鹽度對牡蠣“華南1號”早期發(fā)育與生長的影響?

趙乃乾， 肖 述， 劉浩翔， 潘 英??， 張躍環(huán)， 喻子牛

(1. 廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院， 廣西 南寧 530004； 2. 中國科學(xué)院南海海洋研究所， 廣東 廣州 510301)

香港牡蠣(Crassostreahongkongensis)屬于軟體動物門(Mollusca)瓣鰓綱(Lamellibranchia)翼形亞綱(Pterimorpjia)珍珠目(Pterioida)牡蠣科(Ostreidae)巨蠣屬(Crassostrea)，俗稱大蠔[1-2]。香港牡蠣之前也稱作近江牡蠣(Crassostrearivularis)，中國近江牡蠣的俗稱有“紅肉牡蠣”、“白肉牡蠣”等[3-4]。后來香港學(xué)者Lam等[5]通過基因遺傳學(xué)的方法將珠江三角洲養(yǎng)殖的“白肉牡蠣”定為一個新種，命名為香港牡蠣。該命名也得到國內(nèi)外學(xué)者的認(rèn)同[6-9]。中國已有2000多年的牡蠣養(yǎng)殖歷史，其中廣西的欽州、北海、防城港，廣東的陽江、湛江、珠海等地均是中國傳統(tǒng)的牡蠣養(yǎng)殖區(qū)[10]。廣西香港牡蠣養(yǎng)殖已有700多年的歷史[11]，在香港牡蠣養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)中，經(jīng)常出現(xiàn)抗病抗逆性差、個體小型化、單位產(chǎn)量降低等不良現(xiàn)象。中科院南海海洋研究所喻子牛等[12]從2006年開始，對香港牡蠣進行了長達10年的雜交育種研究，以牡蠣種間雜交(香港牡蠣♀×長牡蠣(Crassostreagigas)♂)個體與香港牡蠣速生品系(F4)個體回交獲得的回交一代為基礎(chǔ)群體，通過表型性狀與分子標(biāo)記協(xié)同篩選獲得適合在中國華南沿海養(yǎng)殖的牡蠣“華南1號”，具有生長快、產(chǎn)量高、耐高鹽等優(yōu)點，且遺傳穩(wěn)定性達96.7%，并可在鹽度12～30的沿海河口水域中養(yǎng)殖，拓寬了鹽度適應(yīng)范圍，適當(dāng)擴大了現(xiàn)有養(yǎng)殖區(qū)域。

近年來，學(xué)者對香港牡蠣的遺傳改良[13]、雜交效應(yīng)[14-15]、人工育苗與養(yǎng)殖[16-17]等方面進行了研究，而關(guān)于鹽度對牡蠣“華南1號”胚胎發(fā)育、幼蟲和稚貝生長的研究尚未見報道。本研究對牡蠣“華南1號”與香港牡蠣養(yǎng)殖群體在不同鹽度下的幼蟲發(fā)育和稚貝生長進行了比較，旨在探究牡蠣“華南1號”在胚胎發(fā)育、幼蟲期的鹽度適應(yīng)性及為廣西北部灣海域的引進推廣養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗于2017年6～9月在中科院南海海洋研究所湛江市東海島東南實驗場進行。牡蠣“華南1號”為養(yǎng)殖在廣西合浦大坡的F2群體，對照組為目前北部灣海域的香港牡蠣養(yǎng)殖群體。實驗所用牡蠣“華南1號”與對照組香港牡蠣的親貝均為2016年6月實驗場同一批次人工育苗所得。

1.2 實驗方法

1.2.1 親貝的處理 挑選性腺發(fā)育良好、活力強、貝殼完整的牡蠣“華南1號”與香港牡蠣養(yǎng)殖群體(對照組)親貝各30個，清除貝殼表面附著物并用過濾海水清洗貝殼，用數(shù)顯游標(biāo)卡尺測量每個牡蠣的殼長、殼寬和殼高，精確度為0.01 mm，并用電子天平測量每個牡蠣的個體質(zhì)量、軟體質(zhì)量等生長指標(biāo)，精確到0.01 g(見表1)。親貝按不同群體分別放入浮籃，在水溫28～29 ℃、鹽度25的海水中連續(xù)充氣暫養(yǎng)，每天投喂扁藻(Platymonassp.)3次。

