中國熱科院生物所發(fā)表新型分子克隆系統(tǒng)

日前，中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院熱帶生物技術研究所言普副研究員等人經(jīng)過多年研究，開發(fā)了一種新型的標準化分子克隆技術——Nimble Cloning。該技術能將目標DNA通過一步反應直接克隆到環(huán)狀目標載體。該技術以《NimbleCloning:ASimple,Versatile,andEfficientSystemforStandardizedMolecularCloning》為題發(fā)表在國際期刊FrontiersinBioengineeringandBiotechnology。

Nimble Cloning技術集成了目前幾種克隆技術的優(yōu)點，并較好的解決了它們的不足之處。優(yōu)點：一是直接將DNA克隆到環(huán)狀載體，避免了載體的線性化酶切和回收等步驟，簡化了實驗操作，提高了克隆效率。二是使用靈活，用途廣泛。PCR產(chǎn)物和環(huán)狀質粒上的DNA(入門克隆)均可克隆到目標載體，并且可用于單片段、多片段和多位點等多種形式的克隆。三是可靈活用于標準化克隆和無縫克隆?；蚣訋ㄓ媒宇^序列后可克隆到系統(tǒng)任何一個載體，形成一個標準化的克隆系統(tǒng)。如有不使用通用接頭序列的無縫克隆要求，只需將目標基因與載體的重疊序列設計在通用接頭的外圍，通用接頭可在克隆反應中消除，在不改變載體的情況下實現(xiàn)無縫克隆。