B7-H3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的研究進展

劉文亞 朱紅勝 嚴茹紅

1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院檢驗科，江蘇蘇州 215001；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州科技城醫(yī)院檢驗科，江蘇蘇州 215153

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因未明的慢性炎癥，主要累及關(guān)節(jié)滑膜，臨床表現(xiàn)有關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動困難等，可能與遺傳、感染及內(nèi)分泌等因素有關(guān)[1]。

B7-CD28家族作為重要的協(xié)同刺激分子，參與T細胞活化的雙信號途徑，在細胞免疫中發(fā)揮不可或缺的作用。目前B7家族包括10個成員，分別為 B7-H7（HHLA2）、B7-H6（NCR3LG1）、B7-H5（VISTA）、B7-H4（ B7S1，B7x，VTCN1）、CD276（B7-H3）、CD275（ICOS-L，B7-H2）、CD274（PDL1，B7-H1）、CD273（PD-L2，B7-DC ）、CD80（B7-1）和CD86（B7-2）[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)， B7-H3參與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，被認為是一種新的腫瘤標(biāo)志物[4-5]。同時，B7-H3在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的監(jiān)視作用，可能成為治療自身免疫性疾病的靶點[6-8]。本文就B7-H3的結(jié)構(gòu)、表達、功能、在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制中的研究等方面進行綜述。

1 B7-H3的結(jié)構(gòu)

2001年，B7-H3由Chapoval等[9]在人類樹突狀細胞cDNA文庫中發(fā)現(xiàn)，B7-H3（CD276）是典型的Ⅰ型跨膜蛋白分子，屬于免疫球蛋白超家族。B7-H3編碼的蛋白結(jié)構(gòu)含有316個氨基酸，包含氨基端的一段信號肽、一段跨膜蛋白區(qū)、一段胞質(zhì)尾區(qū)、一段胞外免疫球蛋白樣可變區(qū)（IgV）和恒定區(qū)（IgC）。在氨基酸序列上，B7-H3與B7家族的其他成員在胞外域受體結(jié)合區(qū)有一定的同源性，分別是B7-H3與B7-H1有 27%的同源性、B7-H3與B7-H2有25%的同源性、 B7-H3與B7-1有 21%的同源性、B7-H3與B7-2有20%的同源性。B7-H3的亞型由B7-H3a（2IgB7-H3）和B7-H3b（4IgB7-H3）組成，B7-H3a（2IgB7-H3）由IgV-IgC組成，B7-H3b（4IgB7-H3）由IgV-IgC-IgV-IgC組成，4IgB7-H3主要存在于人類細胞，而2IgB7-H3主要存在于人類和小鼠細胞[10-11]。研究發(fā)現(xiàn)，狗、豬、母牛等哺乳動物表達4Ig-B7-H3，而魚綱、兩棲類和鳥綱則表達2Ig-B7-H3[12]。鼠B7-H3分子和人B7-H3分子分別位于9號染色體和15號染色體，鼠B7-H3同B7家族的其他成員有20% ～ 30%的同源性，鼠B7-H3與人B7-H3的氨基酸結(jié)構(gòu)有88%的相似性[12]。

2 B7-H3的表達

B7-H3具有可溶性和膜型兩種形式?？扇苄訠7-H3（sB7-H3）通過裂解細胞表面的基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）而形成[13]。研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3被一個4.1kb的mRNA所編碼[9]。在肝臟、心臟、胎盤、前列腺等組織中，人類B7-H3 mRNA高表達，而人類B7-H3 mRNA在腦、骨骼肌、腎臟、肺臟呈低表達。B7-H3在外周血白細胞不表達，但是B7-H3在脾、淋巴結(jié)、骨髓和胸腺等淋巴器官中均有表達。B7-H3mRNA在多種腫瘤細胞株不表達，如淋巴細胞白血病Molt-4、急性早幼粒細胞白血病HL-60、伯基特淋巴瘤Raji。同時B7-H3 mRNA也在多種腫瘤細胞株表達，包括宮頸腺癌Hela S3、黑色素瘤 G361、肝癌 SK-HEP-l、結(jié)腸癌 SW480、肺癌A549和慢性髓系白血病K562。相比B7-H3 mRNA的廣泛表達，B7-H3在蛋白水平表達很局限，僅表達在肝臟、肺臟、膀胱、睪丸、前列腺、乳腺、胎盤和淋巴器官[9，11，14-15]。B7-H3 分子在 mRNA 的廣泛表達而在蛋白水平表達局限，說明可能與其轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機制有關(guān)[9]。

