病毒性角膜內(nèi)皮炎的研究現(xiàn)狀

李燕玲，蘇旺銘，何小輝

0引言

病毒性角膜內(nèi)皮炎是一種發(fā)生于角膜內(nèi)皮的急性非化膿性炎癥，以特征性的基質(zhì)水腫，而無基質(zhì)浸潤(rùn)及新生血管，僅出現(xiàn)于基質(zhì)水腫區(qū)的角膜后沉著物(keratic precipitates,KP)為特征，常伴小梁網(wǎng)炎、虹膜睫狀體炎，其臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，臨床誤診率高。1982年首次報(bào)道2例以來，病毒性角膜內(nèi)皮炎逐漸受到人們的重視，國(guó)內(nèi)外均有越來越多的報(bào)道?，F(xiàn)將其研究現(xiàn)狀作一概述。

1病毒性角膜內(nèi)皮炎的誘因和病因及發(fā)病機(jī)制

1.1病毒性角膜內(nèi)皮炎的誘因Shimomura[1]通過一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)壓力尤其春夏季時(shí)、缺乏睡眠、肩部僵硬不適、身體的疲勞是誘發(fā)單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)激活的關(guān)鍵因素，此外還包括暴露于紫外線輻射、月經(jīng)期、發(fā)燒、濫用糖皮質(zhì)激素和外傷[2]，國(guó)外一些研究證明單純皰疹病毒性角膜炎(herpes simplex keratitis，HSK)的發(fā)生率在老年人更高[3-4]，故認(rèn)為年齡可能也是發(fā)生病毒性角膜內(nèi)皮炎的一個(gè)危險(xiǎn)因素。

1.2病毒性角膜內(nèi)皮炎的病因1985年，Robin等[5]首次在進(jìn)展性角膜內(nèi)皮炎患者的房水中分離出HSV，并使用免疫熒光技術(shù)在前房細(xì)胞中檢測(cè)到了HSV-1型抗原。2002年Madhavan等[6]從1例雙眼角膜內(nèi)皮炎患者房水中分離出水皰樣病毒。有學(xué)者[7-9]在2009、2010、2011年利用實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)出水痘帶狀皰疹病毒(varicella zoster virus,VZV)、人類皰疹病毒-7(human herpes virus-7,HHV-7)、人類皰疹病毒-8(human herpes virus-7,HHV-8)，病毒性角膜內(nèi)皮炎可由多種病毒引起，而HSV-1是最常見的致病病毒。

1.3病毒性角膜內(nèi)皮炎的發(fā)病機(jī)制病毒性角膜內(nèi)皮炎的發(fā)病機(jī)制存在兩大學(xué)說：病毒感染學(xué)說和免疫炎癥學(xué)說。相繼在患者房水中檢測(cè)出HSV-1、水皰樣病毒、流行性腮腺炎病毒、巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus,CMV)、VZV、HHV-7、HHV-8的DNA，至此發(fā)現(xiàn)病毒感染可能是病毒性角膜內(nèi)皮炎的重要發(fā)病機(jī)制。2002年Zheng等[10]通過在兔的角膜上成功建立了HSV角膜內(nèi)皮炎的模型，也揭示了HSV-1感染角膜內(nèi)皮至少是角膜內(nèi)皮炎的一個(gè)病因，前房相關(guān)性免疫偏離(anterior chamber-associated im mune deviation， ACAID)在病毒性角膜內(nèi)皮炎中扮演一個(gè)關(guān)鍵性的角色。ACAID指眼源性抗原信號(hào)通過眼局部的抗原遞呈細(xì)胞經(jīng)血到達(dá)脾臟時(shí)，選擇性地激活調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞抑制抗原特異性的遲發(fā)型超敏反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合性抗體的發(fā)生發(fā)展，保留抗原特異性致敏的細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞反應(yīng)。 而一些體外試驗(yàn)證明了TOLL樣受體-9引起的分子反應(yīng)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在病毒性角膜內(nèi)皮炎中也發(fā)揮重要作用[11-12]。目前主流觀點(diǎn)認(rèn)為病毒性角膜內(nèi)皮炎是由病毒感染和病毒誘發(fā)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)共同作用的結(jié)果[13-14]。

