奶牛腹瀉病的病原學診斷

董長興 劉志勇 齊 彪

1.河北省唐山市豐南區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北唐山063300；2.河北省唐山市動物疫病預防控制中心，河北唐山063000

目前，奶牛養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模有所擴大，隨著生活水平的提高，人們對于奶的質(zhì)量以及需求量都在提升。而病毒性腹瀉病不僅會影響奶牛的產(chǎn)奶量，還嚴重破壞奶牛的健康，影響牛奶的質(zhì)量。

1 病原學診斷

該種疾病診斷方式主要分為細菌、病毒以及真菌3 種形式。其中，細菌診斷是以檢測病原菌及其抗體、產(chǎn)物或核酸為目的，通過標本采集與送檢后便可經(jīng)過涂片、干燥、固定以及染色進行觀察，鑒別細菌，選擇合適的藥劑，以掌握細菌致病性。而病毒診斷則是針對急性期的標本，病毒感染細胞后可出現(xiàn)細胞圓縮、裂解或腫大、數(shù)個細胞融合成多核巨細胞等情況。真菌診斷則是通過血清學試驗、核酸檢測以及真菌毒素檢測一系列試驗進行診斷。

該種病毒粒子多呈球形，直徑24～30 μm，可產(chǎn)生細胞病變與非細胞病變2 種，而該病的傳染源主要是病牛以及帶毒的牛，在患病動物的血液、骨髓等組織都含有病毒，健康奶牛與其直接甚至間接接觸都會感染該病，傳染可通過口、消化道以及呼吸道等部位。該病為地方性流行疾病，各年齡段的牛群都容易感染該病，且發(fā)病季節(jié)隨機，在冬季以及早春時節(jié)發(fā)病較多。

2 奶牛腹瀉病診斷

2.1 病毒性腹瀉發(fā)病機制

該種疾病在養(yǎng)殖奶牛過程中是較為常見的病癥，發(fā)病率較高，但不易引起大規(guī)模的死亡。4 歲以下的奶牛體中存在BVDV 抗體的可能性達到70%以上，而在自然條件下該病是由NCP 型病毒引起，且感染源來自持續(xù)性感染動物。另外，含有BVDV的生物制品也易引發(fā)該類疾病。奶牛的上呼吸道以及消化系統(tǒng)易受到感染，病毒進入血液后會出現(xiàn)病毒血癥，之后便進入奶牛的淋巴組織，并在此大量繁殖，影響白細胞的正常活動，導致體內(nèi)的白細胞減少，最終致使單核細胞數(shù)量增多。

奶牛感染BVDV 后，體溫會有小幅度的起伏，且白細胞減少。一般情況下，處于6月齡～2 歲的奶牛會出現(xiàn)急性腹瀉，且具有潛伏期，通常是5～7 d，情緒低落、食欲不振、腹瀉以及口鼻分泌物增多，而小部分受到感染的奶牛會出現(xiàn)口腔潰爛等現(xiàn)象。另外，奶牛的奶產(chǎn)量會明顯下降，并排出低濃度的病毒，患病3～4 周后通過血清檢測會發(fā)現(xiàn)病毒。同時，懷孕的母牛會影響犢牛的健康，不僅會受到病毒感染，還可能縮短其正常的壽命，導致流產(chǎn)、先天畸形或死胎。而受感染的犢牛表現(xiàn)不明顯，可利用體液免疫起到良好的防護作用。據(jù)近幾年的相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，該種病毒性疾病日趨嚴重，可能是病毒本身的強度提高，或是增強其他病原體的致病能力[1]。

2.2 病毒性腹瀉免疫

免疫抑制會影響奶牛自身的免疫機能，提高其他病原體的入侵能力。而免疫抑制能否引發(fā)疾病主要在于奶牛與周邊生存條件以及傳染源之間的關(guān)系，若養(yǎng)殖環(huán)境較差并與傳染源有所接觸會引起該病的大范圍流行。BVDV 破壞奶牛的消化系統(tǒng)，并出現(xiàn)淋巴組織萎縮的情況。感染BVDV 的奶牛會引起免疫抑制，借助抑制干擾素的產(chǎn)生來減緩細胞分類的速度，從而改變各類細胞的百分率。

持續(xù)性感染是BVDV 的一種類型，非免疫妊娠母牛感染NCP 型的BVDV 后，其病毒會通過胎盤感染胎兒。另外，該時期的胎兒免疫系統(tǒng)較為脆弱，無法準確識別外來物質(zhì)，缺少應有的抗體。通常情況下，妊娠100 d 后便極少會出現(xiàn)免疫耐受的情況，由于是母體持續(xù)性的傳播，因此受感染的犢牛也呈現(xiàn)出持續(xù)性的感染狀態(tài)。

2.3 判定方式

在該病流行期間，可結(jié)合流行情況以及奶牛具體的病狀、剖檢食道等特征性病變做出初步診斷，主要的判定依據(jù)是病牛中急性型疾病的體溫會達到40～42 ℃，持續(xù)2～3 d，且伴有2 次升高，會出現(xiàn)白細胞減少、厭食、舌面異常等現(xiàn)象。初期為水樣腹瀉，后期會帶有黏液和血，同時還會出現(xiàn)趾間糜爛、壞死，而慢性型疾病則極少會出現(xiàn)發(fā)熱的情況。另外，通過免疫擴散試驗、血清中和試驗、熒光免疫抗體試驗以及補體結(jié)合試驗等都可確診該病，目前，應用較為廣泛的是免疫擴散以及血清中和試驗[2]。

病原學診斷是在無菌的環(huán)境下采集奶牛的血液以及臟器，包括肺、肝臟、脾臟、腎臟以及淋巴組織等，經(jīng)過合理的處理操作后接種于牛源細胞，在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)3 代后若未出現(xiàn)細胞病變，可采用免疫熒光抗體技術(shù)進行判定；若出現(xiàn)病變情況，則應使用中和試驗進行判定。

3 結(jié) 語

除了及時確診外，還應做好相應的防護措施，對于各階段的奶牛需采取不同的應對措施。同時，還應做好牛棚的日常管理，保證奶牛處于良好的生活環(huán)境，提高其免疫力，并對出現(xiàn)病癥的奶牛及時隔離，以免出現(xiàn)大面積擴散。