毛細管電泳在手性化合物分離分析中的研究進展

劉明霞, 李向軍, 白 玉, 劉虎威

(1. 北京分子科學國家實驗室, 北京大學化學與分子工程學院, 北京 100871; 2. 中國科學院大學化學科學學院, 北京 100049)

手性是自然界和生命體中普遍存在的現(xiàn)象,從組成生物體的氨基酸、多糖、蛋白質(zhì)等生物分子到人類所使用的藥物,大部分都具有手性。手性化合物的對映體常具有相似的理化性質(zhì),但其在藥學、生物學等領域往往呈現(xiàn)出不同的活性。比如一些手性藥物的一個對映體具有藥理活性,而另一個是無效的,甚至是有毒的。如R-沙利度胺具有緩解孕婦晨吐的功效,而S-沙利度胺則會導致嬰兒畸形;S-布洛芬是高效非甾體解熱鎮(zhèn)痛藥,而R-布洛芬基本沒有藥理活性[1,2]。生物體內(nèi)的許多神經(jīng)活性物質(zhì)也具有手性,其對映體含量的變化與人體的健康狀況密切相關。如正常情況下人體內(nèi)D-乳酸的含量僅為L-乳酸的1%～5%[3],但在病理情況下,血漿中D-乳酸水平會顯著增加[4]。在國際純粹與應用化學聯(lián)合會評選出的2019年度“化學領域十大新興技術”中,與手性研究相關的“對映選擇性有機催化”榜上有名。因此,建立高效的手性化合物分離分析方法對于醫(yī)藥、環(huán)境、生物、食品等諸多研究領域都具有重要意義。目前常用于手性化合物分離的方法有高效液相色譜法(HPLC)、氣相色譜法(GC)、毛細管電泳法(CE)、超臨界流體色譜法(SFC)等。相較于其他方法,CE以其分析時間短、分離效率高、分離模式多、運行成本低等諸多優(yōu)勢在手性分離領域發(fā)揮著越來越重要的作用[5]。CE的分離模式主要包括毛細管區(qū)帶電泳(CZE)、毛細管電色譜(CEC)及膠束電動毛細管色譜(MEKC)等,按照分離原理不同,其應用范圍也各有側(cè)重。本文主要綜述了近3年來這3種分離模式在手性化合物分離分析方面的應用,并對該領域今后的發(fā)展做了展望。

1 毛細管區(qū)帶電泳

CZE是CE最基本、最常用的分離模式,其用于手性分離的主要原理為,在背景緩沖液中加入不同類型的手性選擇劑,兩個對映體與手性選擇劑形成的絡合物穩(wěn)定性不同,使得表觀遷移率產(chǎn)生差異,從而實現(xiàn)手性化合物的分離。近年來,用于CZE手性分離的選擇劑越來越多樣化,除了環(huán)糊精(CD)、冠醚、大環(huán)抗生素等傳統(tǒng)手性選擇劑外,手性離子液體、手性功能化納米顆粒、生物分子等也在CE手性分離領域發(fā)揮了重要作用。

1.1 環(huán)糊精及其衍生物手性選擇劑

在眾多的手性選擇劑中,CD及其衍生物仍然是CE手性分離中使用最多的手性選擇劑。CD是由多個D-吡喃葡萄糖以1,4-糖苷鍵相連形成的環(huán)狀低聚糖,天然CD主要有α-、β-和γ-CD 3種。對CD進行衍生化往往可獲得更優(yōu)的物理化學性質(zhì)和更高的分離效能,因此CD衍生物在CE手性分離中的應用更為廣泛。

