羊口瘡病毒與支原體肺炎混合感染的診斷與防治

覃廷玉，鄧華成，鮮思美，張?zhí)A，彭曉軍，汪德生，張 明，徐雄真，楊 芳，陳 勇，林華方

(1.貴州省思南縣動物疫病預(yù)防控制中心，貴州 思南 565100；2.貴州大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025；3.貴州綠量農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，貴州 思南 565100)

2018年6月，貴州省某養(yǎng)殖場發(fā)生一起以唇、會陰出現(xiàn)丘疹、膿皰、潰瘍以及結(jié)成疣狀物厚痂為主要特征的傳染性疾病，現(xiàn)將診斷過程和處理方法報告如下。

1 流行病學(xué)調(diào)查

該養(yǎng)羊場地理位置與主要交通干線距離5 000 m；與居民區(qū)距離1 000 m；與最近畜禽群距離1 000 m。采用全放牧+冬季補(bǔ)料。2018年2月末存欄44只,其中母羊30只,羔羊4只,斷奶羊10只，于3月24日開始發(fā)病,初嘴角出現(xiàn)米粒大小白點(diǎn)，次日唇部、鼻部出現(xiàn)水皰，破裂后形成結(jié)痂，羊群呈現(xiàn)食欲減退，2 d內(nèi)全體發(fā)病，進(jìn)而出現(xiàn)咽喉部腫大，吞咽障礙、進(jìn)食困難。部分出現(xiàn)呼吸困難，鼻孔、口腔流出黏液，發(fā)病率高達(dá)100%。死亡6只，其中：哺乳期4只、斷奶期1只、生長育肥期1只。免疫：2017年8月21日對空懷母羊進(jìn)行牛羊O型亞洲Ⅰ型口蹄疫疫苗免疫；2018年3月9日山羊痘活疫苗免疫，尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射0.5 mL；3月18日小反芻獸疫活疫苗免疫，頸部皮下注射1 mL。

2 剖檢病變觀察

對病死羊進(jìn)行剖檢，僅部分羊在胸部出現(xiàn)肺炎變化，胸腔有淡黃色液體，一側(cè)有纖維素性肺炎，肺小葉變寬、界限明顯，腎臟腫大，包膜下有出血點(diǎn)。

3 實驗室診斷

3.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 取病死羊的心、肝、脾、肺、腎分別在鮮血瓊脂平板上劃線，37 ℃培養(yǎng)24 h后觀察。

3.2 羊口瘡病毒(OrfV) 取送檢羊口腔痂皮，充分研磨后，提取其DNA，使用針對OrfV的特異性引物(目的片段1 137 bp)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

3.3 小反芻獸疫病毒(PPRV)病原核酸檢測 取送檢羊肺組織，加入適量的DEPC水充分研磨后，提取其RNA，采用小反芻獸疫病毒核酸檢測試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

3.4 山羊痘病毒(GPV)病原核酸檢測 取送檢羊淋巴結(jié)和肺組織，充分研磨后，提取其DNA，使用針對GPV的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

3.5 支原體病原核酸檢測 取送檢羊淋巴結(jié)和肺組織，充分研磨后，提取其DNA，使用針對支原體病毒的特異性引物(目的片段500 bp)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物通過1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測。

4 結(jié)果

4.1 細(xì)菌分離培養(yǎng) 取病死羊的心、肝、脾、肺、腎分別在鮮血瓊脂平板上劃線，37 ℃培養(yǎng)24 h后觀察，未見細(xì)菌生長。

4.2 羊口瘡病毒(OrfV) 羊口腔痂皮，充分研磨后，提取其DNA，使用針對OrfV的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出特異性目的條帶，片段大小1 137 bp。

4.3 小反芻獸疫病毒(PPRV)病原核酸檢測 取送檢羊肺組織，加入適量的DEPC水充分研磨后，提取其RNA，采用小反芻獸疫病毒核酸檢測試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增，未擴(kuò)增出目的條帶。

4.4 山羊痘病毒(GPV)病原核酸檢測 羊淋巴結(jié)和肺組織，提取其DNA，未擴(kuò)增出針對GPV的特異條帶。

4.5 支原體病原核酸檢測 通過肺組織提取其DNA，使用針對支原體病毒的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出特異性目的條帶，片段大小500 bp。

5 小結(jié)

5.1 根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查、剖檢病變觀察以及實驗室診斷，造成本次疫病發(fā)生的主要原因是羊口瘡病毒和支原體混合感染。

5.2 目前預(yù)防該病無疫苗，且無特效藥物，一旦發(fā)生本病應(yīng)立即進(jìn)行隔離，同時注意環(huán)境消毒。對癥治療僅能對發(fā)病羊群進(jìn)行患部沖洗、聚維酮碘噴霧、涂擦百桐膏。咽喉腫大的羊只，咽喉部用云南白藥噴霧劑噴霧，同時注射硫酸慶大霉素、黃芪多糖、魚腥草。蒲公英、紫背天葵、忍冬藤、千里光、魚腥草、黃岺、貝母、杏仁、枇杷葉、甘草、冰糖煎水，作為羊群飲用水。通過近2周對發(fā)病羊進(jìn)行治療與環(huán)境消毒處理，未有新的病例發(fā)生。