低強(qiáng)度UV-A光循環(huán)輻照對(duì)4 ℃下鮮切菠菜品質(zhì)及抗氧化能力的影響

郁杰，張雨宸，謝晶

1(上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院，上海，201306) 2(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部冷庫及制冷設(shè)備質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(上海)，上海，201306)3(上海冷鏈裝備性能與節(jié)能評(píng)價(jià)專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，上海，201306)4(食品科學(xué)與工程國家級(jí)試驗(yàn)教學(xué)示范中心(上海海洋大學(xué))，上海，201306)

菠菜(SpinaciaoleraceaL.)又名波斯菜、赤根菜、鸚鵡菜等，屬藜科菠菜屬，一年生草本植物，原產(chǎn)于伊朗，外觀呈墨綠色，葉片厚實(shí)且大小適中，葉片和莖為主要食用部分，富含維生素A、維生素C以及鐵元素等微量元素，深受國內(nèi)外消費(fèi)者青睞，在我國，人們常將其鮮切后置于4 ℃下售賣[1]，但由于菠菜葉片面積大氣孔分布廣，極易受到腐敗菌侵染，一旦微生物進(jìn)入氣孔內(nèi)部，很難被清除[2]，同時(shí)鮮切后的菠菜發(fā)生汁液流失、愈傷呼吸劇烈(healing respiration)[3]，這一系列反應(yīng)加劇了鮮切菠菜相關(guān)代謝酶的降解進(jìn)程以及微生物對(duì)其的侵染，同未經(jīng)加工的菠菜相比，鮮切菠菜的貯運(yùn)時(shí)間更短，因此在順應(yīng)消費(fèi)者對(duì)鮮切菠菜的需求下，應(yīng)著重維持鮮切菠菜貨架期內(nèi)的品質(zhì)，探尋適宜的保鮮方式。

紫外線(ultraviolet, UV)是指波長(zhǎng)10～400 nm輻射的總稱，根據(jù)波長(zhǎng)不同，可分為長(zhǎng)波紫外線UV-A(320～400 nm)、中波紫外線UV-B(280～320 nm)和短波紫外線UV-C(200～280 nm)，其中UV-A約占太陽總輻射的6%，是紫外輻射中危害最小的部分[4]，UV-A輻射對(duì)采后作物基因的表達(dá)、酶、活性氧代謝等生理反應(yīng)均有不同程度的影響，而植物本身也會(huì)觸發(fā)一系列抗逆反應(yīng)來中和輻照的影響，如：黃酮類化合物、羥基肉桂酸及抗壞血酸等抗氧化物的合成[5]，還有文獻(xiàn)指出，通過UV-A照射，光粒子可與細(xì)胞中水分子相互作用產(chǎn)生自由基[6]，而鮮切菠菜組織內(nèi)水分含量高達(dá)92%，因此該效應(yīng)在植物中十分明顯，植物細(xì)胞可對(duì)這些活性氧產(chǎn)生強(qiáng)烈的反應(yīng)增強(qiáng)抗逆進(jìn)程提高品質(zhì)。同時(shí)，輻照處理具有綠色環(huán)保、無副產(chǎn)物的優(yōu)勢(shì)，且應(yīng)用成本低、操作可行性高，近年來已經(jīng)廣泛應(yīng)用于上海青[7]、牛角椒[8]、蘋果[9]等果蔬中。

本試驗(yàn)首先確定UV-A處理鮮切菠菜的最佳光照總量，隨后通過不同的照射方式處理鮮切菠菜，結(jié)合腐敗菌數(shù)量、水分變化、超氧化物歧化酶等抗氧化指標(biāo)，綜合探討UV-A對(duì)鮮切菠菜的保鮮效果，為延長(zhǎng)鮮切菠菜的貨架期提供新思路。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)試劑

NaCl、丙酮、碳酸鈣粉、石英砂、KI，(AR級(jí))國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；總超氧化物歧化酶(T-SOD)測(cè)試盒、抗壞血酸(Vitamin C)測(cè)定試劑盒、過氧化物酶(POD)測(cè)定試劑盒(測(cè)植物)、抗壞血酸過氧化物酶(APX)測(cè)試盒，南京建成生物科技有限公司；三氯乙酸(AR級(jí))，上海生工生物工程有限公司；I2(AR級(jí))，上海阿拉丁生化科技股份有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

