非洲豬瘟疫苗研發(fā)取得重大突破成功之路依然任重道遠(yuǎn)

本刊編輯/ 張金輝

編者按：自2018年8月以來，我國所有已經(jīng)發(fā)生的非洲豬瘟疫情都已經(jīng)得到有效的處置。目前，我國非洲豬瘟疫情發(fā)生趨勢(shì)已經(jīng)明顯減緩、趨于穩(wěn)定，但世界各國仍不時(shí)有非洲豬瘟疫情出現(xiàn)，由于國際交流頻繁，特別是來自疫情嚴(yán)重國家的人員會(huì)攜帶病毒，導(dǎo)致疫情有跨國傳播的危險(xiǎn)，所以，我們決不能麻痹松懈、掉以輕心。在非洲豬瘟疫情很難根治的背景下，養(yǎng)豬企業(yè)要實(shí)時(shí)做好非洲豬瘟疫情的生物安全防控工作，防止疫情再次暴發(fā)而造成不必要的損失。對(duì)于病毒性疫病的防控，疫苗仍然是最佳的有效武器，如果能成功研發(fā)出非洲豬瘟疫苗，那么很多豬場的悲劇可能就不會(huì)再上演，近期我國非洲豬瘟疫苗的研發(fā)雖然取得了階段性的進(jìn)展，但非洲豬瘟疫苗研發(fā)是一個(gè)世界性難題,到目前為止全球仍然沒有任何一種非洲豬瘟疫苗被批準(zhǔn)上市。

非洲豬瘟疫情仍在世界蔓延

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒感染家豬和各種野豬（非洲野豬、歐洲野豬等）引起的一種急性、出血性、烈性傳染病。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列為法定報(bào)告的動(dòng)物疫病，我國將其列為一類動(dòng)物疫情。非洲豬瘟潛伏期短、發(fā)病過程快和感染死亡率高，主要是通過接觸或采食受非洲豬瘟病毒污染的物品而經(jīng)口傳染或通過昆蟲吸血而傳染。短距離內(nèi)可經(jīng)空氣傳播，污染的飼料、泔水、剩菜及肉屑、欄舍、車輛、器具和衣物等均可間接傳播本病。

相關(guān)資料顯示，20 世紀(jì)初非洲豬瘟在非洲被首次發(fā)現(xiàn)，此后該疫情在非洲各國不斷暴發(fā)。1957 年非洲豬瘟首次沖出非洲傳入歐洲出現(xiàn)在葡萄牙，1960 年傳入西班牙，1964 年在法國暴發(fā)，1967 年侵入意大利，1978 年在馬耳他和撒丁島被發(fā)現(xiàn)，1985 年比利時(shí)和荷蘭也出現(xiàn)疫情(20 世紀(jì)70 年代還曾傳入原蘇聯(lián))。1971年，非洲豬瘟侵入西半球，在古巴暴發(fā)，1978 年傳到巴西，1979 年出現(xiàn)在多米尼加和海地。2007 年，傳入了格魯吉亞、亞美尼亞和俄羅斯，2008 年傳入了阿塞拜疆和伊朗。2012 年，傳入烏克蘭。2014 年，立陶宛、波蘭、拉脫維亞也發(fā)現(xiàn)了非洲豬瘟。2017 年3 月，俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)伊爾庫茨克州發(fā)生非洲豬瘟疫情，疫情發(fā)生地距離我國較近，僅為1 000 km 左右。隨著我國與多個(gè)國家貿(mào)易頻繁，非洲豬瘟傳入風(fēng)險(xiǎn)日益加大，對(duì)此，2017 年4 月12 日，我國原農(nóng)業(yè)部發(fā)布了關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)非洲豬瘟風(fēng)險(xiǎn)防范工作的緊急通知。然而，在2018年8 月3 日，基于國家外來動(dòng)物疫病研究中心病原學(xué)檢測結(jié)果，8 月3 日遼寧沈陽該養(yǎng)殖戶疫情被確認(rèn)為由非洲豬瘟病毒引發(fā)，成為中國確認(rèn)的首例非洲豬瘟發(fā)病記錄，標(biāo)志著這個(gè)在某些國家已肆虐近百年的生豬殺手傳入中國。