3 B7-H3的功能

B7-H3在免疫調(diào)控中發(fā)揮重要的作用，同時參與了腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移[4-5]。早期研究發(fā)現(xiàn)B7-H3具有協(xié)同刺激和協(xié)同抑制的雙重作用[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3不僅促進CD4+、CD8+T 細胞的增殖，還促進細胞毒性T淋巴細胞的產(chǎn)生，并且刺激干擾素（IFN-γ）的產(chǎn)生[9]。然而，還有研究表明，B7-H3對T細胞的活化和增殖及細胞因子的產(chǎn)生具有抑制作用[16-19]。研究表明，B7-H3在Th1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中起負調(diào)控作用，通過抑制主要轉(zhuǎn)錄因子的活性包括激活的T細胞的核因子（nuclear factor of activated T cells，NFAT）、激活蛋白 1（activator protein 1，AP-1）和核因子Kappa-B（NF-κB）來調(diào)節(jié)T細胞的功能[20-22]。同時，B7-H3作為協(xié)同抑制分子，抑制T細胞的活化及細胞因子IL-2的產(chǎn)生[15]。

4 B7-H3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種常見的自身免疫性疾病，主要表現(xiàn)有關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動困難等，對患者的心理造成了極大的負擔(dān)。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中，主要受影響的是滑膜和軟骨細胞[1]，滑膜環(huán)境由許多細胞類型組成，如CD4+T細胞、B細胞、單核細胞、巨噬細胞和成纖維細胞樣滑膜細胞。

血管生成在類風(fēng)濕滑膜炎中發(fā)揮關(guān)鍵作用，而血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）是RA血管生成的主要促血管生成因子，并且VEGF與疾病的嚴重程度有關(guān)[23-24]。Lai等[25]研究表明，B7-H3通過增加VEGF的分泌促進內(nèi)皮細胞的血管生成，從而參與RA的發(fā)病機制。先前的研究表明，成纖維細胞樣滑膜細胞是侵犯關(guān)節(jié)軟骨的關(guān)鍵細胞[26-28]。Tran等[29]研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3表達于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織內(nèi)的成纖維樣滑膜細胞，主要呈4Ig亞型形式，并且B7-H3對成纖維細胞樣滑膜細胞和T細胞的相互作用取決于T細胞的活化狀態(tài)。Guo等[30]研究發(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜組織內(nèi)有B7-H3陽性細胞，B7-H3+細胞主要為 CD68+巨噬細胞、CD31+內(nèi)皮細胞及 CK-18+上皮細胞，提示B7-H3有可能參與并調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)炎的病理進程。此外，研究表明，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者活動期，滑膜腔液的單核細胞被活化，活化的單核細胞可以特異性刺激Th17的產(chǎn)生[31]。Yoon等發(fā)現(xiàn)滑膜單核細胞可以促進CD4+T細胞的Th1反應(yīng)以及Th17反應(yīng)，同時，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜單核細胞主要表達B7-H3的4Ig亞型[32-33]。孫靜等[34]發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細胞B7-H3高表達，同時，B7-H3與類風(fēng)濕因子、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、疾病的分期、病程的長短、疾病活動度評分28（DSA28）顯著相關(guān)，提示B7-H3的高表達可能誘導(dǎo)單核細胞遷移、活化，繼而參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病的進程。

孫靜等[35]從基因?qū)用鎸︻愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制進行分析。通過體外直接測序法發(fā)現(xiàn)B7-H3基因存在的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）位點，再結(jié)合序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)（SSP-PCR）檢測出6個位點的SNP，提示B7-H3與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生相關(guān)[35]。還有研究表明，新的B7-H3-TACT多態(tài)性變異與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生有關(guān)[36]。

5 總結(jié)與展望

越來越多的研究證實 B7-H3參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機制，并且B7-H3與類風(fēng)濕因子、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、疾病的分期、病程的長短、疾病活動度評分28（DSA28）顯著相關(guān)，B7-H3已顯示出作為免疫治療靶標(biāo)的巨大潛力。然而，現(xiàn)有研究對 B7-H3 在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的相關(guān)信號通路尚未完全闡明，需要進行更深的研究，將為B7-H3 的免疫靶向療法提供新的方向。