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    黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)的影響

    2020-01-08 07:15:38曾涵芳李燁青王澤棟張林朱靖謝穎韓兆玉
    中國奶牛 2019年12期
    關(guān)鍵詞:產(chǎn)奶量黃芪直腸

    曾涵芳,李燁青,王澤棟,張林,朱靖,謝穎,韓兆玉

    (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院乳牛科學(xué)研究所,南京 210095)

    全球性氣候變暖的大環(huán)境限制了我國奶牛業(yè)發(fā)展,尤其是華東、華南地區(qū)的夏季高溫高濕環(huán)境條件,使奶牛長期處于熱應(yīng)激狀態(tài),最終導(dǎo)致采食量下降、乳品質(zhì)降低、繁殖性能下降、乳房炎發(fā)病率升高,使牛奶價格持續(xù)走低,給奶牛行業(yè)帶來極大的經(jīng)濟損失[1,2]。中草藥大部分提取于純天然綠色植物,含有多種生物活性物質(zhì),因其易得、作用廣泛,同時具有營養(yǎng)和藥用價值而日益受到養(yǎng)殖業(yè)者們的青睞[3]。大量研究表明,中草藥的添加對畜禽的生長性能、免疫反應(yīng)和血清代謝指標(biāo)等有顯著影響,因此是抗生素飼料添加劑的潛在替代品[4,5]。黃芪多糖(APS)是中藥黃芪中的主要活性成分,目前它的應(yīng)用主要集中在免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎和抗癌作用方面[6]。研究表明,在肉雞日糧中添加APS能夠減輕環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制[7]。徐盛明等[8]在斷奶仔豬日糧中添加一定量的APS結(jié)果改善了斷奶仔豬生產(chǎn)性能以及抗氧化能力。此外,在肉雞慢性熱應(yīng)激模型研究中發(fā)現(xiàn),添加有黃芪成分的復(fù)方中藥,其機體的抗氧化能力顯著提升,可清除熱應(yīng)激誘導(dǎo)生成的氧化自由基[9]。但是,關(guān)于APS在熱應(yīng)激奶牛中的應(yīng)用研究卻鮮有報道。因此,本試驗擬對熱應(yīng)激奶牛注射APS,探究其對奶牛生產(chǎn)性能、血清代謝指標(biāo)的影響,為APS對熱應(yīng)激下奶牛的應(yīng)用提供可靠的依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    黃芪多糖注射液(河北遠(yuǎn)征藥業(yè)有限公司);試驗?zāi)膛#▉碜越K省淮安杰隆牧業(yè)奶牛場)。試驗牛泌乳期日糧營養(yǎng)水平參照江蘇省淮安杰隆牧業(yè)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn),日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

    表1 奶牛日糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)水平)

    1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

    試驗采用配對設(shè)計,根據(jù)胎次(1.95±0.95)、泌乳天數(shù)(220.34±42.73d)和泌乳量(34.45±4.89kg/d),選取30頭健康的中國荷斯坦牛,隨機分為對照組和試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組,每組10頭,在相同的條件下飼養(yǎng)。試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組奶牛分別于頸部肌肉注射APS注射液30mL/d、50mL/d。試驗于2018年7~8月份進行,分為三個階段,每個階段連續(xù)注射4d(每天早晨8點注射),停止3d,試驗期共21d。試驗?zāi)膛2捎盟ㄏ凳斤曫B(yǎng),每天飼喂三次,自由飲水。

    1.3 樣品的采集與測定

    1.3.1 試驗牛舍溫濕指數(shù)的測定

    試驗期間每天測定牛舍的溫度和濕度。溫濕指數(shù)(THI)的測定方法:每天8:00、14:00和20:00分別讀取牛舍內(nèi)前、中、后六個固定帶點的電子溫濕表溫度(T,℃)和相對濕度(RH,%),并計算THI,THI=(1.8×T+32)- (0.55-0.55×RH)×(1.8×T-26)。