表1 香港牡蠣實驗用親貝的生物學(xué)參數(shù)Table 1 The traits of C. hongkongensis for spawning

1.2.2 鹽度調(diào)節(jié) 通過混合淡水和海水調(diào)節(jié)鹽度，使用手動折光儀(型號K52-100)、TY10便攜式pH計(型號PHB-4ZX21)和水溫計(型號MITIR系列TP377)測量鹽度、pH和水溫。

1.2.3 產(chǎn)卵、受精與孵化 本實驗所用育苗桶的規(guī)格為容積60 L的藍色塑料桶。鹽度設(shè)置8個梯度(3、8、13、15、18、23、28和33)，其中鹽度15作為對照，為香港牡蠣常規(guī)人工育苗的鹽度。每個梯度均設(shè)3個重復(fù)組，水溫保持在28～29 ℃，pH為8.1～8.2。

解剖暫養(yǎng)的牡蠣“華南1號”與對照組，挑選性腺較好的雌貝各6個，雄貝各3個。將解剖獲取的精子和卵子分別放置于裝有海水鹽度為15的1 000 mL燒杯中，待精子、卵子取完后，將卵子分別加入到調(diào)節(jié)好鹽度梯度的桶中進行體外促熟，卵子密度控制在30～50個/mL。體外促熟后，將精子溶液加入到每個鹽度梯度的桶中，每個桶中通過每10 min添加10 mL精子溶液，共添加3次，持續(xù)時間30 min，使精卵混合均勻，每個卵子周圍有4～6個精子。從第一次添加精子溶液開始計算受精，每5 min取樣在Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察不同鹽度組的受精情況。連續(xù)觀察并拍照記錄牡蠣“華南1號”與對照組的胚胎和幼蟲發(fā)育情況。每次隨機取樣觀察30個。受精后24 h，通過計數(shù)每個實驗桶中1 mL的樣品來定量孵化的D形幼蟲、畸形幼蟲和未受精卵的數(shù)量。孵化期間保持微充氣。

1.2.4 浮游幼蟲的培育 在水溫28～29 ℃、pH為8.1～8.2條件下，不同鹽度組的牡蠣“華南1號”與對照組受精卵經(jīng)過13～16 h發(fā)育，約有30%的受精卵達到D形幼蟲。受精后24 h，每個鹽度組進行選優(yōu)，選優(yōu)后每個桶D形幼蟲以8～15個/mL為宜，每桶投喂湛江等鞭金藻(Isochrysiszhanjiangensis)100 mL。之后每天上午07:00～09:00換水1次，前期換水量為原桶的1/3，后期逐漸增加到1/2，每隔5 d將桶中的水全換。每天投喂人工培育的單細胞藻類3次，主要以湛江等鞭金藻、云微藻(Nannochloropsissp.)和角毛藻(Chaetoceroscalcitrans)為主。在每次換水后每桶投放約5 mg/L EDTA以螯合水中重金屬。在浮游幼蟲培育階段，每3 d用帶目微尺的Olympus光學(xué)顯微鏡測量每個鹽度組30個幼蟲的殼高數(shù)據(jù)，直到變態(tài)附著期。

1.2.5 變態(tài)附著及稚貝培育 經(jīng)過18～27 d 培育出現(xiàn)眼點，到達附著期。當(dāng)幼蟲30 %左右出現(xiàn)眼點即向每個育苗桶中懸掛2吊蠔殼附著基。本實驗所用的蠔殼附著基，蠔殼殼高約為15 cm、殼長約為10 cm，用細線將60片蠔殼疊串吊掛桶中。附著基預(yù)先用50 mg/L KMnO4溶液浸泡消毒10 h并用淡水清洗干凈使用。變態(tài)附著后的貝苗前期投喂角毛藻，投喂3次/d。

在此期間，持續(xù)測量不同鹽度組的牡蠣“華南1號”與對照組早期稚貝的生長情況，每4 d用帶目微尺的Olympus光學(xué)顯微鏡和數(shù)顯游標(biāo)卡尺各測量30個個體的殼長和殼高等數(shù)據(jù)，直至稚貝出池。

