提升灰黃霉素體內外釋藥性的研究

孔春梅，劉小寶，顧憲銳，王 韞，韓若嬋，趙曉靜，趙興華，何 欣?

（1.保定職業(yè)技術學院 071000；2.河北農業(yè)大學動物醫(yī)學院 071001）

灰黃霉素屬于非多烯類的抗真菌抗生素，能夠有效地抑制真菌的有絲分裂，對動物皮膚淺表性真菌病，如小孢子菌屬、毛癬菌以及紅色癬菌等都有效果[1]。 對于復發(fā)的疾病，再治仍可奏效。 但是，灰黃霉素溶解度極低，大大的降低了其的臨床藥效，所以在臨床上如何提升灰黃霉素的溶解度以及溶出度就成為了關鍵點。 近年來，為了最大限度地提升灰黃霉素的溶解度，常常采用固相分散技術等方式， 羥丙甲纖維素的醋酸酯和琥珀酸酯混合物羥丙甲纖維素醋酸琥珀酸酯(Hydroxypropylcellulose acetate succinate，HPMCAS-HF)，具有兩親性，所以常常用作難溶性藥物的無定形固體分散體(SD)的載體[2]，從而提升藥物的溶解度，從而提升藥物體內外的釋藥性。

1 灰黃霉素理化特性、機理以及吸收和體內外分布情況

1.1 灰黃霉素的理化特性

灰黃霉素為一種無色、 微苦、 耐熱粉狀物。 分子式為:C17H17O6Cl，分子量352.77，其熔點為218℃～224℃，比旋度為+352 度至+367 度。 灰黃霉素集齊容易溶于二甲基甲酰胺，在無水乙醇中微溶，在水中極微溶解，因此降低了藥效。 于干燥情況下，可穩(wěn)定不變質達20 個月，于冷藏酒精溶液內，可保持長期穩(wěn)定。

1.2 灰黃霉素抗菌作作用機理

灰黃霉素屬于抗真菌藥物， 能夠有效地抑制體表真菌的有絲分裂，從而降低真菌感染。 其作用機理是真菌可以吸收大量的灰黃霉素，因為感染了真菌的皮膚親和力大于正常皮膚，而且灰黃霉素的結構與鳥嘌呤的結構類似，從而在DNA 的合成過程中，灰黃霉素能夠與鳥嘌呤相互競爭，對真菌的DNA 的合成構成了干擾，降低了真菌的合成過程，從而對淺表的真菌性感染有很強的治愈性。 與此同時。 灰黃霉素在真菌的有絲分裂過程中，能夠與微管蛋白相結合，從而對真菌性疾病起到了療效[3]。

1.3 灰黃霉素吸收和內體外分布情況

灰黃霉素口服吸收效果好，口服后，主要在十二指腸吸收，口服后4h 血清濃度達到峰值，72h 下降到微量。 在口服一次劑量24h 后，僅有0.6%通過尿液排出，其中16%于大便排泄，藥物吸收后，于心臟、肺、肝脂肪、骨骼肌、皮膚中均可測得較高濃度。 皮膚中主要沉積于表皮、毛干和指甲的新生角蛋白中，為肝臟所分解。目前，獸醫(yī)工作者一直在找一種更好地方式，更有利于灰黃霉素的吸收利用和排出。

2 灰黃霉素在獸醫(yī)臨床的應用現(xiàn)狀

灰黃霉素是一種含氯代謝產物， 是在1939 年從灰黃青霉(Penicillium griseofulvin)培養(yǎng)液中得到的。 1960 年中國醫(yī)學科學院抗生素研究所從我國土壤中得到灰黃霉素的產生菌， 并研究試制成功灰黃霉素[4]。

