質(zhì)譜技術(shù)在中藥指紋圖譜研究中的應(yīng)用

胡鐘芳

（廣州醫(yī)藥研究總院有限公司，廣東 廣州 510000）

中藥的化學(xué)成分復(fù)雜多樣，目前難以做到對每類成分的逐一定性或定量分析。中藥指紋圖譜作為一種建立在中藥多成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，綜合、量化的研究手段，可從整體上體現(xiàn)中藥的生物、理化特征，充分反映中藥整體性和模糊性的特點［1］，適用于對中藥材以及中藥制劑真?zhèn)蝺?yōu)劣和質(zhì)量穩(wěn)定性的評價。中藥指紋圖譜的測定方法有很多，其中質(zhì)譜法憑借其高通量、高靈敏度、高選擇性等優(yōu)勢，得到了廣泛應(yīng)用。本文對近年來質(zhì)譜技術(shù)在中藥指紋圖譜研究中的應(yīng)用進(jìn)行了歸納總結(jié)。

1 質(zhì)譜技術(shù)發(fā)展概況

質(zhì)譜法是一種先將待測物質(zhì)轉(zhuǎn)化為氣態(tài)離子，之后離子按質(zhì)荷比（m／z）依次分離、檢測的分析方法［2］。質(zhì)譜儀的檢測限可達(dá)納克級別，具備靈敏度高，分辨率高，分析速度快，樣品消耗量少等優(yōu)點。

自第一臺質(zhì)譜儀誕生至今已有一百多年的歷史，質(zhì)譜技術(shù)不斷發(fā)展，其應(yīng)用領(lǐng)域也越來越廣泛。質(zhì)譜儀在早期主要用于無機物方面的研究，例如元素分析和同位素測定，20世紀(jì)50年代開始用于有機物分析。隨著質(zhì)譜接口的發(fā)展，多種分離技術(shù)與質(zhì)譜的聯(lián)用得以實現(xiàn)，質(zhì)譜技術(shù)的應(yīng)用范圍也得到了進(jìn)一步擴寬。目前質(zhì)譜分析法已被廣泛應(yīng)用于化工、環(huán)境、刑偵、食品、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域。

2 中藥指紋圖譜

中藥指紋圖譜是指某種中藥材或中成藥經(jīng)過適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，提取其化學(xué)信息并加以描述，得到能夠反映該中藥材或中成藥特性共有峰的圖譜［3］。中藥指紋圖譜具有以下3個特點：①系統(tǒng)性。圖譜信息包括了樣品的大部分成分。②特征性。具有較強的特異性，有一定的區(qū)分能力。③穩(wěn)定性。檢測重復(fù)性好，在建立的分析條件下可得到穩(wěn)定的特征峰。因此中藥指紋圖譜常被用于藥材真?zhèn)舞b別、優(yōu)劣評價和質(zhì)量控制的工作中。

中藥指紋圖譜獲取方法有：紅外光譜法、紫外光譜法、高效毛細(xì)管電泳、薄層色譜法、液相色譜法、氣相色譜法、質(zhì)譜法、核磁共振法、DNA指紋圖譜等等。

3 質(zhì)譜技術(shù)在中藥指紋圖譜研究中的應(yīng)用

在中藥指紋圖譜研究中，研究人員近年來最常用質(zhì)譜技術(shù)有液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS），以及在此檢測系統(tǒng)中串聯(lián)紫外檢測器（UV）、蒸發(fā)光散射檢測器（ELSD）等，從而獲取樣品的多維度信息，實現(xiàn)對中藥復(fù)雜體系中多種化學(xué)成分更加全面的定性定量分析。依據(jù)中藥指紋圖譜研究的目的，主要可分為藥材的真?zhèn)舞b別，藥材的加工工藝研究，藥材及中藥制劑的質(zhì)量控制與評價、藥物的譜效關(guān)系研究等。

3.1 藥材的真?zhèn)舞b別

楊錦玲等［4］采用GC-MS法分析了10批沉香中的揮發(fā)性成分，結(jié)果鑒定出75種成分，其中共有成分11種，建立了沉香的指紋圖譜，并將總離子流圖分成倍半萜類成分、色酮類成分兩個區(qū)段，適用于沉香的真?zhèn)舞b別。李文慶等［5］采用LC-MS法對12批冬蟲夏草指紋圖譜進(jìn)行分析，結(jié)果共確定了9個共有峰，相似度評價結(jié)果表明冬蟲夏草和其他蟲草樣品有明顯區(qū)別，該方法可用于冬蟲夏草及其他蟲草樣品的鑒別。