1.3 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果

2.1 不同鹽度條件對牡蠣“華南1號”與對照組的胚胎發(fā)育速度影響

在水溫28～29 ℃、pH為8.1～8.2條件下，不同鹽度條件下牡蠣“華南1號”從受精卵發(fā)育至早期稚貝歷時21～23 d，對照組為28～30 d。不同鹽度梯度組中，牡蠣“華南1號”與對照組的胚胎發(fā)育過程及各時期特征見表2、3、4和圖1。

表2 牡蠣“華南1號”與對照組的胚胎和幼蟲發(fā)育時期特征(鹽度15、水溫28～29 ℃)Table 2 Characteristics of embryonic and larval development stages of oyster “South China No.1” and control group (salinity 15, temperature 28～29 ℃)

續(xù)表2

表4 不同鹽度下對照組胚胎和幼蟲發(fā)育進程(28～29 ℃)Table 4 Embryonic and larval development of oyster C. hongkongensis under different salinities (28～29 ℃)

由表3和4可知，在水溫28～29 ℃、pH為8.1～8.2條件下，牡蠣“華南1號”在設(shè)置的鹽度組中均能正常受精。在鹽度8、13、15、18和23時，受精后1 h 5 min培育桶中約有30%的受精卵開始第一次卵裂；鹽度13、15和18時，受精后13 h 50 min約有30%的受精卵發(fā)育為D形幼蟲；鹽度23時經(jīng)過14 h 5 min約有30%的受精卵發(fā)育至D形幼蟲；發(fā)育最慢的是鹽度3和33，經(jīng)過15 d約有30%的D形幼蟲發(fā)育至殼頂幼蟲后期；鹽度13、15和18時，經(jīng)過18 d發(fā)育至眼點幼蟲。對照組在鹽度33時未能受精，在鹽度13、15和18時，受精后55 min培育桶中約有30%的受精卵開始第一次卵裂，經(jīng)過15 h 15 min約有30%的受精卵發(fā)育至D形幼蟲，而發(fā)育至眼點幼蟲需25 d。在同一鹽度下，對照組幼蟲發(fā)育較牡蠣“華南1號”慢。

表3 不同鹽度下牡蠣“華南1號”的胚胎和幼蟲發(fā)育進程(28～29 ℃)Table 3 Embryonic and larval development of oyster “South China No.1” under different salinity(28～29 ℃)

在水溫28～29 ℃、pH 8.1～8.2實驗條件下，牡蠣“華南1號”與對照組受精卵在不同鹽度下經(jīng)過不同的時間發(fā)育成D形幼蟲。隨著幼蟲發(fā)育，在鹽度3和33時牡蠣“華南1號”幼蟲發(fā)育最慢，發(fā)育至第13天時開始大量死亡，直至第15天時已全部死亡。

2.2 牡蠣“華南1號”與對照組的受精率、孵化率和D形幼蟲畸形率比較

由圖2和3可知，不同鹽度條件下牡蠣“華南1號”和對照組的受精率在鹽度13～18時較高，孵化率在鹽度15時最高，差異顯著(P<0.05)；牡蠣“華南1號”D形幼蟲畸形率在鹽度13～23時較低，對照組D形幼蟲畸形率在鹽度13～18時較低。相同鹽度，牡蠣“華南1號”的受精率和孵化率均高于對照組，且差異顯著(P<0.05)。牡蠣“華南1號”的D形幼蟲畸形率均低于對照組，差異明顯(P<0.05)，表明牡蠣“華南1號”的適宜受精鹽度為13～23，對照組的適宜受精鹽度為13～18。

