云南省文山壯族苗族自治州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)現(xiàn)狀調(diào)查

（文山州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，云南文山 663000）

文山壯族苗族自治州（以下稱文山州）地處云南省的東南部，全州8 縣（市）104 個(gè)鄉(xiāng)（鎮(zhèn)），動(dòng)物防疫工作點(diǎn)多面廣，難度較大。2018 年我國非洲豬瘟（ASF）的發(fā)生，暴露了文山州基層動(dòng)物疫病防控能力的薄弱，因此全面了解其獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)現(xiàn)狀及檢測能力水平，針對性地加強(qiáng)8 縣（市）動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)，提高各縣市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室綜合技術(shù)能力，對全州動(dòng)物疫病的預(yù)防與控制具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查對象的基本情況

至2020 年文山州共有8 個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，1 個(gè)州級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室是動(dòng)物疫病控制系統(tǒng)的重要組成部分，承擔(dān)著動(dòng)物疫病的診斷、檢測、監(jiān)測以及流行病學(xué)調(diào)查等重要任務(wù)，是動(dòng)物疫病防控工作中重要的技術(shù)支撐力量。各級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在建設(shè)、運(yùn)行、管理等方面的問題直接或間接地影響著當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病防控工作[1]。

2004 年以來，國家加大對獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)投資力度，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部在全國實(shí)施了省、州（市）、縣三級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室考核驗(yàn)收、認(rèn)證工程，為縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、規(guī)范運(yùn)行帶來了發(fā)展機(jī)遇[2]。全州8 縣（市）在不同程度上新建、擴(kuò)建獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，通過考核驗(yàn)收獲得省級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室考核合格證的有7 個(gè)，其中包括3 個(gè)邊境測報(bào)站（文山市、麻栗坡縣、富寧縣），1 個(gè)州級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，3 個(gè)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（丘北縣、廣南縣、馬關(guān)縣）。

1.2 調(diào)查方法

經(jīng)問卷調(diào)查、檢測工作調(diào)查、現(xiàn)場調(diào)查等方式，對實(shí)驗(yàn)室建設(shè)狀況、運(yùn)行情況、儀器設(shè)備、人員配備、開展檢測項(xiàng)目以及生物安全防護(hù)等方面進(jìn)行調(diào)查，全面掌握文山州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)現(xiàn)狀，針對實(shí)際問題提出思考，為提高文山州基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物疫病檢測能力與實(shí)驗(yàn)室生物安全水平奠定基礎(chǔ)。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 檢測能力范圍及通過考核情況

對文山州1 市7 個(gè)縣的動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)情況開展問卷調(diào)查，結(jié)果顯示：文山州系統(tǒng)內(nèi)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室共有9 個(gè)，包括州級1 個(gè)、市級1 個(gè)、縣級7 個(gè)（其中邊境測報(bào)站3 個(gè)），具備常規(guī)抗體血清學(xué)檢測、監(jiān)測能力的實(shí)驗(yàn)室9 個(gè)，具備病原分子生物學(xué)檢測能力實(shí)驗(yàn)室1 個(gè)（州級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室）；具備ASF 檢測能力的實(shí)驗(yàn)室4 個(gè)（州級1 個(gè)、縣級3 個(gè)）。全州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室通過省級考核驗(yàn)收比例為77.8%（7/9），2 個(gè)縣級（硯山縣、西疇縣）獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室未完成建設(shè)與考核，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)與地方財(cái)政收入、政府重視程度、養(yǎng)殖量等因素密切相關(guān)。

2.2 基礎(chǔ)設(shè)施及人員配備

在調(diào)查具備抗體血清學(xué)檢測、ASF 檢測能力的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中，實(shí)驗(yàn)室建設(shè)面積基本達(dá)到縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)（200 m2以上），但有部分實(shí)驗(yàn)室所處的地理位置達(dá)不到相對獨(dú)立；文山州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員僅有34人，各縣實(shí)驗(yàn)室為2～4人，高級獸醫(yī)師15 人（約44%）；年齡在40～55 歲的工作人員占比90%；實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員大專學(xué)歷有18 人，大學(xué)本科學(xué)歷13 人，碩士學(xué)歷3 人（均在州級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室），畢業(yè)于獸醫(yī)專業(yè)技術(shù)人員僅60%。文山州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)總體上推進(jìn)較慢，實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員年齡偏大、職稱不高、學(xué)歷偏低、配備不足直接影響實(shí)驗(yàn)室檢測工作的推進(jìn)。

