氣相色譜法處理農(nóng)殘檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性的方法

曹天亞 金 鑫 馮正偉 朱小鳳

（1.宿遷市宿豫區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心，江蘇宿遷 223801；2.鹽城市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，江蘇鹽城 224000；3.泗陽(yáng)縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)中心，江蘇泗陽(yáng) 223700）

在利用氣相色譜儀對(duì)蔬菜水果中的有機(jī)磷和有機(jī)氯菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，一些含辛辣性和色素含量過(guò)多的蔬菜果品很容易出現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性的問(wèn)題。究其原因是蔥、蒜、韭菜等辛辣型蔬菜富含蒜氨酸類(lèi)物質(zhì)、色素及其活性酶，在完整的細(xì)胞內(nèi)，酶與底物是分開(kāi)存在的，當(dāng)細(xì)胞被勻漿破損后，酶會(huì)作用于底物，產(chǎn)生丙酮酸氨及包括蒜素在內(nèi)的含硫化合物，產(chǎn)生特殊的氣味。這些硫化物的化學(xué)特性與有機(jī)磷和有機(jī)氯菊酯類(lèi)農(nóng)藥的性質(zhì)極為相似，再加上檢測(cè)過(guò)程不易除去，往往會(huì)干擾農(nóng)藥殘留的檢測(cè)結(jié)果，影響實(shí)驗(yàn)人員對(duì)結(jié)果假陽(yáng)性的研判。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器設(shè)備和試劑耗材儀器設(shè)備：氣相色譜儀（安捷倫7890A，配備FPD和ECD檢測(cè)器）、電子天平（1/100）、高速分散勻漿機(jī)、氮吹儀和其他常規(guī)儀器設(shè)備。試劑耗材：乙腈（色譜純）、正已烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）和FLORISIL小柱等。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法依據(jù)NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法》[1]進(jìn)行。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置標(biāo)準(zhǔn)溶液由農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心提供，單支標(biāo)準(zhǔn)溶液原始濃度均為1000mg/kg，有機(jī)磷類(lèi)上機(jī)標(biāo)液用色譜純丙酮（基質(zhì)溶液）稀釋至0．32mg/kg，有機(jī)氯菊酯類(lèi)上機(jī)標(biāo)液用色譜純正已烷稀釋至0．32mg/kg。

1.4 實(shí)驗(yàn)色譜條件有機(jī)磷類(lèi)色譜條件：安捷倫24CB（30m×0．32mm×0．25 um）的色譜柱，進(jìn)樣口溫度200℃，升溫程序?yàn)?0℃保持1min，然后以30℃/min升到150℃，保持 0．5 min，再以 10℃ /min 升到 270℃，保持 1．5 min檢測(cè)器FPD的溫度為300℃。有機(jī)氯菊酯類(lèi)色譜條件：安捷倫 8CB（30m×0．32mm×0．25 um）的色譜柱，進(jìn)樣口溫度250℃，升溫程序?yàn)?50℃保持1min，然后以10℃/min升到270℃，保持9min，檢測(cè)器ECD的溫度為300℃。

1.5 實(shí)驗(yàn)過(guò)程準(zhǔn)確稱取30．0g試樣放入具塞三角瓶中，準(zhǔn)確加入60．0mL乙腈，高速勻漿1min，濾液收集到裝有5～7g氯化鈉的100mL具塞量管中，收集濾液40～50mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1min，在常溫下靜置20min，使乙腈和水相分層[2-3]。

第一份取10mL提取液，放入100mL燒杯中，將燒杯放在80℃水浴上加熱，蒸發(fā)至近干，用丙酮準(zhǔn)確定容至5 mL，待測(cè)有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥組分殘留。第二份取10mL提取液，放入100mL燒杯中，將燒杯放在80℃水浴上加熱，蒸發(fā)至近干，用FLORISIL小柱凈化，用正己烷準(zhǔn)確定容至5 mL，待測(cè)有機(jī)氯菊酯類(lèi)農(nóng)藥組分殘留。

