艾灸足三里對胃黏膜病變的作用機制研究*

金 琦，李 欣，李文寧，閆 梅，王 鼎，朱慶文**

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

艾灸作為中醫(yī)外治療法的分支，療效獨特、作用迅速、歷史悠久，大量的臨床經(jīng)驗表明艾灸足三里對脾胃病有確切的療效[1]。有臨床報道表明，艾灸足三里能顯著提高惡性腫瘤晚期患者的生存質(zhì)量和免疫功能水平[2]。關(guān)于艾灸足三里的機制研究，特別是對新的細胞因子信號通路的研究，也在不斷豐富和完善。明晰艾灸足三里對胃黏膜作用的機制，對艾灸療法的發(fā)展具有重要作用，本文將從艾灸足三里對胃黏膜疾病作用機制進行綜述，并展望未來研究的方向，以期促進中醫(yī)外治療法的發(fā)展。

1 艾灸足三里修復(fù)胃黏膜的機制

急性胃黏膜損傷是消化系統(tǒng)疾病最常見的問題，也是諸多消化系統(tǒng)疾病最初的病理過程。由于急性胃黏膜損傷模型易于建立，故對于艾灸足三里促進急性胃黏膜損傷修復(fù)的機制研究更為豐富。由于胃接受人體自主神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)控來實現(xiàn)其生理功能，所以關(guān)于艾灸足三里對胃黏膜的影響，主要從神經(jīng)因素、體液因素兩方面來進行，目前對這兩方面的研究已經(jīng)深入到信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑方面。

1.1 艾灸足三里信號傳遞的神經(jīng)相關(guān)性

人體消化道受自主神經(jīng)系統(tǒng)支配，其中迷走神經(jīng)副交感纖維可以興奮消化道，可加強消化道運動、促進消化腺分泌和胃腸道激素釋放。向麗婷等[3]研究表明，艾灸足三里可以通過對迷走神經(jīng)的影響發(fā)揮修復(fù)急性胃黏膜損傷的作用。陳英等[4]研究表明，對大鼠脊髓施行橫斷術(shù)后，再進行足三里艾灸，就不能啟動大鼠內(nèi)源性信息傳遞過程，其促進胃黏膜修復(fù)的功能受到明顯抑制。

迷走神經(jīng)的節(jié)前神經(jīng)元在延髓的位置尚不清楚，而孤束核位于延髓背側(cè)部,是參與腹腔內(nèi)臟感覺傳入腦干的主要核團,對調(diào)節(jié)腹腔內(nèi)臟器官的活動發(fā)揮了重要作用，故有團隊針對艾灸足三里從孤束核進行了研究。向娟[5]、李飛等[6]研究發(fā)現(xiàn)，切斷孤束核影響，則艾灸足三里調(diào)節(jié)胃黏膜細胞凋亡相關(guān)因子腫瘤壞死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、B淋巴細胞瘤2(Bcl-2)蛋白、細胞凋亡促進基因(Bax)水平的功能受到影響?？梢姡淖闳飳ξ葛つさ淖饔门c神經(jīng)通路息息相關(guān)，關(guān)于艾灸足三里如何將作用傳入脊髓和迷走神經(jīng)的，陳果[7]等研究表明，艾灸足三里刺激可通過腓總神經(jīng)通路，啟動內(nèi)源性保護信息傳遞過程，從而達成對胃黏膜的保護效應(yīng)。

1.2 艾灸足三里對胃腸內(nèi)分泌激素的影響

艾灸足三里不僅通過神經(jīng)通路發(fā)揮作用，還可以直接或間接調(diào)節(jié)胃腸激素的分泌，以達到治療目的。內(nèi)源性保護因子包括胃腸激素中的生長因子家族成員，如表皮生長因子(EGF)等，其對胃腸功能具有保護作用，尤其表現(xiàn)在胃腸黏膜急性損傷時。然而，生長因子同時可以作用于成纖維細胞、平滑肌細胞、神經(jīng)元細胞，長期異常表達與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系，故這些生長因子也被認為是腫瘤相關(guān)因子。換言之，同一因子的不同水平或是在病理的不同階段的表達，會起到不同的作用。

王園園等[8]發(fā)現(xiàn)艾灸足三里與中脘穴可以升高急性胃黏膜損傷大鼠胃組織中EGF、轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)的表達，而降低胃黏膜中三葉因子家族3(TFF3)的含量，從而保護胃黏膜。佘暢[9]在歷時13周建立的大鼠慢性萎縮性胃炎模型的研究中發(fā)現(xiàn)，該模型的艾灸和針刺組刺激足三里和中脘穴后，胃黏膜保護相關(guān)因子EGF、TGF-α、PGE2水平較高，這一結(jié)果與上述急性胃黏膜損傷模型的一致。而在另一項20周建模的胃癌癌前病變的動物實驗中，楊宗保等[10]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸足三里組較模型組大鼠胃黏膜細胞中，EGF、TGF-α、增殖細胞核抗原(PCNA)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)的表達均呈下降趨勢。這說明，艾灸足三里在病理的不同階段，可能產(chǎn)生的效應(yīng)不同。何其達[11]等通過艾灸急性胃潰瘍大鼠模型的實驗表明，艾灸足三里與梁門可以使胃黏膜增殖細胞核抗原(PCNA)升高并降低P物質(zhì)(SP)的表達，且這一作用在干預(yù)前4 d明顯，而在胃潰瘍損傷基本修復(fù)的第7天，PCNA和SP的表達在各組之間并沒有顯著的統(tǒng)計學(xué)差異。這也印證了上述關(guān)于“艾灸對胃黏膜保護作用的機制在各病理階段不同”的猜想。