3.2 藥材的加工工藝研究

王麗芳等［6］采用LC-MS法對鮮干品組方六神曲發(fā)酵前后指標(biāo)成分進(jìn)行分析，識別出15個共有指紋峰，鑒別確定了其中槲皮苷、木犀草素、槲皮素3種成分并進(jìn)行含量檢測，初步揭示了六神曲中青蒿等以鮮品入藥優(yōu)于干品的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。盛菲亞等［7］對香附炮制前后揮發(fā)油的GC-MS指紋圖譜進(jìn)行比較研究，同時對比了生品和醋制品的共有成分，結(jié)果表明香附經(jīng)醋制后其揮發(fā)油成分保留得最為完整，為香附炮制工藝提供了科學(xué)依據(jù)。沈菲等［8］采用UFLC-Q-TOF-MS法對48批不同產(chǎn)地、不同加工方式以及不同規(guī)格的連翹藥材進(jìn)行分析，識別了18個共有峰，并鑒定出56個化學(xué)成分，結(jié)果表明不同的加工方式對連翹藥材質(zhì)量影響較大，加工方式以水煮烘干為佳，規(guī)格以青翹為佳，產(chǎn)地對連翹藥材質(zhì)量的影響較小。

3.3 藥材及中藥制劑的質(zhì)量控制與評價

張建鋒等［9］采用 UPLC-MS／MS法比較 11批黃連的指紋圖譜，確定了18個共有峰，初步鑒定了5個化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)，建立方法準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好，可用于黃連藥材的質(zhì)量控制。杜清等［10］采用GC-MS法對比了10批明黨參的指紋圖譜，對各個色譜峰的相似度進(jìn)行評價，分析其揮發(fā)油的成分種類和含量，共分離鑒定出47個化合成分，研究建立的圖譜出峰數(shù)目多、信息量豐富、方法穩(wěn)定性好，可用于評價明黨參藥材的品質(zhì)。龐穎等［11］采用GC-MS法比較11批丹七軟膠囊脂溶性成分，確定了49個共有峰，鑒定出38個化學(xué)物，各色譜峰分離效果良好，建立指紋圖譜可用于丹七軟膠囊質(zhì)量的評價。程世云等［12］采用GC-MS法建立了16批復(fù)方麝香注射液的指紋圖譜，確定了7個共有峰，樣品的相似度都在0.85以上，可用于復(fù)方麝香注射液質(zhì)量的評價。

3.4 藥物的譜效關(guān)系研究

蔣建蘭等［13］采用GC-MS分析了31批姜黃揮發(fā)油的指紋圖譜，確定了20個共有峰，并在此基礎(chǔ)上構(gòu)建姜黃揮發(fā)油的化學(xué)成分與抗腫瘤作用的組效關(guān)系模型，建立的分析方法可用于指導(dǎo)姜黃的質(zhì)量評價研究及其抗腫瘤活性成分篩選研究。李生茂等［14］采用GC-MS法對不同產(chǎn)地的18批砂仁揮發(fā)油進(jìn)行分析，確定其中7個色譜峰為共有峰，對砂仁揮發(fā)油指紋圖譜中各共有峰與鎮(zhèn)痛活性進(jìn)行譜效相關(guān)性分析，揭示了砂仁揮發(fā)油鎮(zhèn)痛效果的物質(zhì)基礎(chǔ)以及各成分鎮(zhèn)痛作用的大小。許平翠等［15］采用GC-MS建立了15批不同產(chǎn)地的白術(shù)飲片揮發(fā)油指紋圖譜，識別出28個共有特征峰，并初步揭示了白術(shù)揮發(fā)油抗氧化的物質(zhì)基礎(chǔ)。

4 結(jié)語

綜上所述，質(zhì)譜技術(shù)已經(jīng)被廣泛地應(yīng)用于中藥指紋圖譜的各類研究中。與其他分析技術(shù)相比，質(zhì)譜技術(shù)不僅大大提升了分析檢測的靈敏度和特異性，同時能提供樣品中各種化學(xué)成分的分子量及結(jié)構(gòu)信息，是中藥多成分復(fù)雜體系質(zhì)量控制和評價的有效方法，也為進(jìn)一步揭示中藥藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)提供了更加科學(xué)客觀的證據(jù)支持。