(1: 卵; 2: 受精卵; 3: 第一極體; 4: 第二極體; 5: 第一次卵裂，第一極葉伸出; 6: 4細胞期; 7: 8細胞期; 8: 16細胞期; 9:囊胚期; 10: 原腸期; 11: 擔(dān)輪幼蟲; 12: D形幼蟲;13: 殼頂幼蟲初期; 14: 殼頂幼蟲中期; 15、16: 殼頂幼蟲后期; 17: 匍匐幼蟲初期; 18: 匍匐幼蟲; 19: 眼點幼蟲; 20: 稚貝。1: Egg; 2: Fertilized egg; 3: First polar body; 4: Second polar body; 5: First cleavage, first pole extension; 6: Four-cell stage; 7: Eight-cell stage; 8: Sixteen-cell stage; 9: Blastula stage; 10: Primal period; 11: Trochophore; 12: D-shaped larvae; 13: Early umbo-larvae;14:Middle umbo-larvae; 15、16: Late umbo-larvae; 17: Early creeping larvae; 18: Creeping larvae; 19: Eye larva; 20: Spat.)

圖2 不同鹽度下牡蠣“華南1號”與對照組的受精率與孵化率比較Fig.2 Comparison of fertilization and hatching rate in the oyster of “South China No.1” and control group under different salinities

圖3 不同鹽度下牡蠣“華南1號”與對照組的D形幼蟲畸形率比較Fig.3 Comparison of D-shaped larva deformity rate in the oyster of “South China No.1” and control group under different salinities

2.3 不同鹽度條件下牡蠣“華南1號”與對照組浮游幼蟲的生長發(fā)育比較

在水溫28～29 ℃、pH 8.1～8.2實驗條件下，牡蠣“華南1號”受精卵經(jīng)過13 h 50 min左右發(fā)育成D形幼蟲，在鹽度3時殼高最小為(60.25±3.63)μm，在鹽度15時殼高最大為(61.67±3.26)μm；對照組在鹽度33時未能受精，其余鹽度下受精卵經(jīng)過15 h 20 min左右發(fā)育成D形幼蟲，在鹽度3時殼高最小為(53.65±5.49)μm，鹽度15時殼高最大為(59.29±2.89)μm，牡蠣“華南1號”與對照組的殼高在鹽度13、15和18時不存在顯著性差異(P>0.05)，其余鹽度組差異顯著(P<0.05)。第3天開始，相同鹽度組，牡蠣“華南1號”與對照組的殼高均存在差異顯著(P<0.05)。

經(jīng)19 d發(fā)育，牡蠣“華南1號”達到附著變態(tài)期，該時期牡蠣“華南1號”在鹽度8時幼蟲殼高最小為(320.58±2.02)μm，在鹽度15時幼蟲殼高最大為(348.26±2.46)μm；對照組在鹽度15時幼蟲殼高最大為(267.39±2.57)μm，還遠未達到附著變態(tài)期，牡蠣“華南1號”與對照組之間的差異顯著(P<0.05)。牡蠣“華南1號”不同鹽度組間差異顯著(P<0.05)，對照組除鹽度8和28差異不顯著外(P>0.05)，其余各鹽度組間差異顯著(P<0.05)。

由表5可知，牡蠣“華南1號”浮游幼蟲在鹽度8～28時生長較快，對照組在鹽度8～23時生長較快。結(jié)果表明，牡蠣“華南1號”浮游幼蟲生長的適宜鹽度為8～28，最適生長鹽度為13～23；對照組浮游幼蟲生長的適宜鹽度為8～23，最適生長鹽度為13～18。因此，鹽度過高或過低均不適宜牡蠣幼蟲的生長發(fā)育。

2. 4 不同鹽度條件下牡蠣“華南1號”與對照組稚貝時期的生長發(fā)育比較

在不同鹽度條件下，牡蠣“華南1號”與對照組分別經(jīng)過18～19 d和25～27 d的生長發(fā)育，進入附著變態(tài)期，生長速度迅速增加，牡蠣“華南1號”的生長優(yōu)勢開始凸顯。由圖4可知，牡蠣“華南1號”早期稚貝的生長均大于對照組，且差異顯著(P<0.05)。在鹽度15時，牡蠣“華南1號”與對照組的殼長、殼高均最大，牡蠣“華南1號”殼長(5.61±0.33) mm，殼高(5.89±0.45) mm；對照組殼長(5.41±0.58) mm，殼高(5.66±0.44) mm。牡蠣“華南1號”早期稚貝的殼長在鹽度8、28無顯著差異(P>0.05)，其余各鹽度組間均有顯著差異(P<0.05)；殼高除鹽度13、23差異不顯著外(P>0.05)，其余各鹽度組間均差異顯著(P<0.05)。對照組早期稚貝的殼長在每個鹽度組間均有顯著差異(P<0.05)，殼高除了鹽度8、28差異不顯著外(P>0.05)，其余各鹽度組差異顯著(P<0.05)。