    1.3.2 直腸溫度和呼吸頻率的測定

    在試驗第0、4、7、11、14、18、21天測定試驗?zāi)膛5闹蹦c溫度和呼吸頻率,分別用獸用體溫計和秒表進行測定。

    1.3.3 生產(chǎn)性能的測定

    試驗期間,采用管道式擠奶器擠奶,每頭奶牛在試驗第0、4、7、11、14、18、21天測定產(chǎn)奶量,采奶樣使用全自動乳成分分析儀分析乳品質(zhì),測定指標(biāo)有乳脂、乳蛋白、乳糖、總固形物、體細(xì)胞數(shù)和乳尿素氮濃度。

    1.3.4 血清生化指標(biāo)的測定

    在試驗第0、4、7、11、14、18、21天分別尾靜脈采血10mL,分離血清,-80℃保存待測。測定血清生化指標(biāo)包括:總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、葡萄糖(GLU)、游離脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、β-羥丁酸(β-HBA)。試劑盒來源:南京建成生物工程研究所。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)由 Excel整理后,用SPSS 20.0的一般線性模型(GLM)進行雙因素方差分析(Twoway ANOVA),然后各組間進行最小顯著差數(shù)法(LSD)多重比較,所有數(shù)據(jù)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SEM)表示。為說明劑量效應(yīng),整個試驗階段采用單因素分析(One-way ANOVA)。P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 試驗牛舍的環(huán)境溫濕指數(shù)

    據(jù)相關(guān)研究資料,當(dāng)牛舍環(huán)境THI低于72時,奶牛不會出現(xiàn)熱應(yīng)激;當(dāng)THI在72~78之間時,會出現(xiàn)輕微熱應(yīng)激;當(dāng)THI在78~88之間時,會出現(xiàn)中度熱應(yīng)激;當(dāng)THI在89~98之間時,出現(xiàn)極嚴(yán)重?zé)釕?yīng)激;當(dāng)THI大于98時,奶牛將會死亡。由表2可知,試驗期間,牛舍的日平均溫度為34.14℃,相對濕度為63.53%,THI值為86.33,表明此環(huán)境下奶牛處于中度熱應(yīng)激狀態(tài)。

    表2 牛舍環(huán)境的溫濕指數(shù)

    2.2 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛直腸溫度及呼吸頻率的影響

    圖1 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛直腸溫度的影響

    如圖1所示,注射APS在時間和濃度上對奶牛直腸溫度沒有互作效應(yīng)(P>0.05);隨著時間的推移,三個組奶牛的直腸溫度均顯著增加(P<0.05)。但在第4天時,試驗Ⅰ組奶牛的直腸溫度顯著比對照組低(P<0.05);在第11、18天時,試驗Ⅱ組奶牛的直腸溫度顯著比對照組低(P<0.05);在第14、21天時,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組奶牛的直腸溫度均顯著比對照組低(P<0.05)。此外,如圖2所示,注射APS在時間和濃度上對奶牛呼吸頻率沒有互作效應(yīng)(P>0.05);隨著時間的推移,三組奶牛呼吸頻率顯著上升(P<0.05)。但在第4天時,試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組奶牛的呼吸頻率顯著比對照組低,且在第14天時,試驗Ⅱ組奶牛的呼吸頻率顯著比對照組低(P<0.05)。試驗結(jié)果表明,在熱應(yīng)激條件下,隨著時間變化,奶牛的熱應(yīng)激加重,從而導(dǎo)致其直腸溫度和呼吸頻率上升,而注射APS后,能夠緩解其熱應(yīng)激。

