 210028；2.羅氏診斷產(chǎn)品(上海)有限公司,上海 200131

隨著人們生活方式和飲食習(xí)慣的改變，糖尿病(DM)的發(fā)病率日趨增高，最新數(shù)據(jù)顯示,2019年全球DM患者約為 4.63億，預(yù)計(jì)到2045年這一數(shù)據(jù)將達(dá)到7億[1]。針對(duì)如此龐大的患者群體，選擇結(jié)果準(zhǔn)確、操作便捷的快速血糖檢測(cè)方法對(duì)DM的診斷、治療及病情監(jiān)測(cè)至關(guān)重要。生化分析儀檢測(cè)方法學(xué)較成熟、質(zhì)控體系完善、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確,但由于其檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng),標(biāo)本用量較大,不適用于糖尿病患者進(jìn)行長(zhǎng)期的血糖動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)及急、重癥患者的急診檢測(cè)。目前各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)血糖儀檢測(cè)的標(biāo)本多以指尖末梢血為主，而對(duì)于血糖儀檢測(cè)末梢血、靜脈全血、靜脈血漿及靜脈血清等不同類型標(biāo)本結(jié)果的差異，以及與生化儀檢測(cè)結(jié)果差異的相關(guān)研究較少[2]。本研究對(duì)不同類型血液標(biāo)本及儀器檢測(cè)的血糖水平進(jìn)行比較，以期為臨床血糖檢測(cè)提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年2-5月于南京市棲霞區(qū)婦幼保健院就診患者及健康體檢者104例為研究對(duì)象，其中男39例，女65例；年齡25～87歲，平均(54.9±16.2)歲。 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)血糖水平在0～33.3 mmol/L；(2)研究對(duì)象及其家屬對(duì)本次研究均知情同意，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有嚴(yán)重精神疾病者；(2)存在語(yǔ)言溝通障礙者；(3)急危重癥者；(4)所服用藥物對(duì)血糖儀的檢測(cè)結(jié)果有干擾者[3]。本研究經(jīng)該院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2儀器與試劑 羅氏公司生產(chǎn)的便攜式血糖儀(以下稱血糖儀)及相關(guān)配套試劑，血糖儀試紙批號(hào)為474973，血糖儀所選用的質(zhì)控品批號(hào)為60101083；日本日立公司生產(chǎn)的日立7180全自動(dòng)生化分析儀(以下稱生化儀)，血糖檢測(cè)試劑盒由上?？迫A生物工程股份有限公司提供，血糖檢測(cè)采用葡萄糖氧化酶法。

1.3方法 使用末梢采血針采集患者左手無(wú)名指空腹或餐后末梢血，采血后立即用血糖儀進(jìn)行檢測(cè)；同時(shí)用肝素鋰抗凝管取靜脈血2 mL,立即用血糖儀進(jìn)行靜脈抗凝全血的血糖檢測(cè)；同時(shí)采用分離膠管取靜脈血2 mL，放入離心機(jī)，以3 000 r/min離心5 min，分離出血漿和血清，立即用血糖儀及生化儀分別對(duì)血漿、血清進(jìn)行血糖檢測(cè)。上述末梢血及靜脈血均為同一時(shí)刻采集，所有檢測(cè)均在1 h內(nèi)完成，所有患者均進(jìn)行上述檢測(cè)。按照血糖儀說(shuō)明書要求，建議使用含有EDTA、肝素類抗凝劑的毛細(xì)血管血、靜脈血或動(dòng)脈血標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，不推薦使用含碘乙酸或氟的抗凝劑，故本研究抗凝劑選用肝素鋰[4-5]。

1.4觀察指標(biāo)

1.4.1精密度驗(yàn)證 準(zhǔn)備3臺(tái)性能良好的同型號(hào)血糖儀，分別連續(xù)檢測(cè)特定批次的高、低兩水平質(zhì)控品各20次，計(jì)算每臺(tái)血糖儀檢測(cè)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差(s)和批內(nèi)精密度(CV)；高低兩水平質(zhì)控品分別在3臺(tái)血糖儀上每天檢測(cè)1次，連續(xù)20 d，計(jì)算每臺(tái)血糖儀檢測(cè)結(jié)果的s和批間CV；s和CV應(yīng)滿足ISO15197-2013標(biāo)準(zhǔn)：s應(yīng)不超過(guò)0.42 mmol/L，CV應(yīng)不超過(guò)7.5%[6]。