Li課題組[6]以β-CD為手性選擇劑,芴甲氧羰酰氯(FMOC-Cl)為衍生劑,建立了CE-MS同時分離檢測雙手性神經(jīng)遞質(zhì)分子3-羥基天冬氨酸的4種立體異構(gòu)體的方法,并在小鼠腦脊液樣品中檢測到微量L-蘇式-3-羥基天冬氨酸。該課題組[7]針對單一對映體價格昂貴、不易獲取的現(xiàn)狀,提出了利用CE與圓二色譜相結(jié)合進行峰歸屬的新方法,該方法無需單一標準品,成功用于3-羥基天冬氨酸4種異構(gòu)體出峰順序的確認。虞婕等[8]以β-CD為手性選擇劑對抑霉唑進行手性拆分,同時采用堆積法在線富集,最優(yōu)條件下富集倍數(shù)達91～92倍。Balint等[9]通過五步相轉(zhuǎn)移催化法首次合成了七(6-O-甲基)-β-CD,將其用作CE手性添加劑分離亞甲基-二氧吡咯戊酮,取得了很好的分離效果。Sonnendecker等[10]利用設計的葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶實現(xiàn)了大量大環(huán)CD的合成,通過反相色譜分離可得到純度大于90%的含有10～12個葡萄糖單元的大環(huán)CD,并將其作為手性選擇劑用于氟伐他汀、氟甲喹羥哌啶、卡維地洛和伯氨喹4種手性藥物的CE分離。結(jié)果表明,含有10個和11個葡萄糖單元的CD具有更好的分離效果。Cucinotta等[11]合成了一種新的賴氨酸-橋連的半球CD,利用賴氨酸殘基將海藻糖加帽單元部分橋接至CD腔中,產(chǎn)生兩個帶有胺氮原子長鏈的受體,其電荷可以根據(jù)溶液pH值的變化輕松調(diào)節(jié)。將該賴氨酸-橋連的半球CD作為手性選擇劑用于CE中,可成功分離5種手性藥物分子。Patel等[12]以季銨-β-CD為手性選擇劑,在堆積手性CE模式下,采用激光誘導熒光檢測器增加檢測的靈敏度,相比于正常CZE模式,該方法可將檢測靈敏度提高480倍,成功用于單細胞中D-天冬氨酸和D-谷氨酸的檢測。

為了提高分離效果,越來越多的研究利用含有CD的雙選擇體系來提高手性分離效果。Papp等[13]以磺丁基-醚-β-CD和γ-CD組成的雙CD體系為手性選擇劑,在CE中手性分離了蘭索拉唑和雷貝拉唑兩種質(zhì)子泵抑制劑。Mu等[14]將共晶溶劑(DESs)作為添加劑加入到CD分離體系中,發(fā)現(xiàn)DESs的加入可將手性藥物佐匹克隆、沙丁胺醇和氨氯地平的分離度提高3.0～4.2倍。Svecova等[15]在CE分離西替利嗪手性藥物的過程中加入了D-葡萄糖,D-葡萄糖與硼砂形成的復合物可與磺化-β-CD形成雙選擇體系,從而將磺化-β-CD的用量減少15倍。Du課題組[16]首次建立了硫酸軟骨素D/羧甲基-β-CD(CSD/CM-β-CD)雙體系,將其加入CE背景緩沖液中,成功分離了6對堿性手性藥物。分子對接研究表明,在CSD/CM-β-CD體系中R/S對映體與手性選擇劑形成復合物的結(jié)合能差異以及氫鍵相互作用明顯大于單CM-β-CD體系,CSD與CM-β-CD的協(xié)同作用提高了分離效果。Hu等[17]制備了β-CD的銅復合物(β-CDCu2),并將其作為手性添加劑實現(xiàn)了11對β-阻斷劑的分離,分離效果優(yōu)于單獨使用β-CD。Men等[18]以γ-CD和Cu2+-D-苯丙氨酸組成的雙體系為手性選擇劑分離了西他沙星,在最優(yōu)條件下,該方法可測定含量低至0.1%的西他沙星立體異構(gòu)體雜質(zhì)。

1.2 手性離子液體手性選擇劑

離子液體是由正負離子組成的、在室溫下呈液態(tài)的有機鹽,具有電導率高、熱穩(wěn)定性好、不易揮發(fā)、易與水和有機溶劑混溶等優(yōu)點。通過改變陰離子和陽離子的組合形式,可設計合成多種特定功能的離子液體。近幾年,手性離子液體越來越多地應用于CE手性分離中,既可以作為手性選擇劑單獨用于CE手性分離,也可與其他多種類型的手性選擇劑形成協(xié)同體系用于CE手性分離。

Du課題組[19]合成了四甲基銨-克林霉素磷酸離子液體，并用于CE中8對手性藥物的分離,這是首次將抗生素類離子液體單獨作為手性選擇劑用于CE手性分離中。Sedghamiz等[20]利用雜化M06-2X密度泛函理論分析了普萘洛爾對映體與1-丁基-3-甲基咪唑(T-4)-雙[(αS)-α-(羥基-O)苯乙酸根合-κO]硼酸鹽離子液體形成復合物的電子結(jié)構(gòu)和非共價鍵相互作用,證明了該手性離子液體在CE中的手性識別能力。