2病毒性角膜內(nèi)皮炎的臨床表現(xiàn)及分類

2.1病毒性角膜內(nèi)皮炎的臨床表現(xiàn)病毒性角膜內(nèi)皮炎表現(xiàn)為視力顯著下降，結(jié)膜睫狀充血或混合性充血，可有角膜上皮小水泡，角膜基質(zhì)呈局限性或彌漫性水腫，而無基質(zhì)浸潤(rùn)及新生血管，KP呈塵狀、灰白色，脂狀或色素樣，呈特征性分布，僅出現(xiàn)于水腫區(qū)，后彈力層皺褶，部分患者前房閃輝，伴發(fā)小梁網(wǎng)炎時(shí)可有眼壓升高，但常低于40mmHg，反復(fù)發(fā)作導(dǎo)致角膜內(nèi)皮失代償時(shí)可發(fā)生角膜大泡。由于臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，常被誤診為急性閉角型青光眼、虹膜睫狀體炎、青光眼睫狀體炎綜合征、免疫性基質(zhì)型角膜炎以及內(nèi)眼手術(shù)特別是白內(nèi)障手術(shù)后的內(nèi)皮損傷。

2.2病毒性角膜內(nèi)皮炎的分類國(guó)內(nèi)外關(guān)于病毒性角膜內(nèi)皮炎的分類多種多樣，目前較統(tǒng)一的分類是根據(jù)KP的分布情況將其分為盤狀型、彌漫型及線狀型三類[15]。線狀型臨床上較少見，其內(nèi)皮細(xì)胞快速大量丟失，是最嚴(yán)重的類型，其KP類似角膜內(nèi)皮排斥線，呈線狀排列，向心性發(fā)展，KP 和角膜緣之間有基質(zhì)和上皮水腫，KP線內(nèi)外角膜水腫邊界清晰，線狀型角膜內(nèi)皮炎可單獨(dú)發(fā)生于穿透性角膜移植術(shù)后或白內(nèi)障術(shù)后，引起的病原體通常有HSV和CMV。當(dāng)KP呈錢幣樣排列時(shí)是CMV角膜內(nèi)皮炎的特征性改變。盤狀型是最常見的類型，角膜中央或旁中央呈圓形或盤狀基質(zhì)水腫，邊界清晰，明顯劃分出感染區(qū)和非感染區(qū)，水腫區(qū)有大量KP,引起的病原體通常有HSV和VZV，角膜內(nèi)皮細(xì)胞丟失不明顯。彌漫型相對(duì)較少見，通常出現(xiàn)于流行性腮腺炎病毒全身感染時(shí)，角膜彌漫性水腫，KP也彌漫性分布，當(dāng)角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度下降到一定程度時(shí)，角膜水腫也在幾周內(nèi)消失，此型機(jī)制尚不明確，可能是病毒血癥時(shí)病毒進(jìn)入前房有關(guān)[16]。

3病毒性角膜內(nèi)皮炎的輔助診斷技術(shù)

3.1病毒分離病毒分離法曾為診斷病毒感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但檢出率較低，花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，其對(duì)標(biāo)本運(yùn)輸、細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)室設(shè)備要求較高，而且當(dāng)病毒處于潛伏期，未進(jìn)行復(fù)制時(shí)，可造成假陰性的結(jié)果。在臨床上無法推廣，只能在有條件的醫(yī)院或?qū)嶒?yàn)室開展。

3.2角膜內(nèi)皮鏡檢查病毒性角膜內(nèi)皮炎時(shí)角膜內(nèi)皮細(xì)胞表現(xiàn)為體積普遍增大、數(shù)目減少、大小不等、細(xì)胞邊界不清、六邊形細(xì)胞比例減少、細(xì)胞呈多形性、形態(tài)不規(guī)則[17-18]。陳凱等[19]通過對(duì)各型角膜內(nèi)皮炎藥物治療前后內(nèi)皮細(xì)胞的觀察發(fā)現(xiàn)盤狀型、線狀型、彌漫型內(nèi)皮細(xì)胞損傷程度不同，需要藥物治療的時(shí)間、恢復(fù)時(shí)間不同，彌漫型內(nèi)皮細(xì)胞損傷最為嚴(yán)重，需要恢復(fù)的時(shí)間最長(zhǎng)。