2.3 儀器設(shè)備及試劑配備

配有便攜式熒光定量PCR 儀的實(shí)驗(yàn)室4 個(gè)，配有普通PCR 儀的實(shí)驗(yàn)室1 個(gè)（州級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室），配有全自動(dòng)核酸提取儀實(shí)驗(yàn)室2 個(gè)（1 個(gè)州級1 個(gè)縣級），配有酶標(biāo)儀實(shí)驗(yàn)室9 個(gè)。ASF 檢測儀器設(shè)備與試劑涉及4 個(gè)生產(chǎn)廠家，血清學(xué)檢測儀器設(shè)備與試劑基本相近，多數(shù)以省級比對試驗(yàn)要求一致。

2.4 生物安全設(shè)備設(shè)施

9 個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室均同時(shí)配有生物安全柜、高壓滅菌設(shè)備，但工作人員理解執(zhí)行生物安全管理文件的能力有待加強(qiáng)，在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)各縣實(shí)驗(yàn)室人員生物安全設(shè)備的使用、管理不規(guī)范，對生物安全方面的理解片面，生物安全意識不強(qiáng)，盡管設(shè)備已就位，但生物安全措施的落實(shí)不到位。

2.5 能力驗(yàn)證情況

2017 年有6 個(gè)實(shí)驗(yàn)室參加云南省禽流感血凝抑制比對試驗(yàn)，比對結(jié)果符合率約為92.5%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為94%。2018 年參與云南省禽流感病原學(xué)PCR 檢測比對實(shí)驗(yàn)室1 個(gè)，比對結(jié)果符合率為97%；參與禽流感血凝抑制試驗(yàn)比對實(shí)驗(yàn)室6 個(gè)，比對結(jié)果符合率為95%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對符合率為98%。2019 年參與云南省非洲豬瘟病毒核酸PCR 檢測比對實(shí)驗(yàn)室1 個(gè)，使用國家ASF 參考實(shí)驗(yàn)室提供的引物進(jìn)行盲樣比對，比對結(jié)果符合率為100%；參與ASF 熒光快速PCR 檢測比對實(shí)驗(yàn)室3 個(gè)，比對結(jié)果符合率約為93%；參與禽流感病原學(xué)PCR 檢測比對實(shí)驗(yàn)室1 個(gè)，比對結(jié)果符合率為100%；參與禽流感血清學(xué)檢測能力比對實(shí)驗(yàn)室7 個(gè)，比對結(jié)果符合率98%；參與口蹄疫抗體檢測能力比對實(shí)驗(yàn)室7 個(gè)，比對結(jié)果符合率為100%。全州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室在病原學(xué)PCR 檢測方面能力十分薄弱，缺乏新的檢測儀器設(shè)備；在血清學(xué)檢測能力方面有所提高，但因試驗(yàn)因素影響及人員技術(shù)等原因仍存在檢測結(jié)果不穩(wěn)定的情況。

3 討論

3.1 獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)

經(jīng)現(xiàn)場調(diào)查發(fā)現(xiàn)文山州縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)緩慢，基礎(chǔ)硬件設(shè)施相對不足。從全州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)完成情況來看，完成實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)硬件平臺建設(shè)，具有固定相對獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室區(qū)域；能開展血凝和血凝抑制試驗(yàn)、瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、平板凝集試驗(yàn)、試管凝集試驗(yàn)、ELISA 抗體檢測試驗(yàn)等血清學(xué)檢測項(xiàng)目；通過省級考核驗(yàn)收的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室7 個(gè)，全州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)完成比例為77.8%。目前擁有ASF 檢測能力的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室僅有4 個(gè)，占總數(shù)的44.4%。各獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室條件有限，難以開展病原學(xué)檢測項(xiàng)目，縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測項(xiàng)目少、檢測能力薄弱?？h級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室配置的儀器設(shè)備中廢舊、老化的儀器占比較高，而適用于目前動(dòng)物疫病檢（監(jiān)）測的儀器設(shè)備相對稀缺，難以滿足當(dāng)前動(dòng)物疫病檢（監(jiān)）測工作的需求。全州獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室服務(wù)于動(dòng)物疫病預(yù)防控制工作的基礎(chǔ)硬件設(shè)施有待提高。對于縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)及檢測診斷能力水平，我國其他地區(qū)也存在實(shí)驗(yàn)室硬件基礎(chǔ)條件不完善，無法正常開展動(dòng)物疫病的檢測和對疫病及時(shí)準(zhǔn)確的診斷工作，甚至ASF 檢測能力的缺失等問題，面對目前復(fù)雜多樣的動(dòng)物疫病，持續(xù)加強(qiáng)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)十分重要[3-6]。