將離子液體與傳統(tǒng)手性選擇劑結(jié)合,已成為一種常見且有效的拆分體系。Du課題組[21]合成了3種氨基醇類手性離子液體N,N,N-三甲基-L-纈氨醇-雙(三氟甲烷磺酰)亞胺、N,N-二甲基-L-脯氨醇-雙(三氟甲烷磺酰)亞胺、N,N,N-三甲基-L-苯丙氨醇-雙(三氟甲烷磺酰)亞胺,并與羥丙基-β-CD(HP-β-CD)一同用于CE中,分離了6種手性藥物。結(jié)果表明,與單獨使用HP-β-CD相比,加入氨基醇類離子液體后手性藥物的分離效果顯著提高。Zhang等[22]將6種氨基酸類手性離子液體與分離能力較弱的α-CD結(jié)合用于5種手性藥物的分離,結(jié)果表明氨基酸類手性離子液體/α-CD協(xié)同體系可明顯提高分離效果,其中四甲基銨-L-精氨酸/α-CD協(xié)同體系分離能力最強。Greno等[23]以γ-CD和手性離子液體R-N,N,N-三甲基-2-氨基丁醇-雙(三氯甲烷磺酰)亞胺組成的協(xié)同體系為手性選擇劑,分離了9-芴甲氧羰基氯-高半胱氨酸(FMOC-Hcy)對映體,最優(yōu)條件下分離度可達3.8。核磁表征結(jié)果顯示,FMOC-Hcy的疏水官能團插入γ-CD空腔內(nèi),離子液體也會進入CD的疏水空腔內(nèi)與CD產(chǎn)生相互作用,從而增強分離能力。除了CD類手性選擇劑,手性離子液體還可與抗生素、多糖等組成協(xié)同體系提高手性分離效果。Du課題組[24]利用四甲基銨-乳糖酸離子液體與克林霉素磷酸酯(CP)組成的雙體系在CE中分離7種手性藥物,相比于單獨使用四甲基銨-乳糖酸或CP,四甲基銨-乳糖酸/CP協(xié)同體系的分離效果更好。該課題組還研究了糊精和兩種環(huán)狀離子液體(1-丁基-3-甲基咪唑(T-4)-雙[(2S)-2-(羥基-κO)-3-甲基-丁酸根合-κO]硼酸和1-丁基-3-甲基咪唑(T-4)-雙[(αS)-α-(羥基-κO)-4-甲基-苯乙酸根合-κO]硼酸)組成的雙體系[25],麥芽糊精和兩種氫基酸類手性離子液體(四甲基銨-D-泛酸和四甲基銨-D-奎尼酸)組成的雙體系[26],以及麥芽糊精與氨基酸類離子液四甲基銨-L-精氨酸組成的雙體系[27], 3種體系在CE分離中均表現(xiàn)出優(yōu)異的協(xié)同分離能力。該課題組采用分子對接研究手性識別過程,結(jié)果表明手性離子液體能增強目標物與手性選擇劑之間的氫鍵作用力。加入離子液體后,目標物與手性選擇劑形成復合物的吉布斯自由能減小,結(jié)合更穩(wěn)定,同時R/S-對映體與手性選擇劑的結(jié)合自由能差變大,這些都說明手性離子液體在分離過程中起到關鍵作用。表1總結(jié)了近三年手性離子液體協(xié)同分離體系在CE手性分離中的應用。