角膜內(nèi)皮鏡檢測(cè)可觀察內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)改變，可判斷內(nèi)皮損傷嚴(yán)重程度，以及觀察治療前后病情恢復(fù)情況，但是缺乏特異性，多種疾病有共同表現(xiàn)，因此無法明確病因，只能作為一種輔助檢查方法。

3.3活體共聚焦顯微鏡病毒性角膜內(nèi)皮炎活體角膜共聚焦顯微鏡下(invivoconfocal microscope, IVCM)表現(xiàn)為病變區(qū)角膜上皮細(xì)胞腫脹，細(xì)胞間出現(xiàn)大小不一的空泡，上皮下神經(jīng)纖維叢密度下降，纖維變細(xì)，基質(zhì)層可見樹突狀的朗格漢斯細(xì)胞聚集，基質(zhì)細(xì)胞腫脹，活化，初發(fā)者基質(zhì)內(nèi)無炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，無瘢痕，而病情遷延者基質(zhì)層可見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)甚至瘢痕形成，內(nèi)皮細(xì)胞不同程度腫脹，失去多邊形結(jié)構(gòu)，邊界模糊，核增大，細(xì)胞間隙增寬，出現(xiàn)形態(tài)各異的KP。內(nèi)皮炎時(shí)角膜各層均發(fā)生變化。經(jīng)過治療后角膜上皮細(xì)胞可恢復(fù)正常，上皮下神經(jīng)纖維叢密度仍較低，基質(zhì)層朗格漢斯細(xì)胞密度下降但仍比健眼高，仍表現(xiàn)為樹突樣，角膜基質(zhì)細(xì)胞腫脹減輕，炎癥細(xì)胞減少，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)逐漸恢復(fù)正常，KP吸收后內(nèi)皮細(xì)胞覆蓋原來缺損區(qū)域[20-22]。Hillenaar等[23]也觀察到類似表現(xiàn)，其還發(fā)現(xiàn)經(jīng)過1～3wk的治療，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、邊界不清、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等體征均可以消失，但是內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)卻每年都在下降，以每年10.3%的速度在下降，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生了不可逆的反應(yīng)。

跟裂隙燈的40倍的分辨率比起來，IVCM的500倍的分辨率可以觀察到裂隙燈無法觀察到的細(xì)胞形態(tài)改變，比如細(xì)胞間間隙擴(kuò)大，內(nèi)皮層炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，細(xì)胞邊界不清，點(diǎn)狀空洞，內(nèi)皮缺失等，其可以早期發(fā)現(xiàn)疾病，通過細(xì)胞水平的觀察，為臨床探討，治療及轉(zhuǎn)歸提供形態(tài)學(xué)依據(jù)，觀察治療效果，通過檢測(cè)形態(tài)學(xué)改變，把握臨床治療時(shí)間。共焦顯微鏡檢查對(duì)于HSK的診斷無特異性，在臨床上僅作輔助檢查。

3.4環(huán)媒恒溫?cái)U(kuò)增法環(huán)媒恒溫?cái)U(kuò)增法(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)由Notomi于2000年研發(fā)，是一種新式的恒溫核酸擴(kuò)增方法，與病毒培養(yǎng)相比，LAMP的敏感性較高；與RT-PCR相比，LAMP的敏感性較低。

3.5間接免疫熒光法間接免疫熒光法(indirect immuno fluorescent technique，IIF)是組織化學(xué)和免疫學(xué)方法結(jié)合而成的一種比較靈敏的檢測(cè)方法， 主要借助顯微鏡檢查來觀察抗原-抗體反應(yīng)。國(guó)內(nèi)外均有學(xué)者利用此技術(shù)檢測(cè)出病毒性角膜炎中的病毒，Kaufman等[24]利用IIF與病毒分離兩種方法來檢測(cè)病毒性角膜炎患者中的病毒，檢測(cè)結(jié)果相符，證明了IIF檢測(cè)病毒的可行性。王怡等[25]利用間接免疫熒光技術(shù)在角膜內(nèi)皮炎的患者房水及小梁組織中檢測(cè)出了HSV-1病毒。