1.3 艾灸足三里作用于胃黏膜損傷的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究

胃黏膜損傷的誘因繁多，飲食不節(jié)、情志不調(diào)等綜合因素在臨床上都與之密切相關(guān)。建立大鼠模型，通常選用乙醇等理化因素灌胃刺激，引起急性胃黏膜損傷；若建立慢性萎縮性胃炎模型，則通常聯(lián)合誘癌劑甲基硝基亞硝基胍(MNNG)。此兩種模型可很好模擬臨床飲食不節(jié)的情況。同時還有另一種常見模型，即應(yīng)激性胃潰瘍模型。應(yīng)激性胃黏膜損傷(SGML)發(fā)生于機體受嚴重創(chuàng)傷、內(nèi)臟功能嚴重受損、休克、力竭運動及水浸-束縛等情況下，以胃黏膜出血、潰瘍、糜爛為主要特征的病變[12]。力竭運動和束縛-浸水是建立該模型最常用的方法，可以模擬臨床生活工作、情志精神因素對機體的影響。研究表明，艾灸足三里對上述三個模型均有確切的療效，其作用機制既有相似之處，也有對應(yīng)的特別之處。

許多重要蛋白質(zhì)的磷酸化水平受艾灸的作用影響。王晨光等[13]研究表明，艾灸足三里與梁門參與調(diào)節(jié)急性胃黏膜損傷中絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)相關(guān)信號通路，包括正磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白質(zhì)絲氨酸蘇氨酸激酶(PI3K/Akt)信號通路、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(PAK)、蛋白激酶B(PKB/Akt)、磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK2)等的水平。而劉瓊等[14]在同期對SGML的研究中發(fā)現(xiàn)，上述這些蛋白質(zhì)在艾灸足三里和梁門作用下也有相同的變化趨勢；此外，還有腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2(TRAF2)、轉(zhuǎn)錄活性因子1(STAT1)、腫瘤抑癌基因(p53)、Mkp-3、核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB等的水平受艾灸足三里抑制。這些蛋白質(zhì)都在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程中發(fā)揮了重要作用。

在SGML模型的研究中，李婧婷等[15]研究發(fā)現(xiàn)，艾灸足三里和梁門參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)，可以抑制束縛-浸水模型大鼠亢進的下丘腦-垂體-腎上腺(HPA)軸，通過改善應(yīng)激狀態(tài)，進而從根本上控制胃黏膜損傷的程度；王紅梅等[16]研究發(fā)現(xiàn)，在力竭游泳的模型中，海馬內(nèi)離子鈣接頭蛋白1(Iba-1)及IL-6mRNA表達降低，即在慢性疲勞病理過程中發(fā)揮重要作用的小膠質(zhì)細胞的活化水平和促炎性細胞因子水平可以被艾灸足三里抑制，但海馬IL-1β未見顯著下降。這一結(jié)果與舒文娜[17]對慢性萎縮性胃炎模型的研究結(jié)果有相似性，艾灸足三里和中脘穴不僅可以降低COX-2水平，還可以使抑制胃酸分泌的IL-1β和促炎因子IL-6、IL-8的含量明顯降低，這三者都在慢性炎癥中發(fā)揮著直接或間接的作用。顯然前者研究重點在抗應(yīng)激方面，后者研究重點在于抗局部刺激，雖然其研究部位不同，但其通路存在相關(guān)性。何其達等[11]的研究中，艾灸足三里與梁門對P物質(zhì)的改變也可以說明，其治療作用是通過對高級中樞的整體治療實現(xiàn)。

此外，艾灸足三里還可以通過減少胃黏膜細胞的凋亡，以控制急、慢性胃黏膜損傷。郁潔等[18]發(fā)現(xiàn)，艾灸中脘、足三里穴能誘導(dǎo)急性胃黏膜損傷中的熱休克蛋白60(HSP60)表達，從而抑制線粒體促凋亡蛋白(Smac)的表達，最終起到修復(fù)胃黏膜損傷的作用；艾灸足三里、梁門穴預(yù)處理可以通過上調(diào)大鼠胃黏膜細胞熱休克蛋白70(HSP70)表達，抑制細胞凋亡線粒體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中相關(guān)因子細胞色素c(Cyt-c)、凋亡酶激活因子1(Apaf-1)、半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表達,使細胞免于進入細胞凋亡的不可逆程序[19、20]。在楊青[21]對慢性萎縮性胃炎的研究中，艾灸足三里和中脘可以減少NF-κB、B淋巴細胞瘤-2(Bcl-2)的表達，從而改善慢性萎縮性胃炎模型中胃黏膜細胞的凋亡情況。