1.3 其他手性選擇劑

除了CD及其衍生物以及手性離子液體外,冠醚、抗生素、多糖、手性功能化納米顆粒以及生物分子等在CE手性分離中均有應用。

Hagele等[33]以(+)-18-冠-6-四羧酸為手性選擇劑,采用CE手段在15 min內(nèi)分離了15對新型精神類手性藥物。Lee等[34]以(18-冠-6)-2,3,11,12-四羧酸(18C6H4)為手性選擇劑,建立了CE-MS手性分離17種氨基酸的方法,其中11對氨基酸可實現(xiàn)基線分離,監(jiān)測離子為[氨基酸+18C6H4+H]+。Zhang等[35]和Jang等[36]分別以鏈霉素和強力霉素為手性選擇劑,利用CE手性分離了多種酸性藥物。張雪嬌等[37]采用L-半胱氨酸(L-Cys)對金納米顆粒(GNPs)表面進行修飾得到絡合物L-Cys-GNPs,以該絡合物為手性選擇劑,采用CZE模式對鹽酸異丙腎上腺素進行手性拆分,在7 min內(nèi)分離度達到10.49。Liu等[38]則以鏈霉素修飾的GNPs為手性選擇劑,7 min內(nèi)分離了3種腎上腺素藥物,分離度最大可達7.5。Naghdi等[39]以麥芽糊精為手性選擇劑,在12 min內(nèi)實現(xiàn)了曲馬多和美沙酮的手性分離,并檢測了其在藥片、尿液和血漿中的濃度。Quintana等[40]合成了L-半胱氨酸和N-乙酰-L-半胱氨酸功能化的手性碳硅烷樹枝狀大分子,并將其作為手性選擇劑加入到CE背景緩沖液中用于手性藥物的分離,由于存在多個手性中心,該分子在手性分離丙亞胺時效果與CD相當。Tohala等[41]以DNA寡核苷酸為手性選擇劑在CE中分離了幾種手性分子,同時考察了序列長度、堿基對組成等對分離的影響,為設計有效的DNA手性選擇劑提供了指導。陳麗等[42]以檸檬酸-Zn2+體系為非手性介質(zhì)電泳運行液,采用非接觸式電導檢測器,分離檢測了D,L-異亮氨酸對映體,其分離度可達2.0。

表 1 手性離子液體協(xié)同分離體系Table 1 Chiral ionic liquids synergistic separation systems

α-CD:α-cyclodextrin; HP-β-CD: hydroxypropyl-β-cyclodextrin.

2 毛細管電色譜

CEC是毛細管電泳與液相色譜相結(jié)合形成的一種微分離技術,該技術在手性分離領域發(fā)揮著重要作用。通過在毛細管柱內(nèi)填充或鍵合手性固定相,以電滲流為驅(qū)動力,根據(jù)對映體在手性固定相和流動相之間分配系數(shù)及電泳淌度的不同實現(xiàn)分離。CEC色譜柱是該分離模式的核心,根據(jù)固定相在毛細管內(nèi)的存在機制可分為填充柱、整體柱和開管柱。

2.1 填充柱

CEC填充柱是將色譜填料填充于毛細管內(nèi),并通過燒結(jié)柱塞將固定相保存于柱內(nèi)的一種色譜柱。由于柱塞制備困難、重現(xiàn)性和選擇性差、樣品容量低等原因,填充柱的發(fā)展受到了一定的限制。

Fanali等[43]綜述了多糖類手性固定相制備的填充柱在CEC模式下分離手性對映體的進展。近年來,Fanali課題組以直鏈淀粉修飾的二氧化硅為手性固定相制備了多種填充柱。該組將直鏈淀粉3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯共價結(jié)合于硅膠上,填充于100 μm內(nèi)徑的毛細管內(nèi)制備填充柱,并對比了該填充柱在納升液相色譜、CEC、壓力輔助CEC中的應用[44]。結(jié)果表明,在分離8對手性黃烷酮衍生物時,壓力輔助CEC下施加2.5 kV電壓和1 MPa柱內(nèi)壓力時填充柱的柱效最高,分析時間少于20 min。該課題組[45]以3,5-二甲基苯氨甲?；?CD修飾的氨基功能化球形有序介孔二氧化硅為手性固定相,有效分離了手性黃烷酮及其甲氧基和羥基衍生物。D’Orazio等[46]將直鏈淀粉三(3-氯-5-甲基苯氨基甲酸酯)共價結(jié)合于二氧化硅上并填充于毛細管內(nèi)用于分離中性及弱酸性手性化合物。對比納升液相色譜和CEC兩種微型分離技術的分離結(jié)果,CEC模式下可產(chǎn)生充足的電滲流,分離時間合理,分離效率更高。