3.6 PCR、RT-PCR、巢式PCR、多重PCRPCR是基于DNA的復(fù)制原理在體外對(duì)病毒DNA進(jìn)行擴(kuò)增，通過技術(shù)改進(jìn)，又產(chǎn)生了RT-PCR、巢式PCR、多重PCR。多重PCR可早期、快速檢測(cè)出多種病原體，敏感性高，其最小檢出量為100fg DNA，相當(dāng)于幾十個(gè)拷貝的HSV或十幾個(gè)真菌。但是多重PCR設(shè)計(jì)引物較困難，目前運(yùn)用最廣泛的病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)是RT-PCR，張愛雪等[26]證明了RT-PCR技術(shù)的高敏感性、高特異性和高精確性，其在疾病診斷、預(yù)后監(jiān)測(cè)等方面有著廣泛的應(yīng)用前景。Inoue 等[27]利用實(shí)時(shí)PCR在角膜內(nèi)皮炎中檢測(cè)出HSV、CMV、VZV、HHV-7及HHV-8。其還利用RT-PCR檢測(cè)出了在治療前和治療后的HSK病毒DNA拷貝數(shù)的變化由此發(fā)現(xiàn)治療是否有效，而且還發(fā)現(xiàn)了阿昔洛韋耐藥病毒株。因此在臨床上運(yùn)用抗病毒藥物無效時(shí)可用此法檢測(cè)，來判斷是否耐藥，從而及時(shí)更換治療方案。PCR檢查還對(duì)潛伏在角膜組織中的病毒的檢出具有較高的靈敏度[28]。

IIF、PCR及其改進(jìn)技術(shù)用于病毒角膜內(nèi)皮炎中檢測(cè)病毒具有高敏感性、高特異性，但是其設(shè)備昂貴、需要專業(yè)技術(shù)，價(jià)格較高，在臨床上運(yùn)用具有一定限制性，故主要用于實(shí)驗(yàn)室研究。目前對(duì)于病毒性角膜內(nèi)皮炎的診斷還主要依靠臨床觀察。

4病毒性角膜內(nèi)皮炎的治療

4.1臨床主要治療方法根據(jù)病毒性角膜內(nèi)皮炎的發(fā)病機(jī)制，目前國(guó)內(nèi)外較統(tǒng)一的觀點(diǎn)是抗病毒治療和糖皮質(zhì)激素聯(lián)合運(yùn)用，在臨床上，聯(lián)合用藥療效確切[18,28-30]。國(guó)內(nèi)外專家均認(rèn)為抗病毒為治療的第一要素，只有在足量抗病毒的前提下聯(lián)合應(yīng)用適量激素才可迅速控制病情[31-32]。

抗病毒藥物中阿昔洛韋(acyclovir，ACV)是最早應(yīng)用于臨床，抗病毒療效最好的藥物之一。而ACV對(duì)正常細(xì)胞毒性小，特異性高。目前，ACV仍為抗單純皰疹病毒首選藥物，靜脈滴注時(shí)常采用阿昔洛韋。伐昔洛韋是阿昔洛韋的前體物質(zhì)，可在小腸迅速轉(zhuǎn)化為阿昔洛韋，生物利用度是后者的5倍，許多實(shí)驗(yàn)也證明口服伐昔洛韋比口服阿昔洛韋安全性有效性更強(qiáng)[33]。故口服抗病毒藥物時(shí)常用伐昔洛韋。更昔洛韋(Ganciclovir，GCV)是ACV的一個(gè)同族體 ，出于安全性、有效性、耐受性考慮，0.15%更昔洛韋凝膠現(xiàn)在認(rèn)為是局部抗病毒藥物的一線用藥，局部運(yùn)用更昔洛韋凝膠或滴眼液在角膜和前房能達(dá)到有效治療劑量[34]。