3.2 獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量管理體系和生物安全體系的建設(shè)不完善。80%的基層獸醫(yī)人員對管理體系的認(rèn)識、理解局限于文件上，實(shí)際工作落實(shí)情況與文件要求存在一定差距，執(zhí)行和運(yùn)行上存在一些細(xì)節(jié)問題。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室對實(shí)驗(yàn)室物資管理方面存在不足，如對ASF 檢測，各實(shí)驗(yàn)室采購ASF 快速檢測儀器、試劑廠家各不一致，來源復(fù)雜，缺少統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn)，檢測結(jié)果可靠性有待驗(yàn)證。部分獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開展PCR 檢測環(huán)境的控制能力較低，進(jìn)行ASF 檢測的實(shí)驗(yàn)室存在半開放性的實(shí)驗(yàn)室，檢測區(qū)域未達(dá)到負(fù)壓標(biāo)準(zhǔn)。我國高級別獸醫(yī)防護(hù)實(shí)驗(yàn)室分布不均且數(shù)量有限，大量高風(fēng)險(xiǎn)動(dòng)物疫病樣品的采集、前期處理、疫病初篩等試驗(yàn)活動(dòng)尚需要由基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)，面對基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的基礎(chǔ)設(shè)施改造、設(shè)備配置、完善規(guī)范運(yùn)行、人員能力提升等諸多因素，基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室急需規(guī)范內(nèi)部工作，強(qiáng)化實(shí)驗(yàn)室管理[7]。

3.3 實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)人員

各縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)人員素質(zhì)參差不齊，檢測能力不足。因體制改革，實(shí)驗(yàn)室檢測人員不穩(wěn)定，存在一人同時(shí)兼數(shù)職、調(diào)崗工作兼扶貧工作等現(xiàn)象，導(dǎo)致獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測壓力大，超負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)。在現(xiàn)場調(diào)查中發(fā)現(xiàn)部分實(shí)驗(yàn)室檢測人員對快速PCR 儀器檢測方法認(rèn)識匱乏，試驗(yàn)操作不規(guī)范，檢測結(jié)果無法正確判斷；大部分檢測人員未開展崗前專業(yè)的ASF 檢測技術(shù)及PCR 和熒光PCR 檢測技術(shù)實(shí)操培訓(xùn)，僅依靠個(gè)人經(jīng)驗(yàn)、儀器廠家短暫的儀器操作培訓(xùn)及大規(guī)模的政府ASF 防控文件、政策知識培訓(xùn)，技術(shù)人員的檢測能力無法達(dá)到實(shí)際檢測工作的要求。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的檢測能力難以適應(yīng)新形勢下動(dòng)物疫病防控工作需求，疫病的預(yù)警和預(yù)報(bào)能力發(fā)揮不夠，服務(wù)功能發(fā)揮不全[8]。

3.4 實(shí)驗(yàn)室生物安全意識

基層獸醫(yī)安全意識缺乏，生物安全防護(hù)落實(shí)不到位。實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員缺乏，實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)不規(guī)范，實(shí)驗(yàn)室雖然配有高壓滅菌鍋和生物安全柜等重要生物安全防護(hù)裝置，但因人員意識及操作規(guī)范方面的投入相對不足，許多人認(rèn)為“建成生物安全實(shí)驗(yàn)室就一定能夠進(jìn)行有效的防護(hù)”[9]。而實(shí)際在實(shí)驗(yàn)室開展禽流感、口蹄疫、布病、ASF等動(dòng)物疫病的檢測過程中，試驗(yàn)人員對廢棄物的處理、生物安全防護(hù)裝置的維護(hù)保養(yǎng)以及試驗(yàn)關(guān)鍵設(shè)備及應(yīng)用防護(hù)等方面存在短板，導(dǎo)致工作中存在很大的生物安全隱患。

