• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于穩(wěn)定性同位素的有機(jī)質(zhì)分解測定在生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

    2019-11-28 06:45:08唐建軍
    實(shí)驗(yàn)技術(shù)與管理 2019年11期
    關(guān)鍵詞:同位素穩(wěn)定性葉片

    何 磊,陳 欣,唐建軍

    基于穩(wěn)定性同位素的有機(jī)質(zhì)分解測定在生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

    何 磊,陳 欣,唐建軍

    (浙江大學(xué) 國家級(jí)生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心,浙江 杭州 310058)

    穩(wěn)定性同位素技術(shù)是生態(tài)學(xué)的重要研究手段,該文將穩(wěn)定性同位素技術(shù)應(yīng)用于生態(tài)學(xué)開放實(shí)驗(yàn)教學(xué),設(shè)計(jì)了基于穩(wěn)定性同位素的有機(jī)質(zhì)分解測定實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)探究性強(qiáng),學(xué)生參與度高,拓寬了學(xué)生對(duì)生態(tài)學(xué)研究方法的認(rèn)知,有助于學(xué)生了解穩(wěn)定性同位素技術(shù)在生態(tài)學(xué)研究領(lǐng)域中的應(yīng)用,同時(shí)大大提高了學(xué)生設(shè)計(jì)、參與相關(guān)生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)的能力。

    穩(wěn)定性同位素;有機(jī)質(zhì)分解;生態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué);穩(wěn)定性氮同位素;穩(wěn)定性碳同位素

    土壤有機(jī)質(zhì)是一種復(fù)雜的混合物,包括單分子物質(zhì)如氨基酸、單糖等,多分子物質(zhì)如纖維素、蛋白質(zhì)、木質(zhì)素等,以及植物殘?bào)w和微生物殘留物等,是植物養(yǎng)分的主要來源之一[1-3]。土壤碳氮是全球碳氮循環(huán)的一個(gè)重要組成部分[4-5],土壤所貯存的碳含量達(dá)到地球植物和大氣總和的2倍[6],土壤中能被植物直接吸收的氮主要包括NH4+-N和NO3--N、有機(jī)氮和微生物氮等[5,7]。在陸地生態(tài)系統(tǒng)中,植物同化物主要以植物凋落物(掉落的葉片以及死根)和根系分泌物的形式進(jìn)入土壤,約占植物每年生產(chǎn)量的90%,成為土壤分解系統(tǒng)中有機(jī)質(zhì)的主要成分[8]。

    土壤有機(jī)質(zhì)的分解受到多重因素的影響,包括該地區(qū)的氣候條件、土壤的理化性質(zhì)、植物根系分泌物,以及凋落物成分、土壤微生物群落等[9]。另外,植物的種類和多樣性也在一定程度上影響土壤有機(jī)質(zhì)的分解[10]。土壤有機(jī)質(zhì)的分解和復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程是在微生物的作用下完成的,包括礦質(zhì)化和腐殖化過程。了解土壤中有機(jī)質(zhì)分解過程,有助于了解土壤碳動(dòng)力學(xué),從而有助于研究全球碳氮循環(huán)過程[11]。

    穩(wěn)定性同位素示蹤技術(shù)是利用經(jīng)富集的稀有穩(wěn)定性同位素作為示蹤劑研究相關(guān)領(lǐng)域科學(xué)問題的技術(shù),包括生態(tài)學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、水文科學(xué)、地球科學(xué)等[3,12-13]。目前,穩(wěn)定性同位素技術(shù)已成為生態(tài)學(xué)研究領(lǐng)域一項(xiàng)重要的研究手段,其中15N和13C穩(wěn)定性同位素可以精確可靠地分析養(yǎng)分在遷移與轉(zhuǎn)化過程中的變化,因此被廣泛應(yīng)用于生態(tài)系統(tǒng)、全球碳氮循環(huán)、農(nóng)業(yè)物種互惠等方面的研究[3,12,14-15]。

    基于穩(wěn)定性同位素的有機(jī)質(zhì)分解測定,是“生態(tài)學(xué)”實(shí)驗(yàn)課程中針對(duì)生態(tài)學(xué)專業(yè)本科生開設(shè)的科研訓(xùn)練實(shí)驗(yàn),具有綜合開放和注重科研思維訓(xùn)練的特點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)歷時(shí)一個(gè)半月,學(xué)生通過課程學(xué)習(xí)、文獻(xiàn)查閱、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及操作、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析等,完成了較為系統(tǒng)的科研基礎(chǔ)訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,學(xué)生共享實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、分組撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,最終進(jìn)行PPT總結(jié)匯報(bào)。該實(shí)驗(yàn)有助于學(xué)生建立科學(xué)研究思維、培養(yǎng)團(tuán)隊(duì)合作精神,并為日后進(jìn)行相關(guān)科學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。

    1 實(shí)驗(yàn)原理

    1.1 15N的測定與計(jì)算[16]

    15N的同位素值(δ)的計(jì)算公式如下:

    其中,sample是樣本樣品的重同位素(15N)與輕同位素(14N)的豐度比;standard是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(大氣N2)的重同位素(15N)與輕同位素(14N)的豐度比,為固定值0.003 676 5。

    1.2 13C的測定與計(jì)算

    13C的同位素值(δ)的計(jì)算公式為:

    其中,sample是樣本樣品的重同位素(13C)與輕同位素(12C)的豐度比;standard是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(Pee Dee Belemnite)的重同位素(13C)與輕同位素(12C)的豐度比,為固定值0.011 237 2。