日齡Day/d群體Group浮游幼蟲殼高Larvae shell height/mm鹽度3Salinity 3鹽度8Salinity 8鹽度13Salinity 13鹽度15Salinity 15鹽度18Salinity 18鹽度23Salinity 23鹽度28Salinity 28鹽度33Salinity 332華南1號① 60.25±3.63Aa60.86±2.81Aa61.49±2.98Aa61.67±3.26Aa61.59±4.16Aa61.53±3.27Aa61.25±4.50Aa60.89±3.15a對照組② 53.65±5.49Ba55.01±5.54Bb59.13±3.58Ac59.29±2.89Ac59.23±3.64Ac57.72±3.45Bd55.24±3.32Bb—3華南1號① 62.65±3.35Aa67.31±2.55Ab70.56±3.57Ac72.35±3.99Ad71.23±2.45Ac69.15±3.27Ac67.86±3.28Ab63.57±3.36a對照組② 58.26±3.34Ba60.30±3.25Bb66.45±4.09Bc68.82±3.34Bd67.53±2.60Bd63.13±4.28Be61.22±5.51Bb—6華南1號①77.11±7.09Aa84.78±3.64Ab88.11±3.05Ac93.81±3.99Ad90.22±2.64Ae86.18±2.31Af85.07±2.09Ab78.44±3.28a對照組②73.97±2.10Ba79.41±6.51Bb84.52±4.38Bc88.86±3.37Bd86.94±4.72Be82.89±5.08Bf80.18±4.74Bb—9華南1號①97.21±5.21Aa105.33±7.26Ab117.82±7.92Ac121.84±6.34Ad119.86±9.15Ac112.67±5.39Ae108.18±5.12Af99.10±5.70a對照組②81.56±4.07Ba88.45±3.97Bb94.32±6.43Bc99.38±5.97Bd96.89±4.87Be92.41±2.75Bc89.15±3.47Bb—13華南1號①203.13±3.30Aa213.28±3.28Ab226.39±4.21Ac232.38±5.42Ad229.45±4.48Ae225.82±6.32Ac218.23±3.62Af205.51±2.74a對照組②156.15±3.13Ba164.01±4.84Bb174.20±3.26Bc181.82±3.34Bd178.23±3.66Be170.93±3.59Bf167.36±2.61Bb—15華南1號①264.36±3.34a275.92±5.27Ab289.56±4.10Ac297.32±3.11Ad291.64±4.54Ac282.13±4.40Ae279.12±4.83Af—對照組②—200.50±2.24Ba214.53±3.90Bb223.04±3.37Bc219.18±4.41Bd211.34±4.59Bb204.11±3.97Be—17華南1號①—301.48±2.51Aa312.56±1.15Ab321.88±3.26Ac317.14±1.45Ad308.26±1.59Ae303.19±3.01Aa—對照組②—220.71±1.89Ba231.35±2.05Bb245.83±3.34Bc237.17±2.04Bd227.28±2.17Be223.49±2.27Bf—19華南1號①—320.58±2.02Aa337.47±3.41Ab348.26±2.46Ac342.23±3.02Ad328.37±2.56Ae323.15±1.85Af—對照組②—238.53±1.13Ba251.13±2.58Bb267.39±2.57Bc259.56±1.52Bd245.31±1.79Be240.42±3.14Ba—

(同一鹽度，上標(biāo)大寫字母相同表示兩個品種的差異性不顯著(P>0.05)；上標(biāo)大寫字母不同則表示差異性顯著(P<0.05)。同一品種，不同鹽度，上標(biāo)小寫字母相同則表示差異性不顯著(P> 0.05)；上標(biāo)小寫字母不同則表示差異性顯著(P< 0.05)。For the same salinities, the same capitalization of the upper standard indicates that the difference between the two species is not significant (P> 0.05); the difference between the upper and upper capital letters indicates significant difference (P< 0.05). The same species, different salinities, and the same lowercase letters indicate that the difference is not significant (P> 0.05); the difference in the lowercase letters of the superscript indicates that the difference is significant (P< 0.05).)

