河南省遂平縣奶牛乳房炎致病菌感染情況調(diào)查與藥敏試驗分析

文/張 菊

（遂平縣獸藥監(jiān)察所）

奶牛乳房炎是奶牛乳腺組織的炎癥，在奶牛養(yǎng)殖過程中較為常見，其具有發(fā)病因素復(fù)雜、發(fā)病率高且治療成本大等特點，給全世界奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。奶牛乳房炎可導(dǎo)致奶牛泌乳性能下降，且生鮮乳質(zhì)量較差。此外，由于大部分患有乳房炎的奶牛乳汁中含有致病菌，而部分種類細(xì)菌可導(dǎo)致人畜共患病，對奶牛養(yǎng)殖人員和消費者健康威脅巨大[1，2]。目前對于奶牛乳房炎的治療主要依賴于抗生素的大量使用，抗生素的濫用也導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生，以及藥物殘留問題?；诖?，本次調(diào)查采集遂平縣部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)患有乳房炎的奶牛乳汁樣品，對其主要致病菌進行分離與鑒定，同時通過藥敏試驗分析細(xì)菌對抗生素的耐藥情況，為該地區(qū)奶牛乳房炎的臨床獸藥使用以及防控提供指導(dǎo)依據(jù)。

表1 被檢樣品中細(xì)菌種類及所占比例情況

1 材料與方法

1.1 樣品采集

本次調(diào)查于2019年7—10月采集遂平縣部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)6 個奶牛場的乳汁樣品73 份，采樣前對奶牛乳區(qū)進行清洗和消毒處理，棄掉前3把奶；隨后采集約5 mL生鮮乳樣置于無菌奶樣管中，于4 ℃保存，待檢。

1.2 奶牛乳房炎判斷標(biāo)準(zhǔn)

臨床型乳房炎的判斷標(biāo)準(zhǔn)為奶牛表現(xiàn)出乳房發(fā)熱、腫脹、變硬、疼痛癥狀；隱性乳房炎的判斷標(biāo)準(zhǔn)為計算生鮮乳中的體細(xì)胞數(shù)，按照國際乳業(yè)聯(lián)合會（IDF）的相關(guān)規(guī)定，根據(jù)體細(xì)胞數(shù)對被檢奶牛進行結(jié)果判定[3]。

1.3 細(xì)菌分離與鑒定

用滅菌棉拭子蘸取少量乳樣，均勻涂抹于培養(yǎng)基表面，將其放置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～20 h，挑取單一菌落進行革蘭氏染色，對分離的菌株進行形態(tài)學(xué)鑒定。

1.4 細(xì)菌藥敏試驗

將分離的菌株進行適度稀釋，均勻涂布于固體培養(yǎng)基表面。待菌液干燥，在培養(yǎng)基表面分別貼4 種藥敏紙片，于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)16～24 h，測量抑菌圈，按照藥敏試驗標(biāo)準(zhǔn)對測量結(jié)果進行分析[4]。

2 結(jié)果

2.1 被檢樣品中細(xì)菌分離情況

本次調(diào)查對遂平縣73 份患有乳房炎奶牛乳樣中的病原菌進行分離與鑒定。結(jié)果顯示，73 份被檢樣品中有51 份檢測為細(xì)菌感染，感染率為69.86%（51/73）；共分離得到96 種菌株，其中金黃色葡萄球菌、乳房鏈球菌、棒狀桿菌和大腸桿菌菌株分別為37、29、17和13 株，所占比例分別為38.54%、30.21%、17.71%和13.54%（表1）。由此可見，細(xì)菌病是導(dǎo)致該地區(qū)奶牛乳房炎的主要致病因素，其中金黃色葡萄球菌和乳房鏈球菌為優(yōu)勢菌株。

2.2 病原菌感染情況

在被檢樣品中，病原菌單獨感染份數(shù)為23 份，所占比例為45.10%（23/51），其中金黃色葡萄球菌、乳房鏈球菌、棒狀桿菌和大腸桿菌單獨感染所占比例分別為19.61%、15.69%、5.88%和3.92%；病原菌多重感染所占比例較高，為54.90%（28/51），其中2重感染、3重感染和4重感染所占比例分別為31.37%、13.73%和9.80%，詳見表2。

2.3 藥敏試驗結(jié)果

本次調(diào)查僅對金黃色葡萄球菌和乳房鏈球菌進行藥物敏感性試驗，分別隨機挑選18 株金黃色葡萄球菌和15 株乳房鏈球菌菌株進行試驗，根據(jù)抑菌圈大小判定病原菌對藥物的耐藥程度，抑菌圈直徑≥25 mm，為高敏，25 mm＜抑菌圈直徑≤17 mm，為中敏，17 mm＜抑菌圈直徑≤0，為耐藥。結(jié)果如表3所示。試驗顯示，這2 種細(xì)菌對環(huán)丙沙星和恩諾沙星高度敏感，對青霉素和氨芐西林高度耐藥，對其他抗生素存在不同程度的耐藥。

3 討論

河南省遂平縣奶牛養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達，但奶牛乳房炎一直是困擾當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的障礙之一。奶牛乳房炎致病因素較為復(fù)雜，其中病原菌感染是重要因素[2]。本次調(diào)查旨在了解遂平縣奶牛乳房炎致病菌種類和感染情況，共檢測患有乳房炎奶牛乳樣73 份，其中有51 份檢測含有致病菌，檢出率為69.86%；共分離出96 株菌，其中金黃色葡萄球菌和乳房鏈球菌所占比例較高，與湖南[2]、吉林[5]、鄭州[6]等地區(qū)研究結(jié)果一致。多數(shù)樣品同時感染2種或以上致病菌，說明其混合感染情況十分嚴(yán)重，因此，提高養(yǎng)殖場飼養(yǎng)管理水平是降低奶牛乳房炎流行情況的重要舉措之一。

表2 病原菌感染情況統(tǒng)計結(jié)果

表3 2 種主要病原菌藥敏試驗檢測結(jié)果

進一步進行藥物敏感性試驗結(jié)果表明，從該地區(qū)奶牛場分離的金黃色葡萄球菌和乳房鏈球菌對不同藥物存在一定的耐藥性，其中對青霉素和氨芐西林高度耐藥，這與當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖場（戶）大量濫用或不合理使用此類抗生素有關(guān)；對環(huán)丙沙星和恩諾沙星高度敏感，提示今后奶牛乳房炎的治療可以選擇此類抗生素進行治療，但也可以選擇一些微生態(tài)制劑或中草藥進行治療，減少抗生素的使用。