ANA及ANA譜聯(lián)合檢測(cè)在自身免疫性疾病中的應(yīng)用價(jià)值

文/胡麗梅（梧州市紅十字會(huì)醫(yī)院）

自身免疫性疾?。╝utoimmune disease,AID）是指機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分的免疫耐受減低或破壞，致使自身抗體和致敏淋巴細(xì)胞損傷自身器官組織而引發(fā)的疾病。AID 患者的一個(gè)共同特征為血清中常存在有多種特異性或相關(guān)性自身抗體。因此，自身抗體成為診斷AID 的重要依據(jù)，每種自身免疫性疾病都伴隨有其特征的自身抗體譜?？购丝贵w（ANA）和可提取的核抗原譜（ANA 譜）檢測(cè)至今仍然是臨床自身免疫性疾病診斷應(yīng)用最多的項(xiàng)目，其在自身免疫性疾病的診斷、治療中具有重要臨床意義[1-3]。本文通過對(duì)不同的自身免疫性疾病患者的ANA 和ANA 譜檢測(cè)，旨在探討ANA及ANA 譜聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)AID 診療的臨床應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016 年1 月-2019 年2 月醫(yī)院診治的AID 患者118 例，入選者均經(jīng)臨床確診為自身免疫性疾病患者，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）35 例，干燥綜合征（SS）27 例，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）48 例，系統(tǒng)性硬化癥（PSS）8 例，年 齡13-65 歲，平均（33.9±11.7）歲；選取80 例健康體檢者作為對(duì)照組，年齡25-67 歲，平均（42.8±7.2）歲，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)各組的一般資料無差異，具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

全部受檢者清晨空腹靜脈采血3ml，2小時(shí)內(nèi)離心分離血清，將獲得的血清放置在-18℃冰箱中待測(cè)。ANA 檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫ELISA 法，試劑由德國(guó)歐蒙公司提供，安圖RT-6000 酶標(biāo)分析儀判讀；ANA 譜采用免疫印跡法進(jìn)行檢測(cè)，使用儀器為YHLO Tenfly BlotB 型全自動(dòng)蛋白印跡儀，試劑由YHLO 亞輝龍生物科技公司提供，其生產(chǎn)的ANA 譜試劑可同時(shí)檢測(cè)17 種不同抗原的IgG 類抗體。每批測(cè)定均采用質(zhì)控物作為對(duì)照，相關(guān)操作步驟必須嚴(yán)格根據(jù)有關(guān)操作說明完成，標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控均符合要求,并判定結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS11.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和處理，計(jì)量資料以（±s）表示，比較采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率表示，比較采用x2檢驗(yàn)；以 P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同AID 患者ANN 與ANA 譜檢測(cè)結(jié)果的敏感性

ANA 和ANA 譜檢測(cè)在自身免疫性疾病中的陽(yáng)性率分別為61.86%和56.78%，明顯高于非自身免疫性疾病患者，與正常對(duì)照組相比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。而在各AID 病組中，ANA 陽(yáng)性率在SLE、PSS 比較高,ANA 譜陽(yáng)性率在SLE 中比較高，ANA 和ANAs 檢測(cè)結(jié)果僅在SLE 患者中存在相關(guān)性（P<0.05）,在其他組中不存在相關(guān)性（P>0.05），兩者聯(lián)合檢測(cè)敏感性大大提高。見表1。

2.2 各組自身免疫性疾病患者血清ANA 譜檢測(cè)結(jié)果。

各類自身免疫性疾病出現(xiàn)多種自身抗體陽(yáng)性，SLE 組的dsDNA、Sm、核小體、核糖體P 蛋白、u1-RNP、SS-A/Ro52 抗原的抗體出現(xiàn)陽(yáng)性率較高，與其他各組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；SS 組中的SS-A/Ro60、SSA/Ro52、SS-B 抗原的抗體；PSS 組的抗U1-RNP、抗Scl-70、抗PMScl；RA組的抗U1-RNP與其他各組相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 見表2。

表1 不同AID患者ANN與ANA譜檢測(cè)陽(yáng)性率（%）結(jié)果比較

表2 118例AD患者血清ENA抗體譜檢測(cè)結(jié)果[n(%)]

3 討論

ANA 是一組具有多種細(xì)胞核成分的自身抗體，是抗核抗酸和核蛋白抗體的總稱，ANA 可與不同來源的細(xì)胞核起反應(yīng)，因此其器官和種屬特異性不高，對(duì)多種自身免疫性疾病均可出現(xiàn)陽(yáng)性[4]。ANA 譜是可提取性核抗原抗體的總稱，主要包括有17 種自身抗體，本實(shí)驗(yàn)通過118 例AD 患者和80 例健康體檢者ANA 及ANA 譜檢測(cè)，研究結(jié)果顯示SLE、SS、RA、PSS 組中都有ANA、ANA 譜檢出，ANA 的陽(yáng)性率為61.86%，ANAs 陽(yáng)性率為56.78%，聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率為66.10%，與對(duì)照組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,對(duì)于自身免疫性疾病,ANA 的敏感度較高，ANA 在SLE組中的檢出率最高，達(dá)91.43%，其次為SS:81.48%,PSS62.5%,在RA 中也有31.25%的陽(yáng)性率。與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但特異度比較差，其不能作為某種AID 的特異性診斷指標(biāo)，但可起到篩查的作用，一般作為篩查實(shí)驗(yàn)。ANA 譜陽(yáng)性率低于ANA ,但疾病特異度相對(duì)較好，對(duì)于AID 鑒別病種有重要意義[5]。從表2中可看出抗dsDNA、抗Sm 對(duì)SLE 的陽(yáng)性率為85.7%和88.6%，敏感性明顯高于其他疾病組，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。此外，SLE在核小體、組蛋白、核糖體P 蛋白抗原的抗體的檢測(cè)特異性也很高，有研究報(bào)道，抗核小體抗體對(duì)SLE 診斷的敏感性和特異性較高，其與狼瘡腎炎損害有很強(qiáng)的相關(guān)性，是SLE 診斷的標(biāo)志性抗體之一，本次研究結(jié)果顯示，抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗-PO 也可能成為SLE 診斷的標(biāo)志性抗體，對(duì)臨床診斷SLE 有重要意義。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）是一種經(jīng)典的常見的AID,發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，在RA 組中以抗SSA、抗Ro52、抗SSB、抗CNEP B、抗核小體抗體檢出率較高，本研究結(jié)果顯示，對(duì)RA 患者進(jìn)行ANA 及ANA 譜的檢測(cè)，無敏感性和特異性指標(biāo)，RA 的診斷目前主要依賴于RA 的臨床癥狀，ANA、ANA 譜作為類風(fēng)濕性疾病的篩查項(xiàng)目，聯(lián)合其他自身抗體RF、AKA、抗CCP、抗Sa、抗RA33、抗MCV 進(jìn)行檢測(cè)，可大大提高RA的正確確診率[6]。

綜上所述，自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，臨床表現(xiàn)多樣化，ANA 及ANA 譜等自身抗體對(duì)其有較高的敏感度和特異度，對(duì)AID 患者進(jìn)行ANA 和ANA 譜聯(lián)合檢測(cè)，具有結(jié)果互相彌補(bǔ)，提高患者檢出率及準(zhǔn)確性的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)，根據(jù)ANA 譜的不同譜型，更有利于AID 病種的分型、治療、預(yù)后判斷，有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值，值得廣大臨床醫(yī)師運(yùn)用推廣。