牛羊泰勒蟲(chóng)病的流行、危害、防控技術(shù)及致病機(jī)制研究進(jìn)展

劉軍龍，關(guān)貴全，劉群，李祥瑞，趙俊龍，周金林，張西臣，朱興全，羅建勛

（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所蘭州730046；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院北京100193；3.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院南京210095；4.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院武漢430070；5.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所上海200241；6.吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院長(zhǎng)春130012）

泰勒蟲(chóng)病又稱焦蟲(chóng)病，為梨形蟲(chóng)病的一種，是由泰勒科、泰勒屬的多種泰勒蟲(chóng)感染引發(fā)。該病由媒介蜱叮咬吸血傳播，具有明顯的季節(jié)性，多發(fā)于春秋季節(jié)。

20 世紀(jì)50 至70 年代，牛的泰勒蟲(chóng)病（尤其是環(huán)形泰勒蟲(chóng)?。┰谖覈?guó)的寧夏、內(nèi)蒙、新疆等主要放牧區(qū)流行廣泛，危害猖獗，感染率可達(dá)46.0%，死亡率在11.0%～40.8%之間；外來(lái)牛的發(fā)病率可達(dá)到61%，病死率達(dá)到31%；已有調(diào)查顯示，環(huán)形泰勒蟲(chóng)病在我國(guó)北方13 個(gè)省區(qū)均有分布。隨著疫苗、特效藥、滅蜱等防控技術(shù)的發(fā)展，目前環(huán)形泰勒蟲(chóng)病雖已不像當(dāng)年那樣肆虐流行，但在放牧奶牛、黃牛及新引種牛群中的流行仍十分嚴(yán)重。

羊的泰勒蟲(chóng)病在我國(guó)最早發(fā)現(xiàn)于四川甘孜地區(qū)，此后青海、寧夏、山西等省相繼報(bào)道。70 年代開(kāi)始，對(duì)甘肅省13 個(gè)地區(qū)（州、市）45 個(gè)縣羊泰勒蟲(chóng)病的分布與流行情況進(jìn)行了系統(tǒng)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)在12個(gè)地區(qū)35 個(gè)縣均有分布，在隴南和天水兩地區(qū)的感染率高達(dá)47.0%～86.6%。在本病流行嚴(yán)重的牧區(qū)，羔羊、引種羊、本地成年羊的發(fā)病率分別可達(dá)到78.0%～85.0%、41.0%和9.0%，病死率分別達(dá)到81.4%、62.5%和65.0%，給放牧地區(qū)養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展帶來(lái)嚴(yán)重威脅。

鑒于泰勒蟲(chóng)病的嚴(yán)重危害，本文將從病原學(xué)、流行特點(diǎn)、臨床癥狀、診斷治療、防控方法及致病機(jī)制研究等方面對(duì)牛羊泰勒蟲(chóng)病進(jìn)行介紹。

1 病原學(xué)

在我國(guó)，已報(bào)道牛的泰勒蟲(chóng)病的病原有環(huán)形泰勒蟲(chóng)（theileria annulata）、瑟氏泰勒蟲(chóng)（theileria sergenti）和中華泰勒蟲(chóng)（theileria sinensis）3 個(gè)種。紅細(xì)胞內(nèi)的泰勒蟲(chóng)大小為0.6 ～1.6μm，可呈環(huán)形、梨籽形、圓形、橢圓形、點(diǎn)形、桿形、棒狀、針形、十字架形等，不同種類的病原，其特征形態(tài)及各種形態(tài)蟲(chóng)體的比例不同，普通獸醫(yī)工作者僅僅根據(jù)形態(tài)很難鑒別到具體種類。一般來(lái)說(shuō)，環(huán)形泰勒蟲(chóng)以圓形和梨籽形為主；瑟氏泰勒蟲(chóng)以桿形和針形為主；中華泰勒蟲(chóng)在紅細(xì)胞內(nèi)具有多型性，有梨籽形、圓環(huán)形、橢圓形、桿狀、三葉形、邊蟲(chóng)形和十字架形，還有許多不規(guī)則形狀。牛泰勒蟲(chóng)病在放牧飼養(yǎng)情況下，多由幾種病原共同感染造成。但在封閉飼養(yǎng)情況下，奶?；蛴嗜馀？蓡为?dú)感染一種病原，并發(fā)病致死。