2.5 不同鹽度條件下牡蠣“華南1號”與對照組幼蟲附著變態(tài)率、稚貝存活率比較

由圖5可知，不同鹽度下，牡蠣“華南1號”附著幼蟲的附著變態(tài)率和稚貝存活率均高于對照組，且牡蠣“華南1號”在鹽度15和18時附著變態(tài)率最高分別達到(85.58±2.89)%和(85.11±3.44)%，存活率分別為(95.88±7.24)%和(92.45±6.23)%；對照組在鹽度13和15的附著變態(tài)率最高分別為(78.35±2.34)%和(76.41±2.59)%，存活率分別為(90.89±8.56)%和(86.23±6.48)%。牡蠣“華南1號”存活率遠高于對照組，且兩群體間存活率差異顯著(P<0.05)。結(jié)果表明，牡蠣“華南1號”的附著變態(tài)率、存活率均表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢。

圖5 不同鹽度下牡蠣“華南1號”與對照組的幼蟲附著變態(tài)率、稚貝存活率比較Fig. 5 Comparison of larva metamorphosis rate and spat survival rate of oyster “South China No. 1” and control group in different salinities

3 討論

3.1 牡蠣“華南1號”的胚胎發(fā)育

在水溫28～29 ℃、pH為8.1～8.2條件下，牡蠣“華南1號”的胚胎和胚后發(fā)育主要經(jīng)歷了早期胚胎發(fā)育期、擔(dān)輪幼蟲期、面盤幼蟲期和稚貝4個時期，與太平洋牡蠣(Crassostreagigas)[18]、香港牡蠣(C.hongkongensis)[19]、等邊淺蛤(Gomphinavenerformis)[20]、墨西哥灣扇貝(Argopectenirradiansconcentricus)[21]、偏頂蛤(Modiolusmodiolus)[22]等雙殼貝類胚胎發(fā)育各階段相似。香港牡蠣在結(jié)束浮游幼蟲期即將進入附著變態(tài)時，鰓基部出現(xiàn)一對黑色眼點，標(biāo)志著幼蟲進入附著變態(tài)，這與扇貝、珍珠貝等許多雙殼貝類的幼蟲附著變態(tài)過程相一致。

鹽度是決定海洋貝類分布并影響其生理代謝的重要環(huán)境因子之一。本研究發(fā)現(xiàn)不同鹽度梯度下“華南1號”的受精率與孵化率均高于對照組，且差異顯著(P<0.05)，牡蠣“華南1號”在鹽度13、15和18時發(fā)育最快，其次是鹽度8、23和28，鹽度3和33組發(fā)育最慢；而對照組在鹽度33時受精未成功，鹽度15時發(fā)育最快，鹽度3和28發(fā)育最慢。研究結(jié)果表明，鹽度過高或過低對受精都存在不良影響，鹽度過高或過低對精子和卵子的滲透壓產(chǎn)生改變，使得精子活力低下，卵子質(zhì)量變差，導(dǎo)致受精發(fā)育受阻。這與李瓊珍等[23]研究鹽度對大獺蛤(LutrariamaximaJanas)胚胎發(fā)育的影響，張炯明等[20]研究溫度和鹽度對等邊淺蛤胚胎和幼蟲生長發(fā)育的影響，Legat J.F.A等[24]研究鹽度對太平洋牡蠣受精和幼貝培育影響的研究結(jié)果相似。本實驗結(jié)果表明，牡蠣“華南1號”的適宜受精鹽度在13～23，對照組的適宜受精鹽度在13～18。