H-2050R-1型高速冷凍離心機(jī)，長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)有限公司；HVE-50高溫高壓滅菌鍋，日本Hi-rayama制造有限公司；VS-1300L-U超凈工作臺(tái)，上?？蹈Ｌ丨h(huán)境科技有限公司；BCD-447W冰箱，博西華家用電器有限公司；E200三目生物顯微鏡，尼康儀器(上海)有限公司；D30D微型計(jì)算機(jī)，戴爾公司；WYT-32型手持式折光儀，泉州光學(xué)儀器廠；WFZ UV-2100型紫外可見分光光度計(jì)，上海尤尼柯儀器有限公司；植物紫外線UV輔助補(bǔ)光燈390 nm(9 W/0.6 m)：T8(波長(zhǎng)范圍：374～406 nm，峰值：390 nm)，山東貴翔光電有限公司；ST-513光強(qiáng)測(cè)定儀，先馳光電股份有限公司；高光防霧膜(PVC材質(zhì)，食品級(jí)，膜厚度11 μm)，良維(廈門)吸塑包裝有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 菠菜鮮切處理及分組

菠菜：要求當(dāng)天采摘、大小均一、色澤鮮綠、清潔、無明顯缺陷、無病蟲毒害。菠菜為大棚種植，有刺種，于3月份采摘，采摘時(shí)溫度約15 ℃，濕度約為80%，采摘后20 min內(nèi)由農(nóng)戶直接送至試驗(yàn)室。

將樣品用自來水沖洗，除去表面泥污，且至洗滌后的廢水仍為澄清代表清洗完成，待其晾干后用已滅菌的不銹鋼菜刀距菠菜葉片莖部約4 cm處鮮切。初篩組隨機(jī)分為6大組，每大組分為18個(gè)小組；試驗(yàn)組將菠菜隨機(jī)分為4大組，每大組分為8個(gè)小組。以上每個(gè)小組分裝70 g/盒，包裝材料為高透光防霧膜。

1.2.2 光參數(shù)的確定

使用光強(qiáng)測(cè)定儀測(cè)定。燈下垂直30 cm處透過防霧膜的輻照度4.2 W/m2，峰值波長(zhǎng)398 nm，半波寬16.8 nm，主波長(zhǎng)436.64 nm，色純度97.9%，光子通量密度10.12 μmol/(m2·s)。

1.3.3 UV-A光照方式及環(huán)境變量

各試驗(yàn)組的光照方式見表1，以飽和KCl鹽溶液控制濕度，使樣品在4 ℃，85% RH的環(huán)境下貯藏。單日光照總量的設(shè)定通過初篩試驗(yàn)組根據(jù)鮮切菠菜的貨架期篩選得出，分別為360、420、600、720、900 s。

1.4 指標(biāo)測(cè)定

1.4.1 革蘭氏陰性菌的計(jì)數(shù)

參考KOUKOUNARAS等[10]的方法計(jì)數(shù)。

1.4.2 假單胞菌的計(jì)數(shù)

參考郁杰等[11]的方法計(jì)數(shù)。

1.4.3 水分變化

各個(gè)樣品取樣位置要求一致，并按照4.0 cm×3.0 cm的尺寸剪切成長(zhǎng)方形，參照楊沖等[12]的試驗(yàn)方法進(jìn)行低場(chǎng)核磁共振(low-field nuclear magnetic resonance， LF-NMR)T2譜的測(cè)定。

1.4.4 氣孔情況

參考樓柏丹等[13]的方法并稍作改進(jìn)，步驟如下：選取直接撕取表皮法，固定葉片后用無菌手術(shù)刀輕劃一下葉片表面，用鑷子掀開葉片的表皮，使用軟刷刷去葉肉細(xì)胞，后用鑷子將表皮完全取下，乙醇脫色后放在載玻片中央使用1% I2-KI溶液染色90 s，蓋上蓋玻片，鏡檢觀察，選擇目鏡10×，物鏡10×，放大100倍觀察氣孔情況。