關(guān)于病毒性角膜內(nèi)皮炎治療中運(yùn)用激素的問題，洪晶[35]認(rèn)為中重度病毒性角膜內(nèi)皮炎可局部使用糖皮質(zhì)激素，重度盤狀型、彌漫型及所有線狀型需全身運(yùn)用，在藥物治療過程中，研究發(fā)現(xiàn)對(duì)內(nèi)皮炎患者延期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素會(huì)加重角膜內(nèi)皮細(xì)胞的丟失。因此，早期應(yīng)用皮質(zhì)類固醇激素可減少內(nèi)皮細(xì)胞的丟失，及時(shí)控制病情發(fā)展。鄧世靖等[20]通過共聚焦顯微鏡觀察到角膜內(nèi)皮炎時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞間有形態(tài)各異的炎癥細(xì)胞的聚集和浸潤(rùn)，初發(fā)或病程較短的病例，基質(zhì)層未見炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，經(jīng)及時(shí)治療，角膜可無明顯瘢痕形成；但反復(fù)發(fā)作，或病情遷延的患者，炎癥可波及角膜基質(zhì)，至基質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)多量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，可見瘢痕形成，臨床上表現(xiàn)為內(nèi)皮型和基質(zhì)型的混合類型。因此早期迅速控制炎癥至關(guān)重要。

史偉云[31]推薦阿昔洛韋靜脈滴注7～10d后改口服抗病毒藥3mo以上，局部抗病毒藥至少1mo，應(yīng)逐漸減量至停藥，糖皮質(zhì)激素在炎癥消退后應(yīng)停藥，一般不超過4wk。洪晶等[29]則認(rèn)為激素應(yīng)使用1mo以上，線性角膜內(nèi)皮炎激素類藥物使用時(shí)間不能少于3mo，但兩者均推薦在炎癥反應(yīng)控制后還要使用一段時(shí)間的維持劑量藥物。Basak 等[36]推薦口服及局部抗病毒藥物1a或更長(zhǎng)時(shí)間對(duì)預(yù)防復(fù)發(fā)是有用的。

4.2其他治療方法及研究現(xiàn)狀

4.2.1其他抗病毒藥物Brincidofovir(CMX001)是作為一種活躍的、親脂的西多福韋(CDV)形式發(fā)展而來的抗病毒藥物,以改善 CDV 的口服生物利用度在病毒感染的細(xì)中,CMX001 代謝釋放 CDV,抑制病毒 DNA 聚合酶,進(jìn)而抑制病毒復(fù)制[37]。

4.2.2前房和玻璃體腔注射抗病毒藥物Choi等[38]成功利用前房GCV注射來治療嚴(yán)重CMV內(nèi)皮炎的患者，第一個(gè)證明了GCV前房注射治療病毒性角膜內(nèi)皮炎是可靠的、安全的。同時(shí)其發(fā)現(xiàn)GCV對(duì)角膜內(nèi)皮細(xì)胞的毒性作用具有濃度依賴性，當(dāng)GCV濃度大于5mg/mL時(shí)，細(xì)胞密度下降，抑制了細(xì)胞增殖，而當(dāng)濃度小于0.5mg/mL則不會(huì)降低內(nèi)皮細(xì)胞密度，是安全、可靠的。前房注射抗病毒藥物比全身用藥副作用較少，對(duì)于有嚴(yán)重藥物副作用的病毒性角膜內(nèi)皮炎的患者，此方法也是一個(gè)很好的選擇。利用玻璃體腔注射也被證明能有效治療CMV角膜內(nèi)皮炎的患者[39]。相對(duì)于玻璃體腔注射，前房注射可能更有優(yōu)勢(shì)，其藥物可迅速抵達(dá)角膜內(nèi)皮發(fā)揮作用。

