硫化氫供體偶聯(lián)4-苯胺基喹唑啉衍生物EGFR 抑制劑的設(shè)計(jì)、合成及生物活性評(píng)價(jià)

癌癥近年來(lái)已成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命健康的主要?dú)⑹种弧?jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)數(shù)據(jù)顯示：2018年新增癌癥患者1810萬(wàn)例，死亡955.5萬(wàn)例，分別是2012年的1.28倍和1.17倍。根據(jù)相關(guān)資料數(shù)據(jù)顯示：中國(guó)惡性腫瘤的新發(fā)病例和死亡病例分別占全球病例的23.7%和30.2%。表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)的高表達(dá)與異常表達(dá)將會(huì)引起正常細(xì)胞向癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)變，因此EGFR已成為靶向抗癌藥物重要的作用靶點(diǎn)之一。目前，已上市的具有代表性的表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)有：第一代的以吉非替尼(Gefitinib)，第二代的阿法替尼(Afatinib)以及第三代的奧希替尼(Osimertinib， AZD9291)。 EGFR-TKI的問(wèn)世無(wú)疑給癌癥患者帶來(lái)了康復(fù)的曙光，但是隨著服用時(shí)間的增長(zhǎng)，每種EGFR-TKI藥物均會(huì)出現(xiàn)獲得性耐藥的問(wèn)題。

近期，徐州醫(yī)科大學(xué)劉毅教授課題組與美國(guó)堪薩斯大學(xué)合作，該課題組在以往對(duì)4-苯胺基喹唑啉衍生物研究的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)并合成了兩個(gè)系列含有硫化氫供體的4-苯胺基喹唑啉類(lèi)衍生物9a～9h(喹唑啉母核的7-位含有H2S供體)和15a～15f(喹唑啉母核的6-位含有H2S供體)。在所合成的目標(biāo)化合物中，化合物9h對(duì)TEL-EGFR-L858R-BaF3的抑制活性最好，與陽(yáng)性對(duì)照藥AZD9291處于同一水平；特別是化合物9h對(duì)正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的細(xì)胞毒性要遠(yuǎn)小于AZD9291。

用激酶法測(cè)定化合物的抑制活性發(fā)現(xiàn)，化合物9h對(duì)BaF3、 TEL-EGFR-BaF3、 TEL-EGFR-C979S-BaF3、 TEL-EGFR-T790M-L858R-BaF3的GI50值分別為：>10 μM、 >10 μM、 0.0069 μM、 6.03 μM；值得一提的是，化合物9h對(duì)TEL-EGFR-L858R-BaF3抑制活性(GI50=0.008 μM)與陽(yáng)性對(duì)照藥AZD9291((GI50<0.003 μM)為同一數(shù)量級(jí)。體外抗增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化合物9h對(duì)A549(EGFR攜帶)和H3255(EGFR-L858R突變)兩種細(xì)胞系(GI50值分別為：>10 μM和0.7873 μM，同時(shí)對(duì)L858R突變的細(xì)胞系表現(xiàn)出良好的抑制活性。在研究化合物9h的細(xì)胞毒作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，其對(duì)正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的IC50值大于10 μM，而陽(yáng)性對(duì)照藥AZD9291的IC50值為7.278 μM，這說(shuō)明9h較AZD9291對(duì)人體更為安全。在細(xì)胞水平上發(fā)現(xiàn)9h依賴(lài)于劑量來(lái)抑制H3255 細(xì)胞中EGFR的磷酸化，其主要阻滯細(xì)胞增值的G0-G1期。該課題組使用自制的硫化氫探針(NIR-HS)對(duì)化合物硫化氫的釋放進(jìn)行評(píng)價(jià)，化合物9h釋放H2S的數(shù)量及速度均優(yōu)于其它化合物。因此，化合物9h作為拮抗EGFR-L858R陽(yáng)性突變的潛在候選化合物具有進(jìn)一步探索和研究的價(jià)值。

編委簡(jiǎn)介：

蔡志強(qiáng)(1980-)，男，漢族，遼寧阜新人，博士，副教授，主要從事新藥研究與開(kāi)發(fā)，參與國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目1項(xiàng)，主持遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目1項(xiàng)，遼寧省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目2項(xiàng)，沈陽(yáng)市科技局項(xiàng)目1項(xiàng)。曾獲第二屆“最美青年科技工作者”國(guó)家級(jí)候選人、“第八屆遼陽(yáng)青年五四獎(jiǎng)?wù)隆薄ⅰ案沸陆艹隹萍脊ぷ髡摺钡葮s譽(yù)稱(chēng)號(hào)。