我國(guó)羊泰勒蟲(chóng)病病原的稱呼較為混亂，起初稱為綿羊泰勒蟲(chóng)（theileria ovis）和山羊泰勒蟲(chóng)（theileria hirci）。本世紀(jì)以來(lái)，在18S rRNA 測(cè)序基礎(chǔ)上開(kāi)展了系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系研究，提出綿羊泰勒蟲(chóng)僅存在于新疆，其他省區(qū)流行的病原為呂氏泰勒蟲(chóng)（theileria luwenshuni）和尤氏泰勒蟲(chóng)（theileria uilenbergi）。三種泰勒蟲(chóng)形態(tài)相似，大小為0.8～2.1μm，呈梨籽形、圓形、針形、桿狀、三葉草形、十字架形、逗點(diǎn)形和不規(guī)則形，其中以梨籽形、圓形和針形為主。相對(duì)來(lái)說(shuō)，綿羊泰勒蟲(chóng)致病性較弱，在紅細(xì)胞中呈圓環(huán)形、傘形、逗點(diǎn)形、卵圓形和桿形等形態(tài)。如要對(duì)羊泰勒蟲(chóng)進(jìn)行精確分類，需依靠分子分類學(xué)及特異性的分子檢測(cè)方法。

2 生活史

泰勒蟲(chóng)的生活史主要包括裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖三個(gè)階段。被泰勒蟲(chóng)感染的蜱叮咬動(dòng)物時(shí)，子孢子隨蜱唾液進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)，侵入淋巴樣細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行裂殖生殖，發(fā)育為多核的裂殖體；淋巴細(xì)胞破裂后，釋放出裂殖體內(nèi)的裂殖子，裂殖子侵入紅細(xì)胞內(nèi)，發(fā)育為紅細(xì)胞階段蟲(chóng)體，并以二分裂的方式進(jìn)行增殖。部分紅細(xì)胞內(nèi)蟲(chóng)體發(fā)育為配子前體，當(dāng)幼蜱或若蜱在泰勒蟲(chóng)感染動(dòng)物體表吸血時(shí)，將感染的紅細(xì)胞吸入中腸，泰勒蟲(chóng)開(kāi)始配子生殖。蜱腸道內(nèi)的紅細(xì)胞破裂，釋放出大小配子，大小配子結(jié)合形成合子，進(jìn)而發(fā)育為動(dòng)合子；動(dòng)合子通過(guò)蜱腸管及體腔等組織進(jìn)入蜱的血淋巴，侵入蜱唾液腺腺泡細(xì)胞，發(fā)育為子孢子；當(dāng)蜱再次吸血時(shí)，開(kāi)始孢子生殖，形成大量子孢子，子孢子隨蜱唾液進(jìn)入牛體內(nèi)，開(kāi)始新一輪的繁殖過(guò)程。

3 流行情況

泰勒蟲(chóng)病的發(fā)生與其媒介蜱的分布和生活特性密切相關(guān)，多呈季節(jié)性流行。環(huán)形泰勒蟲(chóng)由殘緣璃眼蜱、小亞璃眼蜱和盾糙璃眼蜱傳播，危害性最大，已在我國(guó)北方13 個(gè)省市報(bào)道。近年流行病學(xué)調(diào)查顯示，廣東和重慶相繼有環(huán)形泰勒蟲(chóng)存在報(bào)道。瑟氏泰勒蟲(chóng)和中華泰勒蟲(chóng)危害性相對(duì)較弱，但在我國(guó)普遍存在，主要由長(zhǎng)角血蜱、青海血蜱和日本血蜱傳播。羊泰勒蟲(chóng)病的主要病原為呂氏泰勒蟲(chóng)和尤氏泰勒蟲(chóng)，其傳播媒介為青海血蜱和長(zhǎng)角血蜱，在我國(guó)北方和南方地區(qū)廣泛分布。綿羊泰勒蟲(chóng)致病性較弱，主要由小亞璃眼蜱傳播，僅在我國(guó)新疆地區(qū)檢測(cè)分離到該病原。

4 臨床癥狀

初期以發(fā)熱為主，體溫升高至40～42℃，呈稽留熱，肩前和股前淋巴結(jié)腫脹是該階段的主要特征。發(fā)病中期，可視黏膜蒼白黃染，反芻次數(shù)減少。在感染后期，病畜顯著消瘦、血液稀薄、反芻次數(shù)進(jìn)一步減少甚至停止。重癥病例經(jīng)3～20d 趨于死亡。

5 病理剖檢變化

病畜消瘦，全身皮下黏膜和漿膜有出血點(diǎn)。淋巴結(jié)腫大，切面多汁，有暗紅色或灰白色結(jié)節(jié)；皮下膠樣浸潤(rùn)，黃染；皺胃黏膜腫脹充血，有針尖大至黃豆大的結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)上部有潰瘍。脾臟腫大，被膜有出血點(diǎn)，髓質(zhì)變軟呈紫黑色。腎臟、肝臟腫大變軟，有暗紅色病灶。

6 診斷和治療

依靠臨床癥狀、病例剖檢、結(jié)合流行病學(xué)（發(fā)病季節(jié)和蜱叮咬情況檢查）可以做出初步診斷；確診需采取耳尖血液制備血涂片，經(jīng)姬姆薩染色后在顯微鏡下通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察細(xì)胞內(nèi)有無(wú)蟲(chóng)體；病原種類確定需借助于分子生物學(xué)檢測(cè)方法。