4.2.3 基因治療在美國(guó)，每年有59萬的新發(fā)病例，其中25%～42%的患者初次發(fā)病1～2a間又復(fù)發(fā)。Young等[40]報(bào)道341初次感染HSV者1、5、10、20a復(fù)發(fā)率分別為27%、50%、57%、63%，有復(fù)發(fā)史者復(fù)發(fā)率則更高。HSK的復(fù)發(fā)除了因HSV-1的再活化外，還可能重新感染了新亞型HSV，Remeijer等[41]發(fā)現(xiàn)三分之一的復(fù)發(fā)疾病是角膜二次感染了HSV-1的新亞型，其中有63%的亞型是相同的。有HSK復(fù)發(fā)病史的血清陽性個(gè)體可能具有CC IL28B基因型。這種基因型可能與感染控制不完全以及三叉神經(jīng)節(jié)第一神經(jīng)支上周期性病毒脫落更為頻繁有關(guān)，臨床上表現(xiàn)為復(fù)發(fā)性皰疹性角膜炎。復(fù)發(fā)性HSV-1感染的臨床表現(xiàn)似乎受IL28B基因型多態(tài)性的影響[42]。此外HSV-1對(duì)治療藥物(多為阿昔洛韋)產(chǎn)生耐藥 也可能是引發(fā)HSV-1再次感染的原因之一。阿昔洛韋為抗病毒的一線藥物，而臨床及實(shí)驗(yàn)室不斷發(fā)現(xiàn)對(duì)阿昔洛韋耐藥的病例[43]。患有HSK比患有HSV-1相關(guān)的其他疾病相比對(duì)ACV耐藥更高[44-45]，報(bào)告顯示，阿昔洛韋在角膜的耐藥性高達(dá)6%[46]，耐藥的病毒性角膜炎在其病毒潛伏期過后再次被激活時(shí)仍然耐藥[47]。全身抗病毒藥物耐藥性高，局部耐藥較全身用藥小，但局部用藥的眼表停留時(shí)間短，導(dǎo)致局部用藥效果差，Koganti 等[45]研究了一種新方法，將阿昔洛韋通過碳基藥物傳遞系統(tǒng)也就是藥物封裝碳(drug-encapsulated carbon，DECON)，可以增加局部阿昔洛韋的療效。DECON是一種無毒黏合劑。它裝載大量的藥物并運(yùn)送到角結(jié)膜，以一種持續(xù)的方式附著在黏膜表面，使其成為傳統(tǒng)給藥的一種新選擇。

目前的治療藥物大多是作用在抑制病毒DNA聚合酶，對(duì)于耐藥的HSV感染，目前的抗病毒二線藥物有膦甲酸鈉和西多福韋，但藥物毒性大，臨床很少用。長(zhǎng)期口服阿昔洛韋及類似物等可預(yù)防復(fù)發(fā)，但其并不能根除潛伏感染的病毒[48]。這就需要開發(fā)新藥，來阻止復(fù)發(fā)和耐藥，從而更好地預(yù)防和治療病毒性角膜內(nèi)皮炎。

4.2.3.1疫苗我國(guó)朱明昭等[49]構(gòu)建、制備Ⅰ型單純皰疹病毒糖蛋白D重組質(zhì)粒DNA疫苗，免疫小鼠后，產(chǎn)生了特異性抗體，發(fā)現(xiàn)HSV-IgD重組質(zhì)粒DNA有可能作為HSV-1的DNA疫苗。劉曉娟等[50]研究了白介素2(IL-2)cDNA協(xié)同HSV-1 gD核酸疫苗免疫對(duì)機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答的影響，證明IL-2作為一種新型的免疫調(diào)節(jié)因子基因佐劑在抗HSV-1感染免疫中具有良好的應(yīng)用前景。

