檢測食品中黃曲霉毒素樣品前的處理技術(shù)分析

吳曉東 王云 陳金玉

【摘?要】食品檢驗過程中一項非常重要的檢驗環(huán)節(jié)就是在實驗室利用檢測技術(shù)對黃曲霉毒素樣品進行檢測。食品行業(yè)內(nèi)檢測技術(shù)的研究方向一般都是根據(jù)不同的檢驗樣品來進行研發(fā)，在檢測過程中，如何對檢驗樣品進行有效的處理，能夠直接影響到結(jié)果的真實性和可靠性，因此，本文將對食品中黃曲霉毒素樣品前的處理技術(shù)進行分析。

【關(guān)鍵詞】食品檢驗;黃曲霉毒素;樣品處理技術(shù)

在對食品進行檢測過程中，最為重要的關(guān)鍵環(huán)節(jié)便是對食品樣品進行選擇，根據(jù)食品樣品中的特點來采取有針對性的檢測技術(shù)，才能夠有效地確保食品檢驗的結(jié)果可靠和真實。無論在任何實驗檢測過程中，都需要憑借優(yōu)秀技術(shù)來確保各個檢驗環(huán)節(jié)的穩(wěn)定和順利，所以這也意味著在對食品進行檢驗時，黃曲霉毒素樣品前的處理有著十分重要的意義，更是目前最為重要的食品檢測研究方向。

一、檢測食品中黃曲霉毒素樣品的重要性

通過對食品中的黃曲霉毒素進行檢測，可以有效促進食品行業(yè)健康發(fā)展，是為人民群眾提供良好食品安全保障的重要途徑，必須通過先進的食品檢測對食物內(nèi)所含有的黃曲霉毒素進行準確分析，而這也需要依靠食品中黃曲霉毒素樣品處理技術(shù)才能夠得以實現(xiàn)。對于實驗所獲得的結(jié)果和過程，有效的樣本處理工作是非常重要的基礎(chǔ)性環(huán)節(jié)，結(jié)合多年的工作經(jīng)驗可知，提高藥品處理技術(shù)是保障整項檢測工作質(zhì)量的基礎(chǔ)，也是促進我國食品檢驗工作可持續(xù)發(fā)展的重要前提[1]。

二、檢測食品中黃曲霉毒素樣品前的處理技術(shù)分析

1、液-液萃取

國內(nèi)有專家將糧谷類食品樣品經(jīng)過甲醇和水溶液（80：20，V/V）的提取，然后利用三氯甲烷液-液萃?。↙LE）凈化富集，用三氯乙酸衍生后熒光檢測四種黃曲霉毒素（B1、B2、G1、G2），檢出限分別為0.06，0.03，0.18，0.05ug/kg，在小麥、大米、玉米三種樣品中加標回收率則在71.73%至115.37%的特圍之內(nèi)，相較于標準相差為3%至9.88%;另外一些專家則比較老二氯甲烷和三氯甲烷兩種萃取劑，發(fā)現(xiàn)三氯甲烷萃取樣品中的黃曲霉毒素的加標回收率較高，采用LLE凈化的前處理方法，建立了用甲醇-乙腈-水（40：5：55，V/V）流動相體系分離黃曲霉毒素（B1、B2、G1、G2），HPLC法測定糧食樣品中黃曲霉毒素的新方法，在完全不同的標準下，所開展的回收試驗，回收率可達80.3%至97%，相對標準偏差為2.1%至4%，但是LLE一般都含有大量有機溶劑，在目前黃曲霉毒素的常規(guī)分析中應用較少[2]。

2、固相萃取

固相萃?。⊿PE）可同時完成樣品的富集與凈化，相較于LLE在溶劑的使用上能夠得到有效節(jié)省，更可以獲得良好的重現(xiàn)性。國內(nèi)相關(guān)專家將腰果樣品用甲醇和水（8：2，V/V）溶液提取后用弗羅里硅土柱凈化，HPLC-MS/MS法檢測樣品中的4種黃曲霉毒素;有專家以二氧化硅-氧化石墨烯復合物為SPE材料，創(chuàng)造了在植物油中，進行黃曲霉毒素B1、B2的HPLC檢測方法;也有專家將花生及其制品經(jīng)一種自制的混合SPE柱純化，超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）檢測，可對其中的6種黃曲霉毒素同時進行定性定量分析;或者用二氯甲烷提取發(fā)酵茶中黃曲霉毒素，提取液經(jīng)濃縮后，用氰基鍵合硅膠SPE小柱凈化，UPLC-UV法檢測[3]。