2 艾灸足三里機制研究展望

艾灸足三里的相關(guān)機制研究仍在不斷完善補充中，在已有的研究中仍存在一些空白值得進一步探索，以下文舉隅拋磚引玉。

2.1 艾灸選穴與方法

在治療胃黏膜疾病中，艾灸足三里有確切療效，作為較為固定的選穴，常配伍中脘、梁門等穴位一起使用。部分實驗設(shè)置非穴位點對照組與胃經(jīng)穴組對比，但沒有將單一穴位與配伍穴位進行對比的相關(guān)研究。

上述文獻中多選用溫和灸的方式進行干預(yù)，部分實驗將溫和灸與電針的效果進行對比，差異較?。坏珜睾途呐c化膿灸等不同灸法進行對比的實驗較少。無創(chuàng)的溫和灸與有創(chuàng)的化膿灸在局部產(chǎn)生的效應(yīng)不同，但兩者在遠端產(chǎn)生的作用是否有顯著差異尚待進一步探究。張秀麗[22]臨床研究表明，足三里的化膿灸可以防治消化道惡性腫瘤化療后的不良反應(yīng)，包括化療后白細胞計數(shù)水平大幅下降等,能改善化療患者的惡心嘔吐、腹痛、腹瀉等消化道癥狀,提升患者的生活質(zhì)量。因此，化膿灸對胃黏膜相關(guān)疾病的研究值得進行，類似還有火針與針刺、各種灸法等。同時，比較其作用機制與效果差異性的研究仍然較少。

2.2 艾灸足三里機制研究的空白

艾灸足三里對機體的調(diào)節(jié)隨時間變化，可見其作用是通過高級中樞實現(xiàn)的。由于慢性萎縮性胃炎建模時間較長，缺乏對其作用動態(tài)監(jiān)測的研究，應(yīng)當在日后實驗中進行補充。尤其是對生長因子家族中諸多亦參與腫瘤生長的因子，其在病理過程的不同時期產(chǎn)生的作用及意義有極大不同。

此外，仍有一些未被研究的相關(guān)通路值得探索。由于胃腸黏膜的相似性與相關(guān)性，新的探索可以從腸黏膜病變中尋找靈感，或?qū)⑽葛つp傷的研究推演至腸黏膜損傷的相關(guān)研究中。在動物實驗中，張何驕子[23]的研究表明，針灸足三里和關(guān)元穴，可以降低潰瘍性結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸組織中缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)和轉(zhuǎn)錄活性因子3(STAT3)的表達。在急性胃黏膜損傷、慢性胃炎、胃癌等各類胃黏膜病變中，HIF-1α都有一定的表達，其中胃癌表達HIF-1α的陽性率最高[24]。有研究表明，胃癌細胞中不僅HIF-1α高表達，而且HIF-1α的表達與患者的預(yù)后有密切關(guān)系，通常HIF-1α低表達者預(yù)后更好[25]。缺氧情況下，HIF-1α氧依賴降解結(jié)構(gòu)域(ODD)脯氨酸殘基羥化受阻，即HIF-1α降解受抑制，從而加強VEGF的表達，增加NO的合成，進而損傷胃黏膜。而HIF-1α/VEGF通路的異常激活，可促進胃黏膜微血管生成、腫瘤細胞增殖等,與胃癌的發(fā)生進展有密切關(guān)系[26]。上述文獻已顯示出艾灸足三里對VEGF的影響，且有實驗表明[27]，火針可通過調(diào)節(jié)血清一氧化氮(NO)與血管內(nèi)皮素(ET)的平衡，促進胃黏膜的修復(fù)，但現(xiàn)尚無艾灸足三里影響急、慢性胃黏膜損傷模型中HIF-1α水平的研究。

3 總 結(jié)

總之，艾灸作為非藥物療法，能夠避免藥物對胃腸道的刺激。艾灸足三里對于慢性胃炎、潰瘍性結(jié)腸炎等持久難愈性疾病具有確切的療效及簡、便、廉的特點，在消化系疾病的治療中顯示出優(yōu)勢。根據(jù)上述列舉的艾灸足三里促進胃黏膜修復(fù)的作用特點，在未來的研究中可將目光轉(zhuǎn)向動態(tài)變化監(jiān)測與更高級中樞的信號調(diào)節(jié)控制方面。對艾灸足三里作用機制的深入研究，為艾灸的推廣夯實了基礎(chǔ)，也為醫(yī)患帶來了新的選擇。