從國際情況來看，近幾個(gè)月，國際上非洲豬瘟疫情不斷發(fā)生，2019 年5 月16、22 日，拉脫維亞農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)服務(wù)局通報(bào)，坎達(dá)瓦市、布爾特涅機(jī)市和斯克倫達(dá)市等5 地發(fā)生8 起野豬非洲豬瘟疫情，10 頭野豬感染，4 頭死亡，6 頭被撲殺。2019 年5 月20 日，羅馬尼亞國家獸醫(yī)衛(wèi)生和食品安全管理局通報(bào)，比霍爾縣、薩圖馬雷縣、康斯坦察縣、佛朗恰縣等6 地發(fā)生5 起野豬和3 起家豬非洲豬瘟疫情，6 頭野豬感染死亡，18 頭家豬感染，8 頭死亡，10 頭被撲殺。2019 年5 月20 日，越南農(nóng)業(yè)和農(nóng)村發(fā)展部通報(bào)，山蘿省等7 地發(fā)生420 起家豬非洲豬瘟疫情，23.3 萬頭家豬被撲殺。2019 年8 月14 日，緬甸官方向世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）通報(bào)，該國境內(nèi)近期發(fā)生1 起非洲豬瘟疫情。2019 年9 月29 日匈牙利國家食品安全局表示，當(dāng)局在靠近首都布達(dá)佩斯的野豬尸體中，發(fā)現(xiàn)5 起非洲豬瘟病例。2019 年10月9 日韓國農(nóng)林畜產(chǎn)食品部表示，京畿道漣川郡身西面（鄉(xiāng)）一家養(yǎng)豬場確診發(fā)生非洲豬瘟疫情，由此韓國非洲豬瘟病例增至14 例?！侵挢i瘟疫情仍活躍于世界各國，防控疫情尚需全球共同努力。

從國內(nèi)情況來看，我國自發(fā)生首例非洲豬瘟疫情以來，31 個(gè)省市自治區(qū)都有疫情報(bào)告。從公布的疫情數(shù)據(jù)來看（見圖1），2019 年入夏以來我國非洲豬瘟疫情暴發(fā)數(shù)量比去年剛發(fā)生時(shí)明顯減少，疫情已經(jīng)得到有效控制，總體形勢(shì)趨于穩(wěn)定，生豬生產(chǎn)正在逐步恢復(fù)，但仍要時(shí)刻警惕疫情再發(fā)生的隱患、風(fēng)險(xiǎn)。

非洲豬瘟疫苗研發(fā)困難重重

圖1 我國每半月非洲豬瘟疫情報(bào)告起數(shù)（2018 年8 月3 日—2019 年8 月27 日）

已經(jīng)肆虐百年的非洲豬瘟，到目前為止國內(nèi)外均沒有有效的非洲豬瘟疫苗，究其主要原因是由其病原生物學(xué)特性決定的。非洲豬瘟病毒是由病毒污染物，直接與動(dòng)物發(fā)生接觸和含有污染病毒的殘羹喂養(yǎng)豬等傳播途徑進(jìn)行傳播的?？稍谪i體內(nèi)大量繁殖，病毒可以達(dá)到很高的濃度。這種病毒在自然環(huán)境中相當(dāng)穩(wěn)定，即使在鹽腌肉和干肉中存放數(shù)周仍具有感染性，在冷凍的豬肉中則可以保持存活數(shù)年。這就是在所有受感染豬被撲殺的疫區(qū)，甚至在遠(yuǎn)離初次疫情的地區(qū)，都疫情再次暴發(fā)的原因。非洲豬瘟病毒生物學(xué)特性復(fù)雜，對(duì)其誘導(dǎo)的免疫保護(hù)及免疫逃逸機(jī)制研究十分有限；其基因組龐大，有超過一半的基因功能未知，保護(hù)性抗原基因研究不足，已知基因的功能研究也十分薄弱。非洲豬瘟病毒會(huì)以2 種不同的形式出現(xiàn)，一種生活在細(xì)胞內(nèi)，另一種生活在細(xì)胞外，并且2 種形式都具有感染性。后者集中在宿主細(xì)胞表面，免疫系統(tǒng)將其大部分都視為自身細(xì)胞。在存活的動(dòng)物中，可以產(chǎn)生針對(duì)部分病毒蛋白的高抗體，但它們均無法有效阻斷感染。病毒設(shè)法使某些抗原對(duì)免疫細(xì)胞具有吸引力，從而使其他更關(guān)鍵的致病蛋白質(zhì)無法被免疫系統(tǒng)識(shí)別而隱匿起來。病毒的隱藏使得疫苗的研發(fā)變得異常困難。同時(shí)，非洲豬瘟病毒活病毒的操作需在生物安全三級(jí)以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但當(dāng)下缺乏經(jīng)濟(jì)便捷的小動(dòng)物模型，而且病毒的增殖、分離需要用豬原代細(xì)胞，費(fèi)用較高；缺乏穩(wěn)定、良好的疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系，同時(shí)非洲豬瘟有24 個(gè)基因型，與其他DNA 病毒相比易于變異，且不同基因型之間生物學(xué)特性有一定差異；病毒致弱與免疫保護(hù)之間也難以平衡。