    圖2 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛呼吸頻率的影響

    2.3 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛產(chǎn)奶量及乳品質(zhì)的影響

    如表3所示,注射黃芪多糖在時間和濃度上對奶牛產(chǎn)奶量和乳成分沒有互作效應(yīng)(P>0.05);隨時間推移,三組奶牛的產(chǎn)奶量和4%標(biāo)準(zhǔn)乳均顯著降低(P<0.05);此外,在第7、14天時,試驗Ⅱ組4%標(biāo)準(zhǔn)乳顯著低于試驗Ⅰ組(P<0.05)。另外,注射APS在時間和濃度上對奶牛的乳糖率、乳脂率、乳蛋白率、乳總固體率、乳尿素氮和乳體細(xì)胞數(shù)均沒有互作效應(yīng)(P>0.05);但隨時間推移,三組奶牛的乳糖率和尿素氮在第14天時均顯著降低(P<0.05)。在第7、14、18天時,試驗Ⅰ組乳脂率顯著高于試驗Ⅱ組(P<0.05),其他指標(biāo)無差異(P>0.05)。在第4、18、21天時,試驗Ⅰ組乳蛋白率顯著高于試驗Ⅱ組(P<0.05),其他指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。在第7、11、18天時,試驗Ⅱ組的乳總固體率顯著比試驗Ⅰ組低(P<0.05)。在第4、18天時,試驗Ⅱ組的尿素氮顯著比對照組低(P<0.05),與試驗Ⅰ組無顯著差異(P>0.05)。體細(xì)胞數(shù)在第14天時,試驗Ⅱ組顯著比試驗Ⅰ組高(P<0.05);在第18、21天時,試驗Ⅱ組體細(xì)胞數(shù)顯著低于對照組(P<0.05)。另外,整個試驗階段注射APS對奶牛產(chǎn)奶量無顯著影響,4%標(biāo)準(zhǔn)乳試驗Ⅰ組顯著高于試驗Ⅱ組(P<0.05);試驗Ⅰ組乳蛋白率顯著高于對照組(P<0.05);總固形物試驗Ⅱ組顯著低于試驗Ⅰ組(P<0.05);尿素氮和體細(xì)胞數(shù)試驗Ⅱ組顯著低于對照組(P<0.05)。因此,注射APS能提高4%標(biāo)準(zhǔn)乳、乳蛋白率,降低奶牛乳體細(xì)胞數(shù),具有改善奶牛乳品質(zhì)的潛力。

    表3 黃芪多糖對氧化應(yīng)激下奶牛產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)的影響

    2.4 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛血清生化指標(biāo)的影響

    如表4所示,注射APS對氧化應(yīng)激下奶牛血清生化指標(biāo)在時間和濃度上沒有互作效應(yīng)(P>0.05)。在第4天時,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的β-HBA顯著低于對照組(P<0.05),另外,整個試驗階段注射APS后,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組奶牛血清β-HBA顯著低于對照組(P<0.05);其他指標(biāo)無顯著差異(P>0.05)??梢钥闯觯珹PS可顯著減低氧化應(yīng)激下奶牛的血清β-HBA含量,對奶牛機體代謝不產(chǎn)生毒副作用。

    2.5 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛血清蛋白的影響

    如圖3所示,注射APS對奶牛血清蛋白在時間和濃度上沒有互作效應(yīng)(P>0.05)。隨時間推移,在第18天時,試驗Ⅱ組總蛋白顯著高于其他兩組(P>0.05);且試驗Ⅰ組總蛋白在第4、11天時顯著升高(P<0.05)。如圖4所示,隨時間推移,在第11天時,試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的白蛋白顯著低于對照組(P<0.05)。另外,如圖5所示,隨時間推移,在第11、14、18、21天時,試驗Ⅱ組的球蛋白顯著低于對照組(P<0.05),與試驗Ⅰ組無顯著差異。因此,注射APS顯著降低了奶牛血清球蛋白(P<0.05)。