3.2 不同鹽度下牡蠣“華南1號”的幼蟲發(fā)育、稚貝生長

在相同環(huán)境條件下，不同鹽度組牡蠣“華南1號”在幼蟲生長發(fā)育前期比對照組生長速度快，且差異性顯著(P<0.05)。牡蠣“華南1號”生長速率隨鹽度的增加“先增后減”，對照組也有類似的生長表現(xiàn)。在牡蠣幼蟲生長的后期，最低鹽度3和最高鹽度33時，牡蠣“華南1號”與對照組皆出現(xiàn)幼蟲死亡，表明鹽度過高或過低都使幼蟲新陳代謝和攝食無法正常進行，最終導(dǎo)致死亡。這一結(jié)果與楊鵬等[25]在翡翠貽貝(Pernaviridis)和林麗華等[26]在香港巨牡蠣(C.hongkongensis)研究中得到的結(jié)果一致。

進入附著變態(tài)期后，在不同鹽度組、同一附著日齡下，牡蠣“華南1號”各生長指標(biāo)均大于對照組，且牡蠣“華南1號”與對照組的殼長、殼高生長差異顯著(P<0.05)。牡蠣“華南1號”在鹽度8～28時都有較好的生長，且在鹽度13、15和18時生長最快，其次是鹽度8和23；對照組在鹽度13～23生長較好，在鹽度15時生長最快，其次是鹽度13和18，牡蠣“華南1號”適養(yǎng)鹽度較對照組由18提高到23。這與官俊良[27]在香港巨牡蠣人工育苗及其兩個群體雙列雜交的初步研究結(jié)果相似，進一步說明在附著變態(tài)后期牡蠣“華南1號”稚貝對鹽度適應(yīng)性和耐受力增強。

3.3 不同鹽度下牡蠣“華南1號”早期發(fā)育階段的生長規(guī)律

在水溫28～29 ℃、pH 8.1～8.2，鹽度相同時，牡蠣“華南1號”的發(fā)育在前期較對照組慢，后期發(fā)育快于對照組，發(fā)育速度的不同，表明牡蠣“華南1號”具有親本香港牡蠣速生品系的快速生長特性。牡蠣“華南1號”與對照組在早期發(fā)育階段幼蟲的生長速率和存活率均隨著鹽度的增加表現(xiàn)出“先增后減”的特點，高鹽33和低鹽3條件下牡蠣幼蟲生長緩慢且存活率較低。這在雙殼貝類的研究中也有類似結(jié)果，葉樂等[28]對長肋日月貝(Amusiumpleuronectes)幼蟲的研究發(fā)現(xiàn)，鹽度低于20或高于40，D形幼蟲3 d內(nèi)全部死亡。王丹麗等[29]發(fā)現(xiàn)青蛤(Cyclinasinensis)幼蟲的生長率和存活率均隨鹽度的升高先升高再降低。因此，在貝類人工育苗過程中，應(yīng)將鹽度控制在適宜范圍內(nèi)。牡蠣“華南1號”與對照組浮游幼蟲和早期稚貝具有一定的適宜生長鹽度與最適生長鹽度范圍。這一結(jié)果與Helm等[30]、Nell等[31]、劉海濤等[32]的研究結(jié)果相類似。本研究表明，牡蠣“華南1號”在浮游幼蟲和早期稚貝階段生長速度快于對照組，具有明顯的耐高鹽度適宜范圍和生長優(yōu)勢。

今后還需進一步探究牡蠣“華南1號”在不同養(yǎng)殖階段、不同養(yǎng)殖海域環(huán)境下的生長對比，為牡蠣“華南1號”在廣西北部灣海域的引進及推廣養(yǎng)殖提供科學(xué)參考。

4 結(jié)論

本文研究了鹽度對牡蠣“華南1號”早期發(fā)育與生長的影響。研究結(jié)果表明，牡蠣“華南1號”在浮游幼蟲和早期稚貝階段生長速度快于對照組群體，牡蠣“華南1號”在幼蟲發(fā)育階段和早期稚貝的生長速率和存活率均隨著鹽度的增加“先升后降”，高鹽33和低鹽3條件下牡蠣幼蟲生長緩慢且存活率較低。且牡蠣“華南1號”幼蟲和稚貝生長的最適鹽度為13～23；對照組幼蟲和稚貝生長的最適鹽度為13～18。與對照組群體相比，牡蠣“華南1號”的適宜鹽度較對照組由18提高到23，鹽度適應(yīng)范圍廣，且具有明顯的生長優(yōu)勢。