2.2 整體柱

CEC整體柱是在毛細管內(nèi)進行原位聚合制備得到的色譜柱。整體柱相比于填充柱,具有通透性好、傳質(zhì)速率快、重現(xiàn)性好等優(yōu)點。

Xu等[47]合成了一種共價有機框架席夫堿網(wǎng)狀物-1(SNW-1),并將其加入到基于纖維素酶(cellulase)的聚(甲基丙烯酸失水甘油酯(GMA)-共-乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA))中形成cellulase@poly(GMA-EDMA-SNW-1)整體柱。該整體柱用于分離8對不同類型的手性藥物時表現(xiàn)出優(yōu)良的對映體分離性能,這不僅得益于SNW-1的高表面積,而且還與SNW-1可提供共軛結(jié)構(gòu)和豐富的氨基從而增加與待分析物之間的相互作用有關。Park課題組[48]以正丁醇鋯為前體,磷酸克林霉素和紅霉素的氨基甲酸酯化衍生物為共前體,通過原位溶膠-凝膠方法制備了手性有機-氧化鋯雜化整體結(jié)構(gòu)。該柱在非水相CEC模式下成功分離了6對酸性藥物。該課題組[49]還制備了克拉霉素-氧化鋯雜化整體柱,該柱可實現(xiàn)10對酸性手性藥物的基線分離。

2.3 開管柱

CEC開管柱是將不同功能和形態(tài)的固定相涂覆或鍵合在毛細管內(nèi)壁上形成的色譜柱。相比于整體柱和填充柱,開管柱不需要柱塞和顆粒填充,從而減少了氣泡生成,也不需精確優(yōu)化聚合物和致孔劑的比例,因此制備簡單,操作方便。但開管柱也具有相比低、柱容量小的缺點,因此研究者通過管壁刻蝕技術、溶膠-凝膠技術、多孔聚合材料涂層技術以及在管壁內(nèi)修飾納米顆粒、石墨烯材料、金屬有機框架材料以及生物材料等方式來增加涂層表面積從而增大相比和柱容量。

Feng等[50]通過可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移聚合反應制備了4種嵌段共聚物,并將其涂敷于毛細管壁制成開管柱。其中共聚物順丁烯二酸-苯乙烯-N-異丁烯酰基-L-組氨酸甲酯涂覆的開管柱效果最好,可與背景緩沖液中的游離配體L-組氨酸形成雙體系,協(xié)同分離7對手性氨基酸。Guo等[51]以CuSO4/H2O2為引發(fā)劑實現(xiàn)了L-多巴在毛細管內(nèi)壁的快速聚合和沉積,通過該方法制備的開管柱性能穩(wěn)定,可實現(xiàn)手性胺類藥物、神經(jīng)遞質(zhì)和氨基酸等多種手性分子的分離。Li課題組[52]進行了有序介孔材料的制備及應用研究,成功合成了鍵合β-CD官能團、粒徑大小分布均勻的球形介孔材料。以亮氨酸、脯氨酸對映體為分離對象,利用該材料進行CEC分離,結(jié)果表明所制備的β-CD修飾的有機-無機雜化材料有效提高了分離方法的選擇性。

Du課題組[53]制備了β-CD和聚甲基丙烯酸縮水甘油酯納米顆粒(PGMA-NPs)修飾的開管柱,主要步驟為先將GMA涂布于毛細管內(nèi)壁形成觸須狀涂層,然后將分散聚合法制備的PGMA-NPs固定在涂層上,最后通過開環(huán)反應將乙二胺-β-CD共價結(jié)合到PGMA-NPs上。該開管柱相比于單層CD-PGMA和CD-GMA柱,在分離心得安、氨氯地平和美托洛爾3種對映體時表現(xiàn)出更為優(yōu)越的性能。該課題組[54]還將β-CD和單-6-脫氧-6-(1-甲基咪唑)-β-CD甲苯磺酸鹽修飾的磁納米顆粒修飾到毛細管壁上,成功分離了6對丹酰氯(Dns)衍生的氨基酸。Zhou等[55]則制備了以巰基-β-CD-聚多巴胺-GNPs為固定相的開管柱,并用于7對手性藥物的分離。Geng等[56]通過靜電相互作用將沸石咪唑骨架材料(ZIF-8)修飾于毛細管內(nèi)壁,以L-谷氨酸為手性配體,實現(xiàn)了D-、L-苯丙氨酸的基線分離。Pan等[57]合成了一種類似DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的均一手性沸石金屬有機框架材料(ZMOF JLU-Liu23),將其作為固定相成功實現(xiàn)了4對手性一元胺神經(jīng)遞質(zhì)的分離。Du課題組[58]通過共價作用將氧化石墨烯固定到毛細管內(nèi)壁,以甲基-β-CD為手性選擇劑,分離了萘普生、華法林和普拉洛芬3種手性藥物,并通過分子對接模擬法研究分離過程。