Bettahi等[51]用自身輔助的糖蛋白D脂肽免疫小鼠，可以預(yù)防小鼠病毒性角膜炎的發(fā)生，接種疫苗的小鼠的淚液中病毒的滴度減少，但HSV-1 CD4 T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子卻增加了。Schrimpf等[52]通過敲除感染細(xì)胞蛋白(infected cell protein 8，ICP8)基因、病毒宿主關(guān)閉蛋白增強(qiáng)了疫苗的效能，降低角膜炎的發(fā)生率。在小鼠的試驗(yàn)中學(xué)者證明了CJ83193可作為有效地防止HSV-1感染的疫苗[53]。Lu等[54]證明了 CJ9-gD可以讓UL9基因缺失，編碼額外的gD基因，感染后高表達(dá)gD，相對(duì)于CJ83193可以產(chǎn)生更多的抗HSV-1的特定中和抗體，防止野生型HSV-1病毒株感染，而且它免疫的小鼠產(chǎn)生更強(qiáng)的T細(xì)胞反應(yīng)，阻止了80%的野生型病毒的潛伏感染。

4.2.3.2抗體2013年，Koganti等[45]開發(fā)了一種人源化單克隆抗體，命名為mAb hu2c，是一種病毒糖蛋白gB的抗體。mAb hu2c被證明能夠有效中和HSV-1的野生型和耐藥株，它阻斷了病毒在細(xì)胞間的傳播。

4.2.3.3解旋-引物酶抑制劑解旋-引物酶對(duì)于病毒復(fù)制是必不可少的，解旋-引物酶抑制劑是以包含了UL5、 UL8和 UL52的解旋-引物酶復(fù)合體為靶點(diǎn)，在動(dòng)物模型上證實(shí)了其可有效控制病毒HSV感染[55]，這給病毒性角膜內(nèi)皮炎的治療帶來希望。

4.2.3.4趨化因子受體傳統(tǒng)的藥物治療都是針對(duì)病毒酶的藥物，所有可用藥物控制的病毒蛋白和相關(guān)小分子不多，是有限的，而這些起直接作用的藥物的主要使用缺點(diǎn)是耐藥性的出現(xiàn)[56-57]。這就使人們?nèi)グl(fā)展宿主導(dǎo)向分子[58]，Shimomura[1]通過在小鼠HSK模型上使用了8種趨化因子，發(fā)現(xiàn)這些趨化因子可以打開HSV的包膜，證明了其可以抑制HSV的感染。近年來基礎(chǔ)及藥物研究正在往病毒-宿主相互作用的網(wǎng)絡(luò)中的蛋白為靶點(diǎn)的方向發(fā)展，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了一個(gè)成功的抗病毒藥物是馬拉韋羅，是CCR5趨化因子受體，用來治療HIV感染[59]。相信近來比較熱門的VH protein-protein interactions (PPIs)的研究會(huì)對(duì)探索宿主導(dǎo)向藥物提供新方向。

4.2.3.5其它方法BX795是一種著名的PDK1抑制劑，其能抑制下游許多其他激酶包括TBK1、B激酶和IkB激酶(IKK)。與目前許多治療眼部HSV-1感染的方法不同，它不是核苷類似物。相反，BX795可以抑制Akt在Ser473位點(diǎn)的磷酸化并阻止其下游真核生物翻譯起始因子4e結(jié)合蛋白1的過磷酸化(4E-BP1)。Akt信號(hào)通路的激活隨后mTORC1的激活被證明可以增加病毒蛋白的合成，因此抑制該途徑是抑制細(xì)胞內(nèi)病毒活動(dòng)的有效途徑[45]。

目前基因治療還只是在動(dòng)物模型上，分為以炎癥介質(zhì)為靶點(diǎn)的基因治療和以病毒基因?yàn)榘悬c(diǎn)的基因治療，但在不久的將來相信在人的身上可以實(shí)現(xiàn)，更好地治療和預(yù)防病毒性角膜內(nèi)皮炎。

5展望

對(duì)于病毒性角膜內(nèi)皮炎發(fā)病機(jī)制，未來有望能更清楚地了解，實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)的提高若能在臨床上廣泛推廣，則可避免延誤診斷，耐藥病毒株的出現(xiàn)及高復(fù)發(fā)率，急需研究新藥，基因工程藥物的研究目前尚處于實(shí)驗(yàn)室研究階段，在不久的將來有望在臨床上推廣，從而給更多病毒性角膜內(nèi)皮炎患者帶去曙光。