4 建議

4.1 重視縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)

從本次調(diào)查情況來看，文山州9個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，僅有4 個(gè)實(shí)驗(yàn)室具有ASF 檢測能力，少數(shù)實(shí)驗(yàn)室具有完整的生物安全管理體系?？h級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測能力十分薄弱，無法及時(shí)準(zhǔn)確診斷疫病，繼而錯(cuò)失控制疫病的最佳時(shí)機(jī)。隨著現(xiàn)代畜牧業(yè)的不斷發(fā)展，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、功能定位都發(fā)生了變化[10]。各縣政府部門應(yīng)高度重視基層動(dòng)物疫病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)，合理安排獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)運(yùn)行專項(xiàng)資金的投入，加快推進(jìn)縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)，尤其是邊境以及畜牧養(yǎng)殖業(yè)豐富的縣市，充分履行基層獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的職能、職責(zé)，切實(shí)開展動(dòng)物疫病診斷、監(jiān)測、檢測、流行病學(xué)調(diào)查等重要工作，提高實(shí)驗(yàn)室的服務(wù)功能，為獸醫(yī)行政管理部門和動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督執(zhí)法部門提供科學(xué)有力的技術(shù)保障。

4.2 加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理

基層獸醫(yī)隊(duì)伍龐大、建設(shè)發(fā)展不平衡，需加強(qiáng)管理與指導(dǎo)。當(dāng)前，全州各縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量管理體系與生物安全管理體系建設(shè)、執(zhí)行不到位，各縣獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)以實(shí)驗(yàn)室建設(shè)為契機(jī)，結(jié)合實(shí)際工作不斷改進(jìn)、建設(shè)管理體系，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理，加大培訓(xùn)學(xué)習(xí)力度，利用年度實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部審核和管理評審工作強(qiáng)化兩大體系的學(xué)習(xí)與落實(shí)，向外探討、向內(nèi)提升，逐步規(guī)范化管理獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室。

4.3 提高獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測服務(wù)能力

各縣市獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)主動(dòng)開展檢測技術(shù)、生物安全、政策法規(guī)、質(zhì)量體系文件等相關(guān)基礎(chǔ)知識的培訓(xùn)，并對實(shí)驗(yàn)室檢測人員進(jìn)行考核持證上崗。對實(shí)驗(yàn)室已授權(quán)的檢測項(xiàng)目有計(jì)劃地進(jìn)行內(nèi)部培訓(xùn)，定期開展實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的檢測能力比對。同時(shí)積極主動(dòng)參與省、州級組織的檢測能力比對試驗(yàn)，對檢測能力比對符合率不高的試驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行分析總結(jié)、查找原因，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室檢測能力比對與技術(shù)培訓(xùn)，提高實(shí)驗(yàn)室檢測能力與技術(shù)服務(wù)水平。

4.4 選擇可靠的檢測儀器設(shè)備與試劑

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測儀器設(shè)備、檢測技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)、試劑等不統(tǒng)一，檢測數(shù)據(jù)不統(tǒng)一分析是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測工作的一個(gè)難題。目前，出現(xiàn)在市面上的ASF 診斷和檢測制品多種多樣，相關(guān)儀器設(shè)備與試劑種類繁多，價(jià)格不一，在選擇診斷、檢測試劑、儀器設(shè)備時(shí)要與實(shí)際情況相結(jié)合，選擇質(zhì)量可靠、較穩(wěn)定的通用儀器設(shè)備及檢測試劑。

4.5 加強(qiáng)生物安全防護(hù)

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室作為密切接觸臨床病例的場所，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)措施，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室人員、儀器設(shè)備等操作程序，是防止實(shí)驗(yàn)室感染與病原傳播的有效手段。各縣級獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室管理滯后，生物安全設(shè)備有效利用率較低，廢棄物無害化處理不規(guī)范，生物安全意識薄弱，生物安全風(fēng)險(xiǎn)較高，因此亟需科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)丶訌?qiáng)生物安全防護(hù)與管理。各獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室可考慮從生物安全制度的制定、落實(shí)，人員的管理，風(fēng)險(xiǎn)評估、預(yù)防及控制[11]，以及生物安全儀器設(shè)備的規(guī)范使用，有效維護(hù)保養(yǎng)等方面來完善獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)。