    表4 黃芪多糖對應(yīng)激下奶牛血清生化指標(biāo)的影響

    圖3 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛血清總蛋白的影響

    圖4 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛血清白蛋白的影響

    圖5 黃芪多糖對熱應(yīng)激下奶牛血清球蛋白的影響

    3 討論

    溫濕指數(shù)(THI)被常用于描述奶牛的熱應(yīng)激狀態(tài)。有研究認(rèn)為當(dāng)機體處于炎熱環(huán)境時,THI大于70可作為熱應(yīng)激的閾值[10];但有研究表示在處于溫和環(huán)境時,THI超過60就已達到熱應(yīng)激水平[11]。此外,也有研究表明,當(dāng)牛舍溫度高于25℃或者THI>72時,就可引起奶牛的熱應(yīng)激[12]。本試驗于7~8月份在江蘇淮安進行,根據(jù)測量結(jié)果表明,牛舍的日平均溫度高達34.14℃,其平均相對濕度為63.53%,牛舍THI值達到86.33,奶牛處于中度熱應(yīng)激狀態(tài)。另一方面,在正常狀態(tài)下,奶牛的直腸溫度為38.5℃,當(dāng)直腸溫度高于39℃并可排除疾病的可能時,奶牛就處于熱應(yīng)激狀態(tài)。當(dāng)環(huán)境溫度升高時,除了以利用皮膚散熱之外,奶牛也同時通過增加呼吸頻率來增加散熱[13]。研究表明,在熱應(yīng)激期間飼喂中草藥,能顯著降低試驗各階段奶牛直腸溫度和呼吸頻率[14]。但陳以意等[15]研究表明,應(yīng)用中草藥添加劑能夠使奶牛直腸溫度和呼吸頻率下降,但沒有顯著差異。本研究結(jié)果顯示,試驗期間奶牛直腸溫度均在38.5℃以上,而且呼吸頻率異常,在60次/min以上,且隨時間推移,三組試驗?zāi)膛V蹦c溫度和呼吸頻率均顯著上升。但注射APS后,在短時間內(nèi)就能顯著降低直腸溫度和呼吸頻率,因此,APS能夠緩解熱應(yīng)激導(dǎo)致的奶牛直腸溫度和呼吸頻率的上升。

    產(chǎn)奶量和乳品質(zhì)作為衡量奶牛生產(chǎn)價值最直接的指標(biāo)受高溫的影響非常顯著。研究表明,熱應(yīng)激能顯著降低奶牛的產(chǎn)奶量,并對乳蛋白和乳脂產(chǎn)生顯著影響,其主要原因是奶牛機體代謝異常導(dǎo)致采食量下降而引起的[16,17]。因此,研究者們通過改變?nèi)占Z能量組成[18]或添加過瘤胃保護性物質(zhì)[19]來提高奶牛的生產(chǎn)性能。據(jù)報道,柴胡添加劑對熱應(yīng)激奶牛的乳品質(zhì)沒有顯著影響,但是0.25和0.5g/kg的添加量可顯著提高乳脂和乳蛋白,因此,具有緩解奶牛熱應(yīng)激并提高其泌乳性能的功效[20]。此外,在娟姍牛日糧中添加益生菌與中草藥復(fù)合添加劑,可顯著增加產(chǎn)奶量及乳脂和非脂固形物含量[21]。然而,也有研究顯示,中藥處理前后奶牛的產(chǎn)奶量沒有顯著變化,但草藥產(chǎn)品的功效與常規(guī)藥品的療法相似,并且沒有明顯的副作用[22]。本研究結(jié)果顯示,試驗前后奶牛的產(chǎn)奶量和4%標(biāo)準(zhǔn)乳顯著下降,試驗組奶牛產(chǎn)奶量和4%標(biāo)準(zhǔn)乳與對照組相比無顯著變化趨勢,這可能與奶牛干物質(zhì)采食量有關(guān)。此外,本結(jié)果表明,注射APS能夠提高奶牛的乳蛋白率和乳脂率,并且降低體細(xì)胞數(shù)。這與李占鋒等[23]在奶牛日糧中添加黃芪組方中草藥的研究結(jié)果部分一致,其研究表明,在一定時間內(nèi)黃芪組方中草藥可提高奶牛產(chǎn)奶量,其他無顯著影響。另一方面,乳體細(xì)胞數(shù)是判斷奶牛機體是否處于健康狀態(tài)和乳品質(zhì)量的重要因素。研究表明,傳統(tǒng)中藥可降低奶牛乳體細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞的凋亡率,從而提高奶牛的免疫功能[24]。本試驗結(jié)果表明,注射APS可降低體細(xì)胞數(shù),這與王曉芳等[25]在熱應(yīng)激奶牛日糧中添加微量中藥發(fā)酵制劑降低體細(xì)胞數(shù)的研究結(jié)果一致。因此,APS可以對奶牛乳品質(zhì)產(chǎn)生影響,而且沒有毒副作用。