1.4.2線性范圍驗(yàn)證 按《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖儀管理和臨床操作規(guī)范》相關(guān)要求，血糖儀檢測(cè)的線性范圍在1.1～27.7 mmol/L。將高低兩水平質(zhì)控品按照600 μL∶0、 500 μL∶100 μL、400 μL∶200 μL、300 μL∶300 μL、200 μL∶400 μL、100 μL∶500 μL、 0∶600 μL配成7個(gè)不同梯度水平的標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，將3次檢測(cè)的結(jié)果均值作為實(shí)測(cè)值。以X軸為血糖儀檢測(cè)的標(biāo)本實(shí)測(cè)值，Y軸為標(biāo)本理論值，計(jì)算Y=aX+b，驗(yàn)證其線性范圍。剔除離群值數(shù)據(jù)，判斷依據(jù)為該項(xiàng)目的質(zhì)量目標(biāo)(日內(nèi)精密度)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果與靶值進(jìn)行回歸分析，要求相關(guān)系數(shù)R2>0.95，斜率為1±0.03，截距接近0。

1.4.3差異性比較及相關(guān)性分析 比較血糖儀檢測(cè)的末梢血(末梢血POCT組)、靜脈全血(全血POCT組)、靜脈血漿(血漿POCT組)、靜脈血清(血清POCT組)和生化儀檢測(cè)的靜脈血漿(血漿生化儀組)、靜脈血清(血清生化儀組)的血糖水平。分析各組血糖水平的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.1精密度驗(yàn)證 3臺(tái)血糖儀的s均不超過(guò)0.42 mmol/L，批內(nèi)CV和批間CV均小于7.5%，符合判定標(biāo)準(zhǔn)。見表1、2。

表1 3臺(tái)血糖儀的批內(nèi)精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2線性范圍驗(yàn)證 血糖儀檢測(cè)的靜脈全血血糖水平在1.1～24.4 mmol/L呈線性，R2>0.95；靜脈血清血糖水平在0.6～25.3 mmol/L呈線性，R2>0.95，均符合線性要求。見圖1、2。

表2 3臺(tái)血糖儀的批間精密度驗(yàn)證結(jié)果

圖1 靜脈全血血糖實(shí)測(cè)值與理論值的線性回歸圖

圖2 靜脈血清血糖實(shí)測(cè)值與理論值的線性回歸圖

2.3不同血糖水平范圍內(nèi)各組檢測(cè)結(jié)果比較 血糖水平<6 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平低于其余各組(P<0.05)；血糖水平為6～10 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平低于血漿POCT組、血清POCT組、血漿生化儀組及血清生化儀組(P<0.05)，末梢血POCT組血糖水平低于血清POCT組、血漿生化儀組及血清生化儀組(P<0.05)；血糖水平>10 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平低于血清POCT組(P<0.05)。見表3。

表3 不同血糖水平范圍內(nèi)各組檢測(cè)結(jié)果比較

注：與全血POCT組比較，aP<0.05；與血清POCT組比較，bP<0.05；與血清生化儀組比較，cP<0.05；與血漿生化儀組比較，dP<0.05。

2.4各組血糖水平間的相關(guān)性分析 各組所檢測(cè)的血糖水平兩兩之間均具有顯著相關(guān)性(r>0.99，P<0.05)。見表4。

表4 各組血糖水平間的相關(guān)性分析結(jié)果

3 討 論

血糖監(jiān)測(cè)是糖尿病管理體系的重要組成部分之一，但是由于不同品牌血糖儀檢測(cè)原理、性能及操作人員的熟練度、采集部位不同等原因，導(dǎo)致患者血糖檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性受到影響。此外，部分血糖儀由于線性范圍較窄，檢測(cè)血糖水平過(guò)低或過(guò)高的標(biāo)本時(shí)還會(huì)出現(xiàn)檢測(cè)不出或檢測(cè)結(jié)果不可靠等情況[7-8]。HASSLACHER等[9]對(duì)19種不同品牌血糖儀的性能評(píng)估發(fā)現(xiàn)，僅有8臺(tái)血糖儀符合ISO 15197：2003標(biāo)準(zhǔn)的準(zhǔn)確度要求，因此選擇準(zhǔn)確度和精密度高的血糖儀尤為重要。日立7180全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血糖采用的是葡萄糖氧化酶法，在檢測(cè)標(biāo)本前嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室制訂的操作規(guī)程進(jìn)行保養(yǎng)和校準(zhǔn)，并且確保室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)完全在控，其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確，因此本研究以日立7180生化分析儀檢測(cè)結(jié)果作為參考，對(duì)羅氏便攜式血糖儀的檢測(cè)性能進(jìn)行評(píng)估。

