貓爪草的提取工藝、藥理作用及臨床研究進展

閆浩利，王雯麗，羅 峰,楊 曼

(1.河南省食品藥品審評查驗中心,河南 鄭州 450018； 2.河南中醫(yī)藥大學(xué),河南 鄭州 450046)

貓爪草首載于《中藥材手冊》，為毛茛科一年生草本植物小毛茛的干燥塊根。因其外形呈紡錘形，數(shù)個簇生，形似貓爪而得名。貓爪草分布于浙江、江蘇、安徽、江西、廣西、河南、湖北、四川、云南、貴州等地，若以貓爪草中的有效成分多糖為指標(biāo)，則產(chǎn)地為河南駐馬店、信陽地區(qū)者為優(yōu)[1]。貓爪草性溫，味甘、辛，入肝、肺經(jīng)，可內(nèi)服和外用，用以解毒、消腫散結(jié)、祛痰。貓爪草含有黃酮、生物堿、多酚、多糖、皂苷、揮發(fā)油及有機酸類等多種生物活性成分[2]，具有抗腫瘤、抗結(jié)核、保肝和抗肝損傷的作用。近年來，貓爪草的研究一直廣受關(guān)注，眾多學(xué)者對貓爪草的提取工藝、藥理作用及臨床運用方面的研究有了新的突破。筆者通過檢索文獻，對貓爪草的現(xiàn)代研究進展進行總結(jié)，綜述如下。

1 貓爪草的現(xiàn)代提取工藝

目前，關(guān)于貓爪草化學(xué)成分提取工藝的研究較雜亂。張艷玲等[3]研究了遮光度對貓爪草大田栽培生長、產(chǎn)量及品質(zhì)的影響，結(jié)果表明，大田栽培應(yīng)首先考慮30%的遮光度，此遮光度既能促進產(chǎn)量的提高又有利于對糖類等成分的積累。目前已有的提取工藝中，陳瓊等[4]的研究以貓爪草干膏率和多糖提取率為考察指標(biāo)，研究表明，浸提溫度50 ℃、超聲頻率40 kHz、超聲時間20 min、固液比1 ∶ 30為貓爪草的最佳提取工藝。王銳等[5]采用乙醇提法提取貓爪草中多酚類物質(zhì)，以多酚浸出量為考察指標(biāo)，采用福林酚比色法測定，初步確定貓爪草中多酚類物質(zhì)的最佳提取工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)750 mL/L、料液比1 ∶ 50，70 ℃下提取1.5 h。廖啟元等[6]運用響應(yīng)面法優(yōu)化貓爪草多糖的工藝，以貓爪草多糖所得率為考察指標(biāo),從酶用量、pH值、酶解溫度3個因素進行優(yōu)化，結(jié)果表明，當(dāng)纖維素酶用量0.57%、pH值4.9、酶解溫度49.3 ℃、酶解時間120 min、料液比1 ∶ 20時，貓爪草多糖所得率最高。費洋等[7]采用乙酸乙酯超聲波法提取貓爪草不飽和脂肪酸，以脂肪酸總含量作為評價指標(biāo)，用氫氧化鉀-950 L/mL 乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液酸堿滴定的方法進行質(zhì)量評價，結(jié)果表明，42 ℃、60 min、料液比為1 ∶ 8時，不飽和脂肪酸提取率最高，且方法經(jīng)濟、方便。廖啟元等[8]運用超濾法脫除粗多糖中的蛋白質(zhì)從而提純貓爪草粗多糖，以多糖保留率和蛋白脫除率為評價指標(biāo)，結(jié)果顯示，粗多糖的提純率顯著優(yōu)于Sevag法和三氯乙酸法。

2 貓爪草的藥理作用研究概況

貓爪草的化學(xué)成分主要有黃酮、皂苷、生物堿、多酚、多糖、揮發(fā)油及有機酸類。多糖是研究的熱點，具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、保肝的作用；皂苷具有抗腫瘤的作用；醇類提取物具有抗結(jié)核的作用。

2.1 抗腫瘤作用

研究[9]表明：貓爪草抗腫瘤的有效部位包括乙酸乙酯、正丁醇及多糖等，抗腫瘤機制有所不同，其中十六烷酸是其抗腫瘤的主要活性成分。近年來貓爪草抗腫瘤的研究方向主要集中在乳腺癌、大腸癌、肝癌、非小細胞肺癌，更多的研究致力于貓爪草皂苷抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的抗腫瘤作用機制。研究發(fā)現(xiàn)：高質(zhì)量分?jǐn)?shù)(100 mg/L)的貓爪草皂苷作用人乳腺癌細胞(MCF-7)48 h，可明顯促進乳腺癌mfn2基因的表達，減弱MCF-7增殖，促進其凋亡，且時間與作用呈正相關(guān)[10]。貓爪草皂苷可以調(diào)節(jié)結(jié)腸癌LoVo細胞線粒體膜電位、抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡，作用機制可能與下調(diào)B淋巴細胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2/Bax，增加Bax、Caspase-3蛋白表達相關(guān)[11-12]；貓爪草皂苷能抑制人高轉(zhuǎn)移肝癌細胞株增值，抑制作用與質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈正相關(guān)[13]。貓爪草總皂苷可促進非小細胞肺癌NCI-H460細胞的早期凋亡[14]，抑制A549細胞裸鼠移植瘤生長[15]，抑制肝癌H22、HepG2細胞的增殖[16]。貓爪草提高機體免疫力可能與貓爪草多糖激活小鼠腹腔巨噬細胞活性相關(guān)，多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)在100～400 mg/L下活性最高[17]。