灰黃霉素因為能抑制真菌的有絲分裂，對真菌性疾病有很好的療效，所以廣泛應用于獸醫(yī)臨床。 灰黃霉素對皮膚表層真菌感染有效，因為其靶細胞是動物的皮膚、毛發(fā)的角蛋白的前體細胞，當使用灰黃霉素后，這些部位藥物濃度最高，從而提升了角蛋白抵抗對真菌的抵御能力，降低真菌性疾病的發(fā)展。 皮膚感染真菌區(qū)域使用過灰黃霉素后， 感染區(qū)域角蛋白會逐漸的發(fā)生脫落，并被健康肉芽組織取代，不會留下任何后遺癥，所以廣泛被使用。 因為其對淺表的真菌感染有效，所以在獸醫(yī)臨床上主要用于動物的體癬治療，而對于真菌性腹瀉等很少應用[5]。 灰黃霉素最早應用于臨床是1958 年應用于臨床，通過文獻可知，灰黃霉素在很長一段時間內使用安全，偶見卟啉癥、皮疹、胃腸反應以及暫時性白細胞減少癥等，因為用量小，所以灰黃霉素在獸醫(yī)臨床應用很安全[6]，因此，現(xiàn)在在淺表真菌性感染疾病治療中灰黃霉素還是首選。 除此之外，灰黃霉素對帶狀皰疹疾病，常作為輔助治療，也有一定的治療作用。

因為灰黃霉素必須通過血液循環(huán)才能到達角蛋白中，所以目前灰黃霉素的劑型主要是片劑、滴劑和超微顆粒，因為外用藥物達不到體表深處，所以起不到抑菌的效果。 在獸醫(yī)臨床上，尤其是近幾年寵物臨床上，真菌性皮膚病的比例逐年遞增，已經占到多數(shù)動物醫(yī)院最常見的疾病之一， 而且真菌性皮膚病極其容易復發(fā)，正如詩詞“野火燒不盡，春風吹又生”，很難防控，嚴重影響動物的外觀及生長發(fā)育，也屬于人獸共患病范疇，必須找到一種能夠完全治愈的藥物，所以灰黃霉素市場廣大。

3 提升灰黃霉素體內外釋藥性的研究

但是，因為灰黃霉素很難溶于水，溶解度低，在腸道內吸收受到限制，目前的技術造成生產成本高，增加了養(yǎng)殖戶和消費者的負擔，所以灰黃霉素沒有完全農業(yè)化，提升灰黃霉素體內外釋放性研究成為了關鍵。 到目前為止，丙酮常常用為灰黃霉素的生產的溶解媒介， 但當前工業(yè)生產中所使用的丙酮試劑中都會有一定量的水分，劉曉峰等通過比較發(fā)現(xiàn)，采用丙酮與水按照一定量的混合可以提高灰黃霉素的溶解度。 通過比較試驗，最終結果是，灰黃霉素在丙酮中的溶解度為4%左右，含10%水分的丙酮溶液可以使灰黃霉素在丙酮中的溶解度提高18%左右。 但是丙酮含水在一定程度上會降低灰黃霉素從干菌體中溶解的速率[7]。

Lynne 等[8]證實HPMC-AS-HF 能夠提升藥物的溶解度，為了提升灰黃霉素體內外釋藥性， 胡志遠等將灰黃霉素分散于羥丙甲纖維素醋酸琥珀酸酯（HPMCAS）的PBS(pH6.8)緩沖溶液中制得超飽和溶液，與采用“離子交換法”制得的灰黃霉素-安賽蜜共晶以及灰黃霉素結晶粉末的跨膜滲透性進行比較。 結果表明，加入0.1%的HPMCAS 能夠長時間維持灰黃霉素的濃度至165.82μg/mL(是灰黃霉素平衡溶解度的16 倍左右)，這超飽和溶液能夠有效提高藥物的跨膜滲透速率（Jss），灰黃霉素超飽和溶液的Jss 為0.153μg/cm2/h，灰黃霉素共晶的Jss 為0.013μg/cm2/h，而灰黃霉素水溶液(10μg/mL)的Jss 為0.0127μg/cm2/h，添加聚合物HPMCAS 的灰黃霉素Jss 是灰黃霉素水溶液Jss 率的12.05倍。所以，添加聚合物HPMCAS 可以抑制灰黃霉素超飽和溶液中灰黃霉素的結晶作用， 極為有效地維持了溶液中藥物的游離態(tài)濃度， 這為研究提高難溶性藥物灰黃霉素的生物利用度提供了新思路。