目前，已發(fā)展了如酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）、膠體金試紙條等血清學(xué)診斷方法，并建立有PCR 方法、熒光定量PCR 方法等分子檢測(cè)方法。這些方法可作為臨床輔助診斷方法，在開(kāi)展動(dòng)物檢疫、血清學(xué)調(diào)查或分子流行病學(xué)調(diào)查時(shí)，可選擇采用。

泰勒蟲(chóng)病的治療多采用貝尼爾（成分為三氮脒）、磷酸伯氨喹啉、黃色素、布帕伐醌和青蒿琥酯等藥物。其中，磷酸伯氨喹啉治療效果最佳，按劑量每天口服1 次，連用3d 可殺傷紅細(xì)胞內(nèi)的泰勒蟲(chóng)裂殖子。目前應(yīng)用最廣泛的藥物是貝尼爾，由于該藥不能完全殺滅動(dòng)物體內(nèi)的蟲(chóng)體，必要的情況下可治療2 個(gè)療程。除應(yīng)用特效藥外，可輔以強(qiáng)心、補(bǔ)液、止血、補(bǔ)血、健胃、疏肝利膽等對(duì)癥治療。

7 防控

牛羊泰勒蟲(chóng)病的防控主要依靠免疫預(yù)防和綜合防控技術(shù)。

目前，針對(duì)泰勒蟲(chóng)病的疫苗，已有商品化的環(huán)形泰勒蟲(chóng)裂殖體膠凍細(xì)胞苗，可于每年3—4 月進(jìn)行接種，免疫期為一年，有效率90%以上，經(jīng)在我國(guó)北方30 余年的推廣使用，有效控制了環(huán)形泰勒蟲(chóng)病的大規(guī)模流行；羊泰勒蟲(chóng)病雖有對(duì)裂殖體苗和重組亞單位疫苗的研究探索，但尚未成功。

以切斷傳播路徑為核心的綜合防控技術(shù)是目前泰勒蟲(chóng)病防控的主要手段。主要包括采用化學(xué)藥物或生物防控制劑對(duì)動(dòng)物體表及環(huán)境進(jìn)行滅蜱；于每年9—10 月份雌蜱產(chǎn)卵季節(jié)對(duì)畜舍墻縫、墻洞進(jìn)行封堵硬化，消滅雌蜱和幼蜱；對(duì)發(fā)病動(dòng)物進(jìn)行自然淘汰、采用長(zhǎng)效藥物進(jìn)行預(yù)防注射、采用特效藥物對(duì)發(fā)病動(dòng)物進(jìn)行治療等方法，以減少帶蟲(chóng)動(dòng)物。

8 泰勒蟲(chóng)致病分子機(jī)制的研究進(jìn)展與展望

泰勒蟲(chóng)病仍然是制約牛羊養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的重要疫病，目前理想疫苗與藥物研究進(jìn)展緩慢最主要的原因在于對(duì)泰勒蟲(chóng)致病機(jī)制的研究不夠深入。鑒于寄生蟲(chóng)病對(duì)我國(guó)牛羊養(yǎng)殖業(yè)的嚴(yán)重危害，國(guó)家科技部2015 年在國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃（973 計(jì)劃）中對(duì)“牛羊重要寄生蟲(chóng)致病機(jī)制的分子基礎(chǔ)”進(jìn)行了立項(xiàng)研究（項(xiàng)目編號(hào)：2015CB150300），其中環(huán)形泰勒蟲(chóng)致病機(jī)制研究是該項(xiàng)目的重要研究?jī)?nèi)容之一。自立項(xiàng)以來(lái)，項(xiàng)目組建立了泰勒蟲(chóng)消減cDNA文庫(kù)，共獲得了有效表達(dá)序列標(biāo)簽364 條；開(kāi)展了感染細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組研究，發(fā)現(xiàn)了10，000 個(gè)上調(diào)或下調(diào)基因；發(fā)現(xiàn)了多個(gè)環(huán)形泰勒蟲(chóng)與宿主細(xì)胞互作的分子，確定環(huán)形泰勒蟲(chóng)TaCP 蛋白與宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)化相關(guān)；證實(shí)了環(huán)形泰勒蟲(chóng)感染宿主細(xì)胞后TLRs 和NLRs 信號(hào)通路的改變，并對(duì)環(huán)形泰勒蟲(chóng)毒力因子SVSP 蛋白家族成員進(jìn)行了解析；探索了環(huán)形泰勒蟲(chóng)裂殖體感染細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)方法。這些階段性研究成果為泰勒蟲(chóng)病新型疫苗和新型藥物創(chuàng)制提供重要的理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)。█