1.4.5 可溶性固形物

將樣品充分研磨后，在4 000 r/min的條件下離心10 min，取上清液滴加至檢測(cè)鏡上，合上蓋板防止產(chǎn)生氣泡，水平對(duì)準(zhǔn)光源準(zhǔn)確讀取刻度尺讀數(shù)，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)表示，重復(fù)3次。

1.4.6 葉綠素含量

參照NY/T 3082—2017[14]標(biāo)準(zhǔn)，按照公式(1)計(jì)算總?cè)~綠素的含量，使用分光光度法測(cè)定總?cè)~綠素、葉綠素a、葉綠素b的含量，并計(jì)算脫鎂葉綠素、類胡蘿卜素的含量。

(1)

式中：G，1 g樣品中葉綠素的含量，mg/g；A645，在645 nm處測(cè)得的提取液吸光度；A663，在663 nm處測(cè)得的提取液吸光度；VT，提取液的總體積，mL；n，提取液稀釋倍數(shù)；FW，鮮切菠菜鮮質(zhì)量，g。

1.4.7 Vc含量

參照果蔬采后生理生化試驗(yàn)指導(dǎo)[15]中2，6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定抗壞血酸的含量。

1.4.8 APX活性

參照徐冬穎等[16]的方法，方法如下，(1)上清液的制備：取1 g樣品葉片放入9 mL冰冷的磷酸鹽緩沖液中，用勻漿機(jī)以10 000～15 000 r/min在冰浴的條件下上下研磨制成100 g/L的勻漿液，在5 000×g的條件下離心10 min，取上清。(2)反應(yīng)體系為3 mL，在測(cè)定管中依次加入含有0.1 mmol/L EDTA和0.5 mmol/L抗壞血酸的反應(yīng)緩沖液2.6 mL和待測(cè)樣品的上清液0.1 mL，最后加入2 mmol/L H2O2溶液0.3 mL啟動(dòng)酶促反應(yīng)，立即混勻并開始計(jì)時(shí)，在反應(yīng)15 s時(shí)開始記錄反應(yīng)體系在波長(zhǎng)290 nm處吸光度，將其作為初始值OD290I，每隔30 s記錄1次記為OD290F，連續(xù)測(cè)定取得至少6個(gè)點(diǎn)的數(shù)據(jù)后，根據(jù)公式(2)計(jì)算每分鐘吸光度的變化值ΔOD290，重復(fù)3次后取平均值，如公式(3)所示計(jì)算酶活性。

(2)

式中：ΔOD290，每分鐘反應(yīng)混合液吸光度變化值；OD290F，反應(yīng)混合液吸光度終止值；OD290I，反應(yīng)混合液吸光度初始值；tF，反應(yīng)終止時(shí)間，min；tI，反應(yīng)初始時(shí)間，min。

(3)

式中：APX活性，1 g樣品中APX的含量，U/g；ΔOD290，每分鐘反應(yīng)混合液吸光度變化值；V，樣品提取液總體積，mL；VS，測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積，mL；m，樣品質(zhì)量，g。

1.4.9 SOD活性

參照T-SOD測(cè)試盒中的羥胺法，方法如下，(1)上清液的制備：取1g樣品葉片放入9 mL冰冷的磷酸鹽緩沖液中，在冰浴的條件下用勻漿機(jī)以10 000～15 000 r/min上下研磨制成100 g/L的勻漿液，在5 000×g的條件下離心10 min，取上清。(2)反應(yīng)體系為4.3 mL，在測(cè)定管中分別加入75 mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH 7.8)1 mL、待測(cè)樣品的上清液1 mL、0.1 mol/L鹽酸羥胺溶液0.1 mL、75 mmol/L黃嘌呤溶液0.1 mL和0.037 U/L黃嘌呤氧化酶0.1 mL，用旋渦混勻器充分混勻，對(duì)照管以1 mL蒸餾水代替，置37 ℃恒溫水浴30 min后取出，加入顯色劑2 mL混勻，室溫放置10 min，于波長(zhǎng)550 nm處蒸餾水調(diào)零并比色，重復(fù)3次，參照公式(4)計(jì)算酶活性。