將生物類大分子作為涂層制備開管柱用于CE手性分離也取得了不錯的效果。Du課題組[59]以磷脂囊泡傳遞體為涂層材料制備了毛細管柱,加入羧甲基-β-CD后可實現(xiàn)3種堿性藥物的分離,相比于未修飾的毛細管柱分離效果更好,說明傳遞體可有效提高手性分離效率。Fu等[60]首次將大腸桿菌作為固定相黏附于毛細管內(nèi)壁,該開管柱可用于CE中分離氧氟沙星對映體。Sun等[61]制備了溶菌酶組裝超分子膜涂布的毛細管柱,該柱手性分離效果較好,穩(wěn)定性能優(yōu)越,連續(xù)使用100次,分離效率沒有明顯下降,證明了基于黏附蛋白質(zhì)超分子膜涂覆方法的可行性。

3 膠束電動毛細管色譜

MEKC作為毛細管電泳的重要分離模式之一,利用其進行手性分離時,被分離的對映體在手性膠束或非手性膠束與手性選擇劑形成的準固定相上進行多次分配,從而達到分離的目的。

Perez-Miguez等[62]以茴二氧基硫酰氯(FLEC)為手性衍生劑,全氟辛酸銨為假固定相,在MEKC模式下6 min內(nèi)分離了硒代蛋氨酸,分離度達到4.4。Morris等[63]探究了基于氨基酸的分子膠束聚(十一烷基-L-亮氨酸-亮氨酸鈉)(poly(SULL))作為手性選擇劑用于CE中手性分離6對手性化合物的機理。分子動力學模擬結(jié)果表明,poly(SULL)含有6個手性位點,分子內(nèi)氫鍵在手性識別過程中起重要作用。Ghiasvand等[64]提出通過膠束和CD堆積作用富集分析物的方法,在該體系中堆積作用發(fā)生于十二烷基硫酸鈉(SDS)和γ-CD交界面,SDS-CD復合物的形成導致包覆于SDS中的分析物釋放,從而起到富集作用,其機理見圖1。通過增加CD的進樣時間,可實現(xiàn)撲爾敏和苯氧酸除草劑的手性分離。Prior等[65]將β-CD作手性選擇劑,SDS作假固定相,成功分離了16對氯甲酸-9-芴基甲酯衍生的蛋白類氨基酸和12對茴二氧基硫酰氯衍生的蛋白類氨基酸,并通過熒光檢測,實現(xiàn)了腦脊液中微量D-氨基酸的高靈敏檢測。Creamer等[66]以γ-CD和牛黃膽酸鈉膠束為背景緩沖液分離了13種5-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯衍生化的中性手性氨基酸,以單獨的γ-CD為手性選擇劑分離了酸性手性氨基酸,利用建立的CE方法可區(qū)分非生物體系來源的氨基酸和生物體系來源的氨基酸。

圖 1 手性膠束電動毛細管電泳模式下膠束-CD堆積機理[64]Fig. 1 Mechanism of micelle to CD stacking in chiral micellar electrokinetic chromatography[64] BGS: background solution(0.5 mol/L phosphoric acid, 0.2 mol/L sodium dodecyl sulfate); MCDS: micelle-to-cyclodextrin stacking; MEKC: micellarelectrokinetic chromatography.

4 結(jié)論與展望

截至目前,CE在手性化合物的分離分析中仍然具有不可替代的作用和應用前景。CD及其衍生物仍是應用最廣泛的手性選擇劑,與此同時,研究人員也在不斷開發(fā)新的手性選擇劑,其中手性離子液體在CZE模式中應用較多,新型手性功能化材料,如GNPs、金屬有機骨架材料以及生物類大分子等在CEC模式下應用較多。此外,越來越多的研究采用分子模擬、核磁等手段對手性分離機理進行探究。未來CE在手性分析方面的研究仍將在以下幾個方面展開:(1)開發(fā)特異性更強的新型手性選擇劑、新型手性材料和生物類大分子等,建立高選擇性的CE手性分離方法;(2)借助量子化學計算等理論手段以及核磁和質(zhì)譜等先進儀器,深入探究手性分離機理,為新型手性分離方法的開發(fā)提供理論支持和指導;(3)擴展CE在食品、藥品、環(huán)境、生命科學等領域的實際應用。