    血清TP是ALB和GLB的總和,是機體蛋白質(zhì)代謝的重要指標(biāo)。其中,ALB是機體蛋白的重要來源,同時也參與維持血液滲透壓、脂肪酸運輸?shù)?;GLB則與機體免疫密切相關(guān)。研究表明,中藥復(fù)方(含有石膏、黃柏、藿香、甘草等)能提高錦江黃牛血清中的TP、GLB含量,促進機體蛋白質(zhì)合成,增強機體免疫力[26]。Song等[27]在肉牛的研究中發(fā)現(xiàn),中草藥的添加顯著增加了熱應(yīng)激下肉牛血清中TP、ALB和GLB的含量,并且其血糖呈先增后降的趨勢,緩解了肉牛的熱應(yīng)激。但是,本試驗研究結(jié)果表明,注射APS顯著降低了血清GLB含量,對TP和ALB沒有顯著影響。而Al-Saiadya等[28]在日糧中添加抗熱劑,得出與本試驗相似的結(jié)果,其試驗結(jié)果表明抗熱劑顯著降低奶牛血清TP、GLB的含量,提高ALB/GLB的比值。因此,APS有提高夏季奶牛免疫功能的潛力,這也可能是日糧組成、采食量不同以及牛生理差異等共同作用的結(jié)果。

    日糧被瘤胃微生物有效降解所得的揮發(fā)性脂肪酸只能滿足奶牛70%~80%能量需求,奶牛主要通過糖異生來獲取葡萄糖。在泌乳高峰期,高產(chǎn)奶牛的能量需求超過了采食凈能,奶牛缺乏足夠的能量去維持產(chǎn)奶,熱應(yīng)激則更容易加重機體能量負(fù)平衡;因此,脂肪動員成為機體獲取能量而緩解能量負(fù)平衡的重要途徑[29]。脂肪氧化分解得到的NEFA被釋放進入血液,通過肝臟吸收和代謝形成TG、膽固醇和酮體等,是脂代謝的重要指標(biāo)。本試驗結(jié)果顯示,注射APS后奶牛血清GLU、NEFA、TG、TC沒有顯著變化,但β-HBA在第4天時顯著降低。β-HBA在酮體中的含量最多,其在血清中含量的高低常被用于判斷奶牛是否患有酮病。本試驗APS的注射可能通過降低脂肪動員,從而減少β-HBA的生成,使機體能量負(fù)平衡有所改善,緩解了奶牛的熱應(yīng)激。這與Cheng等[30]的研究有相似結(jié)果,該研究應(yīng)用柴胡提取物后對熱應(yīng)激奶牛血清GLU、NEFA、TG沒有顯著影響,但機體總抗氧化能力和免疫功能有所增強。

    綜上所述,APS能夠降低熱應(yīng)激下奶牛的直腸溫度、呼吸頻率、乳體細(xì)胞數(shù)及血清球蛋白,對熱應(yīng)激下奶牛的生理狀況和血清生化指標(biāo)產(chǎn)生一定的影響,具有緩解奶牛熱應(yīng)激的潛力。

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