(4)

式中：SOD活性，1 g樣品中SOD的含量，U/g。

1.4.10 POD活性

參照胡瑞斌等[17]的方法，方法如下,(1)上清液的制備：取1g樣品葉片放入9 mL冰冷的磷酸鹽緩沖液中，用勻漿機(jī)以10 000～15 000 r/min在冰浴的條件下上下研磨制成100 g/L的勻漿液，在5 000×g的條件下離心10 min，取上清。(2)反應(yīng)體系為3.7 mL，在測(cè)試管中分別加入3.0 mL 25 mmol/L愈創(chuàng)木酚溶液和0.5 mL待測(cè)樣品上清液，再加入200 mL 0.5 mol/L H2O2溶液迅速混合啟動(dòng)反應(yīng)，同時(shí)開始計(jì)時(shí)。將混合液倒入比色皿中，以蒸餾水為參比，在反應(yīng)15 s時(shí)開始記錄反應(yīng)體系在波長(zhǎng)470 nm處吸光度，將其作為初始值OD470I，后每隔1 min記錄1次記為OD470F，連續(xù)測(cè)定取得至少6個(gè)點(diǎn)的數(shù)據(jù)后，根據(jù)公式(5)計(jì)算每分鐘吸光度的變化值ΔOD470，重復(fù)3次后取平均值，見公式(6)計(jì)算酶活性。

(5)

式中：ΔOD470，每分鐘反應(yīng)混合液變化值；OD470F，反應(yīng)混合液吸光度終止值；OD470I，反應(yīng)混合液吸光度初始值；tF，反應(yīng)終止時(shí)間，min；tI，反應(yīng)初始時(shí)間，min。

(6)

式中：POD活性，1 g樣品中POD的含量，U/g；ΔOD470，每分鐘反應(yīng)混合液變化值；V，樣品提取液總體積，mL；VS，測(cè)定時(shí)所取樣品提取液體積，mL；m，樣品質(zhì)量，g。

1.4.11 數(shù)據(jù)處理及分析

本試驗(yàn)重復(fù)3次，各指標(biāo)每次測(cè)定設(shè)3次平行，取平均值用origin 2018軟件繪圖，并使用IBM SPSS Statistics 24對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行ANVOA方差顯著性分析(P<0.05代表存在顯著差異、P<0.01代表差異極顯著)。

2 結(jié)果與分析

2.1 單日UV-A光照總量的篩選

在BERNADETH等[18]的研究中可知，愈傷后的高等植物細(xì)胞受到外源輻照的刺激后，會(huì)激活不同的防御機(jī)制，以此中和輻照帶來的損傷，輻照時(shí)間越長(zhǎng)，機(jī)體的抗逆進(jìn)程越強(qiáng)烈。因此本試驗(yàn)首先根據(jù)貨架期篩選最佳輻照劑量，如圖1所示，以間隔24 h、單日持續(xù)光照總量在420 s的輻照條件下，鮮切菠菜的貨架期可延長(zhǎng)至10 d為最高，故根據(jù)初篩試驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)試驗(yàn)組，如表1所示。

圖1 不同光照總量的UV-A光對(duì)鮮切菠菜貨架期的影響Fig.1 Effects of different irradiation time of UV-A onshelf life of fresh-cut spinach

表1 不同光照頻率的UV-A光處理鮮切菠菜的分組情況Table 1 Groups of fresh-cut spinach treated withdifferent irradiation frequencies of UV-A