2 結(jié)果與討論

2.1 查驗(yàn)標(biāo)樣出峰時(shí)間每次建序列進(jìn)樣時(shí)，先跑2～3針標(biāo)樣，然后跑待測(cè)樣品，再跑2～3針標(biāo)樣，對(duì)前后2次標(biāo)樣出峰時(shí)間進(jìn)行記錄。以農(nóng)藥參數(shù)三唑磷為例，最初標(biāo)樣出峰時(shí)間為18．52min，后面標(biāo)樣出峰時(shí)間為18．54min，那么中間跑的待測(cè)樣品中若在18．52～18．54min內(nèi)出峰且峰型、正態(tài)分布等都和標(biāo)樣較為一致，那么大致可以初步判定此物質(zhì)為三唑磷。

2.2 觀察待測(cè)峰型每一種農(nóng)藥組分在氣相色譜儀上顯示特定的峰型。雖然待測(cè)樣品和標(biāo)樣峰保留時(shí)間基本一致，但峰寬、正態(tài)分布、形態(tài)等存在較大差異時(shí)，則可確證該待測(cè)峰為干擾峰。

2.3 改變色譜升溫程序更改有機(jī)磷類(lèi)色譜條件：安捷倫24CB（30m×0．32mm×0．25 um）的色譜柱，進(jìn)樣口溫度200℃，升溫程序?yàn)?0℃保持1min，然后以20℃/min升到150℃，保持0．5 min，再以20℃/min升到270℃，保持1．5 min，檢測(cè)器FPD的溫度為300℃。更改有機(jī)氯菊酯類(lèi)色譜條件：安捷倫 8CB（30m×0．32mm×0．25u m）的色譜柱，進(jìn)樣口溫度250℃，升溫程序?yàn)?50℃保持1min，然后以20℃/min升到270℃，保持9min，檢測(cè)器ECD的溫度為300℃。

通過(guò)更改氣相色譜儀的色譜升溫程序，對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行重新進(jìn)樣檢測(cè)，如在標(biāo)樣峰位置仍有待測(cè)樣品峰出現(xiàn)，則可初步判斷待測(cè)物質(zhì)和標(biāo)樣為同一種農(nóng)藥組分。

2.4 添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在待測(cè)樣品的進(jìn)樣瓶中，直接加入該農(nóng)藥組分的高濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，再次進(jìn)樣，如果待測(cè)樣品峰面積增大，說(shuō)明待測(cè)峰可能是該農(nóng)藥峰；如果在待測(cè)物質(zhì)峰前后又出現(xiàn)一個(gè)峰，說(shuō)明待測(cè)峰不是該農(nóng)藥峰，為雜質(zhì)干擾峰。

2.5 不同極性雙柱定性進(jìn)樣有些樣品基質(zhì)復(fù)雜，它的雜峰正好與標(biāo)液峰的保留時(shí)間一致，通過(guò)上述幾個(gè)方法，還是無(wú)法判斷是否假陽(yáng)性，可以用兩根不同極性的色譜柱（DB17或HP-5）重新進(jìn)樣，如果待測(cè)樣品峰是該農(nóng)藥組分，則會(huì)在兩根柱子的標(biāo)樣位置同時(shí)出峰，這時(shí)可以精準(zhǔn)判斷待測(cè)物質(zhì)為該農(nóng)藥組分。

3 結(jié)語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)查驗(yàn)標(biāo)樣出峰時(shí)間、觀察待測(cè)峰型、改變色譜升溫程序、添加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和進(jìn)行不同極性雙柱定性進(jìn)樣5種方法，可以準(zhǔn)確判定待測(cè)峰是否為雜質(zhì)干擾峰，解決和排除了氣相色譜法在農(nóng)殘檢驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程中的假陽(yáng)性峰問(wèn)題。

用以上方法排除檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性時(shí)還需要注意：標(biāo)準(zhǔn)溶液與待測(cè)樣品進(jìn)樣條件要一樣，比如改變色譜升溫程序時(shí)，要先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)溶液，確定保留時(shí)間后再進(jìn)待測(cè)樣品，這樣更容易進(jìn)行判斷；在更換不同極性色譜柱時(shí)，也要先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)溶液再進(jìn)待測(cè)樣品，因?yàn)橹訕O性不同，標(biāo)準(zhǔn)樣品的出峰時(shí)間和出峰順序也不同；在更換色譜柱時(shí)，要看清楚色譜柱的長(zhǎng)度、內(nèi)徑、膜厚，要在儀器工作站中輸入正確的尺寸信息，這樣氣相色譜儀才能準(zhǔn)確地識(shí)別設(shè)定的柱流量與流速，否則儀器會(huì)報(bào)錯(cuò)出故障。