本研究所驗(yàn)證的3臺(tái)羅氏便攜式血糖儀批內(nèi)CV和批間CV均小于7.5%，線性范圍也均符合線性要求，與梅松等[10]報(bào)道結(jié)果相近。相關(guān)性分析顯示，血糖儀各類型標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果間均存在顯著相關(guān)性，與生化儀的檢測(cè)結(jié)果也存在顯著相關(guān)性(均r>0.99，P<0.05)，提示末梢血、靜脈血漿、靜脈血清等標(biāo)本在血糖儀上的檢測(cè)結(jié)果與生化儀檢測(cè)的結(jié)果具有較好的可比性，羅氏便攜式血糖儀能基本滿足臨床診療中的快速血糖檢測(cè)及DM患者的血糖監(jiān)測(cè)需求。但是由于血糖儀的檢測(cè)易受多種因素的干擾，臨床使用前必須對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行全面的驗(yàn)證和評(píng)價(jià)，定期做好血糖儀的質(zhì)量控制及比對(duì)工作，對(duì)于異常值也應(yīng)當(dāng)參照生化儀檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行一定的校正，有條件的情況下還可建立血糖儀的血糖參考范圍，以保證血糖檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

本研究發(fā)現(xiàn)不同血糖水平范圍內(nèi)，血糖儀檢測(cè)不同類型標(biāo)本的結(jié)果存在差異：血糖水平<6 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平明顯低于其余各組(P<0.05)；血糖水平為6～10 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平明顯低于血漿POCT組、血清POCT組、血漿生化儀組和血清生化儀組(P<0.05)；血糖水平>10 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，全血POCT組血糖水平低于血清POCT組(P<0.05)，與周亞敏等[11]的研究結(jié)果相似。造成血糖儀靜脈全血檢測(cè)結(jié)果偏低的原因可能為：(1)靜脈全血標(biāo)本中的葡萄糖在未添加糖酵解抑制劑時(shí)會(huì)以5%～7%的速度發(fā)生酵解，導(dǎo)致血糖檢測(cè)結(jié)果的假性降低，如采集后未能及時(shí)送檢而放置過(guò)長(zhǎng)時(shí)間，會(huì)造成細(xì)菌數(shù)量增加，加速其糖酵解反應(yīng)，消耗大量的葡萄糖，影響檢測(cè)結(jié)果[12-13]；(2)不同的血細(xì)胞比容(HCT)會(huì)導(dǎo)致血糖儀檢測(cè)靜脈血糖結(jié)果的偏差，而靜脈全血中的HCT明顯高于末梢血。有研究顯示，大部分血糖儀在HCT降低時(shí)會(huì)出現(xiàn)血糖檢測(cè)結(jié)果偏高，而在HCT增高時(shí)血糖檢測(cè)結(jié)果則偏低[14]。本研究血糖水平為6～10 mmol/L的檢測(cè)結(jié)果中，末梢血POCT組血糖水平低于血清POCT組、血漿生化儀組及血清生化儀組(P<0.05)。造成血糖儀末梢血檢測(cè)結(jié)果偏低的原因可能與末梢毛細(xì)血管血的成分(靜脈血和動(dòng)脈血的混合成分)，工作人員采集時(shí)的擠壓程度，針刺深度或手術(shù)、創(chuàng)傷等造成的外周組織水腫等因素有關(guān)。此外，血糖儀檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性還可受到多種物質(zhì)的干擾，如維生素C、對(duì)乙酰氨基酚、水楊酸等藥物[3]。

本研究存在一定的局限性，在納入不同類型的標(biāo)本中未考慮到耳垂血、動(dòng)脈血、HCT異常等對(duì)血糖儀檢測(cè)結(jié)果的影響。此外，國(guó)外研究顯示，采用動(dòng)脈血監(jiān)測(cè)血糖的準(zhǔn)確度更高，動(dòng)脈血的血糖檢測(cè)結(jié)果更能準(zhǔn)確反映休克患者的真實(shí)血糖水平[15]，但本研究對(duì)于動(dòng)脈血在血糖儀上的應(yīng)用未涉及，今后的研究中將繼續(xù)補(bǔ)充完善。