2.2 UV-A光照抑菌性能的評(píng)估

已有文獻(xiàn)證實(shí)，在葉類凈菜的貯藏過程中，腐敗菌的增長(zhǎng)與發(fā)酸、軟腐等一系列品質(zhì)劣變有強(qiáng)相關(guān)性，熒光假單胞菌為鮮切菠菜的主要腐敗菌[11]。由圖2可知，各輻照處理組的總菌、假單胞菌的數(shù)量均呈先下降后上升的趨勢(shì)，在前4 d，各輻照處理組總菌含量均顯著低于CK組(P<0.05)，且抑菌性能依次為A組>B組>C組，假單胞菌數(shù)量變化與總菌變化趨勢(shì)類似；到了貯藏末期，各組總菌含量差異不顯著(P>0.05)，但各輻照處理組假單胞菌數(shù)量顯著低于CK組(P<0.05)，輻照組組間差異不明顯(P>0.05)。ANA等[19]的研究指出UV-A的殺菌性能一般，假單胞菌屬受到輻照后會(huì)短暫地失去增殖能力，但仍具備致腐能力，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致：在前2 d，經(jīng)過輻照后的細(xì)菌數(shù)量并未急劇下降，驗(yàn)證了這個(gè)觀點(diǎn)，但之后細(xì)菌數(shù)量呈下降趨勢(shì)，推測(cè)一方面是由于一部分細(xì)菌對(duì)冷藏環(huán)境的不耐受使得數(shù)量變化不明顯[20]，另一方面是經(jīng)UV-A光處理，刺激鮮切菠菜分泌了某些抑菌物質(zhì)，如類黃酮物質(zhì)，間接使得細(xì)菌數(shù)量降低[21]。

2.3 水分變化

鮮切菠菜組織內(nèi)水分約占92%，葉片挺直主要依靠體內(nèi)水分壓力，如果水分流失，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膨壓降低，表觀上可以觀察到葉片萎蔫、皺縮，因此測(cè)定水分變化對(duì)評(píng)價(jià)鮮切菠菜樣品品質(zhì)從而評(píng)判保鮮方式的優(yōu)劣顯得十分重要。采后失水包括水分蒸發(fā)和呼吸消耗2個(gè)方面，其中水分蒸發(fā)引起的損耗是主要方面[16]。本試驗(yàn)通過繪制并反演計(jì)算各個(gè)處理組在不同時(shí)期樣品弛豫時(shí)間T2，得到的T2圖譜可以反映樣品在貯藏前期(0 d)、貯藏中期(6 d)、貯藏末期(12 d)葉片中結(jié)合水(T21：0～2 ms)、不易流動(dòng)水(T22：2～20 ms)、自由水(T23：20～1 000 ms)的遷移情況，峰面積與波峰呈正比關(guān)系，因此可以根據(jù)波峰判斷水分含量[22]。由圖3可得，在0～6 d內(nèi)，CK組、A組、B組結(jié)合水、不易流動(dòng)水含量呈上升趨勢(shì)，C組含量變化不明顯(P>0.05)，可能是因?yàn)橛鷤洼椪諈f(xié)同刺激了鮮切菠菜發(fā)生抗逆反應(yīng)以適應(yīng)環(huán)境[5]，在果蔬中抗逆反應(yīng)主要分為2個(gè)方面：一方面通過減少自由水使得機(jī)體新陳代謝速率下降，另一方面通過增加結(jié)合水含量增強(qiáng)抗逆能力[23]。其次，各組自由水含量呈大幅下降趨勢(shì)，組間差異極顯著(P<0.01)，由高到低依次為A組>B組>C組>CK組，這是因?yàn)椴げ私?jīng)過鮮切及外源輻照的刺激導(dǎo)致作物呼吸旺盛、代謝加快帶動(dòng)機(jī)體更快地蒸騰失水，故貯藏前期失水較快；到了貯藏末期(12 d)，CK組結(jié)合水含量下降，表明細(xì)胞結(jié)構(gòu)已被破壞，代謝崩潰，B組自由水含量為最高，這表明間隔8 h循環(huán)輻照鮮切菠菜更有利于維持水分含量，關(guān)于輻照能夠減緩作物的水分流失，結(jié)合氣孔情況指標(biāo)，猜測(cè)可能是因?yàn)樽魑锸盏捷椪蘸髸簳r(shí)關(guān)閉氣孔進(jìn)而關(guān)閉了蒸騰失水途徑[24]。

a-總菌；b-假單胞菌圖2 貯藏過程中總菌及假單胞菌的變化Fig.2 Changes of total viable counts and pseudomonasduring storage

a-貯藏第0天T2圖譜;b-貯藏第6天T2圖譜;c-貯藏第12天T2圖譜圖3 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜水分變化的影響Fig.3 Effect of different treatments on moisture change of fresh-cut spinach