多功能凈化柱（Multifunctional Cleanup Column，MFC）是一種特殊的SPE柱，可選擇性吸附樣品溶液中的脂類、蛋白類等雜質(zhì)，而黃曲霉毒素不被吸附。多功能凈化柱操作方法十分簡便，不需要活化處理、淋洗和洗脫等相關(guān)操作，只需要直接利用樣品進行檢測處理，就可以獲得良好的凈化成績，但是卻無法實現(xiàn)富集的功能。根據(jù)多功能柱填料的不同，又分為僅用于凈化黃曲霉毒素和可凈化多種霉菌毒素兩大類。國內(nèi)有專家采用PriboFast M228型多功能柱凈化，建立了玉米和花生中黃曲霉毒素的光化學衍生，HPLC-FLD檢測方法和UPLC-MS/MS檢測方法;也有采用可凈化黃曲霉毒素的Mycosep 226多功能凈化柱，建立了三氟乙酸（TFA）柱前衍生，加壓毛細管電色譜-激光誘導熒光（Pressurized Capillary Electrochromatography-Laser-Induced Fluorescence，PCEC-LIF）快速測定花生醬中黃曲霉毒素的方法;或者利用可凈化多種霉菌毒素的Mycospin 400型多功能凈化柱，建立了可以同時用于檢測玉米、豆粕中黃曲霉毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇等26種霉菌毒素的 LC-MS/MS檢測方式。通過Mycosep113、Mycosep226、Mycosep228和Water HLB柱4種多功能柱的凈化效果進行了考察，發(fā)現(xiàn)Mycosep228型多功能凈化柱對玉米和花生中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和展青霉素9種真菌毒素有非常好的凈化效果，建立了 MFC-HPLC柱后光化學衍生的黃曲霉毒素檢測方法[4]。

3、免疫親和柱

免疫親和柱是一項十分特殊的檢測方式，屬于固相萃取柱的一種。免疫親和柱所具備的吸附功能與一般的化學官能團有著一定的差異性，是一種十分特殊的、特異性抗體，根據(jù)抗原與抗體免疫反應的原理，高選擇性地吸附上樣溶液中的目標物，具有高親和力、高專一性和可結(jié)合的特點。當前，該檢測技術(shù)更多的是使用在植物油及糧谷類、中藥材及中成藥類、牛奶類及其他食品等中黃曲霉毒素的檢測。

現(xiàn)在市場上對于多種真菌霉素檢測的需求量和標準都在逐漸攀升，同時高效準確處理多種毒素的復合免疫親和柱的應用將得到更為廣泛地使用。國外專家建立了食品（黑麥粉、玉米、早餐麥片、全麥面包）中不同免疫親和柱的組合，對特定的多種真菌毒素進行凈化，所得結(jié)果可以滿足歐盟成年人和嬰兒食品中多種毒素檢測的限量標準要求;國內(nèi)專家建立了動物源性食品（豬肉、魚肉、豬肝）中6種黃曲霉毒素和6種玉米赤霉醇類真菌毒素的復合免疫親和柱凈化，HPLC-MS/MS檢測方法[5]。

雖然免疫親和柱在黃曲霉毒素檢測上可以獲得良好的選擇性，但是卻同時存在著溫度穩(wěn)定性差、檢測花銷大高、檢測試劑價格高昂等問題，所以在應用過程中會受到諸多限制。

結(jié)束語：

隨著我國食品行業(yè)快速發(fā)展，對食品進行檢測工作已經(jīng)占據(jù)著食品管理工作中的重要地位。這直接關(guān)系到我國民生建設(shè)質(zhì)量。也能夠有效地促進食品行業(yè)的健康發(fā)展。檢測樣品前的處理技術(shù)。作為食品檢測工作中的首要步驟，必須要不斷提高技術(shù)革新力度。提高對于樣品前處理技術(shù)的重視，才能夠使食品檢測工作發(fā)揮出真正的積極作用。

參考文獻：

[1]王楠， 耿旭輝， 關(guān)亞風，等. 一種檢測食品基質(zhì)中黃曲霉毒素的前處理方法：， 2019.

[2]何婷婷. 低共熔溶劑在食品中黃曲霉毒素和多環(huán)芳烴分析的應用研究[D].?2019.

[3]李梅， 毛劼， 劉倩，等. 高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定食品中的10種真菌毒素[J]. 國際藥學研究雜志， 2018（4）：314-319.

[4]吳鳳琪，?岳振峰，?張毅，等. 食品中主要霉菌毒素分析方法的研究進展[J]. 色譜， 2020， 038（007）：759-767.

[5]安娟， 何麗君， 趙仁勇，等. 離子液體-分散液液微萃取-高效液相色譜法測定小麥中4種黃曲霉毒素[C].河南省化學會2018年學術(shù)年會摘要集. 0.

作者簡介：

吳曉東（1991年6月），彝族，云南昆明，本科，助理工程師，研究方向：食品農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測;

王云（1989年9月），男，漢族，云南曲靖，本科;

陳金玉，1991.01.10，白族，云南鶴慶，本科，助理農(nóng)藝師，研究方向：植物檢疫。

（作者單位：1.騰沖海關(guān)綜合技術(shù)服務(wù)中心;2.騰沖海關(guān)）