目前全球至少8 個(gè)國家15 個(gè)研究機(jī)構(gòu)正致力于非洲豬瘟疫苗研發(fā)，國外研究機(jī)構(gòu)先后嘗試了滅活疫苗、亞單位疫苗、核酸疫苗、病毒活載體疫苗、減毒活疫苗和基因缺失疫苗等各種類型疫苗的研發(fā)，現(xiàn)階段已研制的一些非洲豬瘟疫苗，雖然能誘導(dǎo)產(chǎn)生一定水平的抗體，但并不具備中和非洲豬瘟病毒的能力，無法達(dá)到有效防控非洲豬瘟的目的。

非洲豬瘟疫苗研發(fā)取得重大突破 上市應(yīng)用仍需時(shí)日

2019 年9 月10 日，在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院召開的非洲豬瘟防控與生豬復(fù)養(yǎng)技術(shù)推介會(huì)上，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院宣布，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所非洲豬瘟疫苗研制工作在2019 年4 月實(shí)驗(yàn)室研究工作取得成功后，2019 年8 月疫苗研發(fā)工作又取得了新的重要進(jìn)展。在前期基因缺失疫苗自主研發(fā)工作的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步篩選出一株非洲豬瘟雙基因缺失弱毒活疫苗，現(xiàn)階段已經(jīng)完成了實(shí)驗(yàn)室研究，突破了以原代骨髓巨噬細(xì)胞實(shí)現(xiàn)疫苗規(guī)模化生產(chǎn)的重大技術(shù)瓶頸，完成了獸藥GMP 條件下的中間產(chǎn)品制備和檢驗(yàn)，近期已向農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出生物安全評(píng)價(jià)申請(qǐng)，即將進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。對(duì)于養(yǎng)豬企業(yè)來說，非洲豬瘟疫苗即將開始臨床試驗(yàn)，這確實(shí)是個(gè)好消息。然而，臨床研究階段是疫苗研發(fā)最關(guān)鍵階段，同時(shí)也是風(fēng)險(xiǎn)和困難最大的階段。此前歐洲創(chuàng)制的減毒疫苗也是在臨床階段發(fā)現(xiàn)具有副作用、不能阻絕疫病傳染等諸多問題。因此進(jìn)入臨床并不等同于非洲豬瘟疫苗能夠在短期內(nèi)上市。依據(jù)《獸藥注冊(cè)辦法》《新獸藥研制管理辦法》等法規(guī)，國內(nèi)新獸藥的研發(fā)與注冊(cè)，需要經(jīng)歷很多的流程。實(shí)驗(yàn)室研究完成之后將進(jìn)入中試研究，中試方案成熟后提交臨床試驗(yàn)審批，審批通過后需要進(jìn)行為期2 到3 年的臨床試驗(yàn)，臨床試驗(yàn)結(jié)束后才能進(jìn)入新獸藥注冊(cè)階段。同時(shí)，新獸藥注冊(cè)還需要經(jīng)過技術(shù)評(píng)審、樣品符合檢驗(yàn)、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部審查等多個(gè)階段。所以，非洲豬瘟疫苗距離真正的疫苗上市，尚需較長時(shí)間。

農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局負(fù)責(zé)人表示，截至目前，包括中國在內(nèi)的世界各國還未有一個(gè)批準(zhǔn)上市銷售使用的非洲豬瘟疫苗。目前市面上出現(xiàn)的所謂 “非洲豬瘟中試苗、自家苗，甚至走私苗”，既缺乏系統(tǒng)的試驗(yàn)研究，更沒有通過科學(xué)、客觀、嚴(yán)格的評(píng)審評(píng)價(jià)，其安全性和有效性都無法保證，特別是活疫苗，更是可能存在不可預(yù)知的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。按照《獸藥管理?xiàng)l例》規(guī)定都屬于非法疫苗，請(qǐng)廣大養(yǎng)豬企業(yè)一定要注意，養(yǎng)豬場( 戶) 如使用這樣的疫苗對(duì)生豬進(jìn)行免疫，不僅可能達(dá)不到預(yù)期的免疫預(yù)防效果，更有可能因非法免疫接種導(dǎo)致豬群感染并引發(fā)疫病傳播。雖然大家期盼已久的救命稻草——非洲豬瘟疫苗在短期內(nèi)不會(huì)上市，但有一點(diǎn)可以肯定，只要我們做好非洲豬瘟的生物安全防控及早期檢測和嚴(yán)格的撲殺等措施，非洲豬瘟還是可防可控的。