2.4 氣孔變化

在高等植物中，氣孔具有以下幾點(diǎn)作用：(1)植物的蒸騰失水即通過氣孔的開閉控制機(jī)體水分含量以適應(yīng)外界環(huán)境的變化。(2)采后葉菜仍可短暫地進(jìn)行光合作用，氣孔就是光的接收者，輻照可使葉片氣孔開放，光量子促使光敏色素活躍進(jìn)而參與光合作用以延遲葉綠體衰老進(jìn)程[25]。圖4為鮮切菠菜氣孔放大100倍后觀察到的結(jié)果，如圖4-a所示，在第0天，各試驗(yàn)組葉片氣孔呈開放狀態(tài)，這是因?yàn)橛鷤蟮慕M織呼吸加快，蒸騰作用明顯；如圖4-b所示，到了第6天，CK組氣孔呈閉合狀態(tài)，這是因?yàn)槭艿? ℃低溫的影響，但各試驗(yàn)組呈半開半閉狀態(tài)，這是因?yàn)檩椪沾碳饪状蜷_，進(jìn)而進(jìn)行抗逆反應(yīng)，從總?cè)~綠素、水分變化指標(biāo)可以驗(yàn)證這個(gè)觀點(diǎn)；如圖4-c所示，到了第12天，各組失水嚴(yán)重，所以各組氣孔均閉合，避免失水。

圖4 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜氣孔的影響Fig.4 Effect of different treatments on stoma of fresh-cutspinach注：圖中右下方白色標(biāo)尺代表長(zhǎng)度為20 μm。

2.5 可溶性固形物

在果蔬中可溶性固形物包括糖分、總維生素、半纖維素等營養(yǎng)物質(zhì)，是衡量鮮切菠菜中營養(yǎng)成分的重要指標(biāo)[26]。由圖5可得，各樣品可溶性固形物的含量均隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而降低，這是因?yàn)椴珊笫卟税l(fā)生干耗[27]，在前2 d，各輻照組與CK組差異不明顯，之后，輻照組可溶性固形物含量短暫地增加，且下降趨勢(shì)較為平穩(wěn)，但CK組在6 d后可溶性固形物急劇下降，總的來說，在6 d內(nèi)，A組對(duì)維持可溶性固形物效果最優(yōu)，其次是B、C組；6 d之后，B組下降最慢，其次是C組。出現(xiàn)以上現(xiàn)象可能是因?yàn)檩椪斩虝旱丶涌炝苏崽橇姿岷铣擅?、蔗糖合酶合成方向和光合作用，從而積累了少量的可溶性糖等物質(zhì)[28]，但8 d之后，可溶性固形物不再積累且開始下降，這是因?yàn)楣夂献饔弥邪捣磻?yīng)嚴(yán)格依賴溫度進(jìn)行酶促反應(yīng)[29]，在4 ℃低溫下，暗反應(yīng)無法及時(shí)還原多糖，而作物本身的干耗仍不斷繼續(xù)，繼而導(dǎo)致可溶性糖含量的降低，在12 d，B、C組含量最高，且差異不顯著(P>0.05)，其次為A組，CK組含量最低。

圖5 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜可溶性固形物的影響Fig.5 Effect of different treatments on soluble solidsof fresh-cut spinach

2.6 光合色素含量的變化

葉綠素是含鎂的四吡咯衍生物，當(dāng)鎂離子被氫離子取代后形成脫鎂葉綠素，會(huì)使葉片出現(xiàn)褐變、發(fā)黃等現(xiàn)象[30]，因此結(jié)合脫鎂葉綠素可以動(dòng)態(tài)地評(píng)判葉綠素分子的狀態(tài)。由圖6-a和圖6-b可知，B組和C組在貯藏過程中使葉綠素含量始終保持在較高水平，葉綠素分子結(jié)構(gòu)較為完整，而A組和CK組含量差異變化相似(P>0.05)，呈快速下降趨勢(shì)，這可能是因?yàn)樵谌~綠體內(nèi)膜上，每次閃光生成一個(gè)產(chǎn)物，而這個(gè)產(chǎn)物必須在第2次閃光到來之前被利用掉，若第2次閃光到達(dá)太早，則吸收的能量主要以熱和熒光的形式損失[31]，葉綠素分子會(huì)被激發(fā)成三線態(tài)，但當(dāng)與基態(tài)的氧分子結(jié)合時(shí)，會(huì)較快地將葉綠體分子恢復(fù)到基態(tài)，但同時(shí)氧分子被激發(fā)成單線態(tài)，單線態(tài)氧自由基對(duì)生物體損傷較大故不利于維持品質(zhì)[32]。