2.2 保肝和抗肝損傷作用

研究[18]表明：貓爪草單糖由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖按照一定的比例組成，其摩爾比為1.00 ∶ 1.17 ∶ 51.71 ∶ 2.16 ∶ 0.46，多糖是以β-D-葡萄吡喃糖為主的一種多糖復(fù)合物。植物的天然多糖對卡介苗/脂多糖、刀豆蛋白、乙肝病毒誘導(dǎo)的免疫性肝損傷及酒精誘導(dǎo)的急、慢性肝損傷模型動物均有明顯的保護或改善作用[19]。何瀟等[20]研究發(fā)現(xiàn)：貓爪草多糖在50,250 mg/L下能通過促進肝細胞增殖、抑制高濃度刀豆蛋白A來發(fā)揮保肝和抗肝損傷的作用；粗多糖能下調(diào)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、γ-干擾素(IFN-γ)和白細胞介素-6(IL-6)因子，能明顯抑制HepG 2.2.15肝細胞分泌乙肝表面抗原和乙肝e抗原。

2.3 抗結(jié)核作用

熊英等[21]從貓爪草的抗耐藥結(jié)核活性部位中分離出的化學(xué)成分2-脫氧-D-核糖酸-1，4-內(nèi)酯、異麥芽酚-α-D-葡萄糖苷、香草酸4-O-β-D-葡萄糖苷、水楊苷、3，4-二甲氧基苯甲酸、咖啡酸，發(fā)現(xiàn)其具有抗耐藥結(jié)核活性。也有研究發(fā)現(xiàn)貓爪草可誘導(dǎo)結(jié)核病人外周血淋巴細胞顆粒裂解肽信使核糖核酸表達水平升高，增強對結(jié)核菌的殺傷能力,從而達到治療效果[22]。貓爪草石油醚提取物能夠顯著抑制多藥耐藥結(jié)核菌株的生長,并提高巨噬細胞TNF-α的表達水平[23]。貓爪草醇提取物能調(diào)整Th1/Th2細胞應(yīng)答平衡，從而發(fā)揮抗結(jié)核作用；適當(dāng)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的貓爪草醇提取物可明顯增強耐多藥結(jié)核分枝桿菌感染小鼠的細胞免疫功能[24]。另有研究表明：貓爪草有效成分可抑制強毒人型結(jié)核桿菌用于治療頸部淋巴結(jié)結(jié)核，療效顯著[25]。已有中成藥制劑貓爪草膠囊、金盾膠囊等用于肺結(jié)核的臨床治療，廣受好評。

3 臨床運用

貓爪草具有解毒、化痰散結(jié)的功效，可制成煎劑、酊劑、膏劑、凡士林紗條、注射液，被廣泛運用于臨床。雖用藥歷史較短，但藥用價值高，廣泛應(yīng)用于治療甲狀腺疾病、結(jié)核、咽炎等疾病。已有的文獻未見不良事件的報告。

《河南中草藥手冊》中記載用貓爪草、夏枯草各適量外敷或貓爪草水煎取汁，加黃酒或江米甜酒為引內(nèi)服來治療瘰疬。曲超等[26]運用中醫(yī)傳承平臺探討了石巖教授診治癭病的臨證經(jīng)驗及用藥規(guī)律。石巖教授治療甲狀腺結(jié)節(jié)首選貓爪草，化痰散結(jié)，解毒消腫，常與柴胡、甘草、香附、海藻等藥物配伍使用；治療甲狀腺腫常與柴胡、附子共用，以達疏肝解郁、調(diào)理氣機之效；治療甲狀腺功能減退時常關(guān)聯(lián)使用“柴胡-貓爪草”，以共奏疏肝解郁、化痰理氣的功效。嶺南地區(qū)氣候獨特，常發(fā)鼻、咽喉相關(guān)疾病，貓爪草具有化痰散結(jié)之效，為耳鼻咽喉科常用的中草藥。貓爪草具有抗炎、促進增生的淋巴濾泡變小的作用，對慢性咽炎的治療多收佳效[27]。有研究[28]以咽部體征作為療效判定指標(biāo)觀察了貓爪草對慢性咽炎的臨床療效，結(jié)果顯示，服用單味中草藥貓爪草6 g，連用30 d，實驗組改善率顯著高于安慰劑組，且未見不良反應(yīng)。藍劍等[29]的研究結(jié)果顯示：貓爪草水煎劑聯(lián)合標(biāo)準(zhǔn)抗結(jié)核方案在淋巴結(jié)大小、淋巴結(jié)血液供應(yīng)、淋巴結(jié)直徑等療效評價指標(biāo)方面優(yōu)于單純標(biāo)準(zhǔn)抗結(jié)核方案組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。國醫(yī)大師劉尚義治療肝癌經(jīng)驗，常選用貓爪草與鱉甲、莪術(shù)、冬凌草組成“甲術(shù)二草湯”來發(fā)揮養(yǎng)陰軟堅、化痰散結(jié)的功效[30]。

4 討 論

貓爪草作為近年來熱門開發(fā)的中藥，在多糖、多酚的提取工藝方面文獻研究較雜亂，缺少驗證，多糖的提純方案還需要探索、優(yōu)化。針對貓爪草的研究還相對不足，多成分作用靶點尚不明了，不能較好地服務(wù)于臨床。因此，對貓爪草的研究有以下幾方面的思考：①目前對貓爪草多糖純化尚需要進一步完善，多糖類作為主要的免疫活性物質(zhì)，其護肝、抗腫瘤作用有必要深入探索作用靶點，發(fā)揮更廣泛的優(yōu)勢；②應(yīng)運用大數(shù)據(jù)研究貓爪草多成分-多途徑-多靶點協(xié)同作用機制；③目前關(guān)于貓爪草臨床應(yīng)用的報道尚不充足，在兒科、婦科、體虛者的用藥規(guī)范尚無定論，用藥的規(guī)范性及安全性尚需考量。