類胡蘿卜素作為輔助色素存在于高等植物中，吸收光譜在400～500 nm，主要有以下2點(diǎn)功能：(1)作為光合事件的啟動(dòng)者：將吸收的光能傳遞給葉綠素a從而進(jìn)行后續(xù)的光化學(xué)反應(yīng)。(2)保護(hù)葉綠體細(xì)胞：胡蘿卜素本身可以淬滅單線態(tài)氧自由基，本身可以無傷害地衰變回基態(tài)。由圖6-c可知，CK組含量始終最低，A組由于連續(xù)光照，變化最為劇烈，4 d后迅速下降，B組次之，而C組變化最為緩和，在整個(gè)貯藏期間都保持了較高水平。因此B、C組不僅可較好地維持類胡蘿卜素的含量，還可以維持葉綠素含量。

a-總?cè)~綠素的含量；b-脫鎂葉綠素的含量；c-類胡蘿卜素的含量圖6 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜光合色素的影響Fig.6 Effect of different treatments on photosynthetic pigment of fresh-cut spinach

2.7 Vc含量的變化

對(duì)人體來說，Vc是一種人體無法自身合成但又不可或缺的微量元素，主要從果蔬中攝入。同時(shí)也是一種抗氧化劑以調(diào)節(jié)作物的采后生理代謝，已有文獻(xiàn)指出，在貯藏過程中，采用光輻照技術(shù)處理果蔬，Vc含量均有不同程度上升，如：芹菜[33]、生菜[34]等葉類蔬菜。由圖7可得，CK組呈不斷下降趨勢(shì)，各輻照組前6 d呈遞增趨勢(shì)，之后逐漸下降，值得注意的是：?jiǎn)未屋椪談┝吭酱?，Vc含量下降速率越快，即A組在貯藏末期含量最低，這一結(jié)果同劉超超[35]試驗(yàn)結(jié)果一致。

圖7 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜抗壞血酸的影響Fig.7 Effect of different treatments on Vc of fresh-cutspinach

2.8 抗氧化酶含量的變化

3 結(jié)論

本試驗(yàn)通過初篩試驗(yàn)以貨架期確定最佳光照總量為420 s(1.764 kJ/m2)，在這個(gè)基礎(chǔ)上以不同頻率循環(huán)輻照4 ℃下貯藏的鮮切菠菜，綜合試驗(yàn)結(jié)果表明：貯藏期前6 d，以間隔24 h的輻照頻率處理鮮切菠菜效果最好，可有效控制總菌、假單胞菌的數(shù)量，延緩水分、可溶性固形物的損失，且Vc含量、SOD、APX、POD的活性最高，表明機(jī)體在6 d內(nèi)具有較高的抗逆性能，貨架期達(dá)10 d；但間隔8 h的輻照頻率處理可使鮮切菠菜的貨架期達(dá)12 d，在第12 天仍可維持最高的水分含量、Vc和可溶性固形物含量，使鮮切菠菜在第12 天仍具有商品價(jià)值，而以間隔4 h的輻照頻率處理僅使鮮切菠菜的貨架期達(dá)11 d。因此，可根據(jù)不同的保鮮目的，選擇不同的照射方式，達(dá)到理想的保鮮效果。

a-SOD的含量；b-APX的含量；c-POD的含量圖8 不同處理方式對(duì)鮮切菠菜抗氧化酶的影響Fig.8 Effect of different treatments on antioxidant enzyme of fresh-cut spinach