    2 實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備

    實(shí)驗(yàn)材料包括:富集13C-15N的玉米葉片,尼龍膜25 μm,河沙(20~100目,粒徑相似);儀器設(shè)備包括:天平及分析天平,培養(yǎng)皿,玻璃棒,藥匙,分解袋(需提前制作),橡皮筋,行星式球磨儀(飛馳,PULVERISETTE6),同位素質(zhì)譜儀(美國,Thermo Fisher Delta V Advantage),超微量電子天平(METTLER TOLEDO XP6)。

    3 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟

    本實(shí)驗(yàn)以13C 和15N同位素雙標(biāo)記的玉米葉片作為分解材料,測定不同土壤鹽分濃度(0.5‰、2‰、5‰)下植物種植與否(有檉柳、無檉柳)對(duì)土壤中有機(jī)物(玉米葉片)分解速率的影響。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將含有玉米葉片的尼龍網(wǎng)袋(分解袋)埋入經(jīng)不同處理的盆栽土壤中,1個(gè)月后測定分解袋中13C和15N的剩余含量。

    實(shí)驗(yàn)采用雙因素完全隨機(jī)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),設(shè)置3個(gè)鹽分梯度(0.5‰、2‰、5‰)和植物種植與否(有檉柳、無檉柳)2個(gè)因素,每個(gè)處理設(shè)置5個(gè)重復(fù),所有盆栽完全隨機(jī)放置。同時(shí)設(shè)置不埋入土中的空白對(duì)照10個(gè),共計(jì)40個(gè)分解袋。

    3.1 實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備

    玉米種植在溫室周轉(zhuǎn)箱中,玉米拔節(jié)期后向土壤中加入15N豐度為98%的硫酸銨溶液。在孕蕙期前收獲葉片。將收獲的玉米葉片于105 ℃下殺青15 min,再移至烘箱中65 ℃烘干至恒重。由于玉米為C4植物,其葉片自然富集13C,在生長過程中不另外加富13C。

    3.2 分解袋的制備

    將烘干的玉米葉片混合剪成長×寬為5 mm×3 mm的碎片,并混合均勻,保證裝入每個(gè)分解袋的葉片大小、形狀、分布基本一致。準(zhǔn)確稱取0.5 g碎玉米葉片和65 ℃烘干且粒徑相似(20~100目)的過篩河沙25 g于培養(yǎng)皿中(f90 mm),并加入2 mL超純水混合均勻。用藥匙將混勻后的河沙玉米葉裝入事先備好的分解袋中(分解袋裁成14 cm×14 cm大小后制袋),壓實(shí)后用橡皮筋扎緊封口待用。將制作好的分解袋做好鹽濃度(空白對(duì)照、0.5‰、2‰、5‰)標(biāo)記和植物(空白對(duì)照、有檉柳、無檉柳)標(biāo)記。

    3.3 分解袋埋放

    按照分解袋上的標(biāo)記將分解袋分別埋放在對(duì)應(yīng)處理的盆栽中,一個(gè)盆栽對(duì)應(yīng)一個(gè)分解袋,并貼好標(biāo)簽。在盆栽土壤中挖掘直徑約5 cm、深約12 cm的洞,放入分解袋,分解袋頂端距離土壤表層約5 cm,再將表層土覆蓋好、壓實(shí)。其余10個(gè)空白對(duì)照分解袋不埋入土中,于–40℃以下保存待用。對(duì)埋有分解袋的盆栽每周按需澆水,保持土壤濕潤。

    3.4 樣品回收預(yù)處理與上機(jī)測定

    1個(gè)月后將分解袋取出,干燥至恒重。將分解袋中的剩余樣品全部取出,放入行星式球磨儀中充分研磨,然后用超微量天平稱取研磨樣品,利用同位素質(zhì)譜儀測定同位素含量。

    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

    4.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算

    同位素測定數(shù)據(jù)見圖1,公式中數(shù)據(jù)由同位素質(zhì)譜儀直接測得。計(jì)算分解袋中重同位素的含量[16]:

    計(jì)算玉米葉片的分解率(其中ck表示對(duì)照組):

    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

    雙因素方差分析表明,種植植物顯著提高了玉米葉片的分解率(15N:F=9.43,<0.01;13C: F=4.94,<0.05),鹽濃度對(duì)葉片分解率的影響不顯著(15N:F=1.08,>0.05;13C: F=0.95,>0.05),鹽濃度與植物的交互作用對(duì)分解率的影響不顯著(15N:F=0.074,>0.05;13C: F=0.4656,>0.05)。其中,15N結(jié)果表明,種植植物對(duì)分解率的影響極顯著(<0.01),見圖2;13C結(jié)果表明,種植植物對(duì)分解率的影響顯著(<0.05),見圖3。

    圖2 不同處理下玉米葉片中15N的分解率

    5 結(jié)語

    穩(wěn)定性同位素技術(shù)是近年來生態(tài)學(xué)科中興起的一項(xiàng)新型研究手段[17],已應(yīng)用于土壤碳氮循環(huán)、生態(tài)系統(tǒng)食物鏈結(jié)構(gòu)和能量流動(dòng),以及傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中資源的互補(bǔ)利用等研究領(lǐng)域[3,14-15]。

    圖3 不同處理下玉米葉片中13C的分解率

    在生態(tài)學(xué)本科實(shí)驗(yàn)中,將13C、15N同位素技術(shù)用于有機(jī)質(zhì)分解研究,探討土壤中有機(jī)物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化動(dòng)態(tài),是研究簡單的碳氮循環(huán)過程的一個(gè)良好模型。通過該實(shí)驗(yàn),學(xué)生不僅可以學(xué)習(xí)同位素質(zhì)譜儀的使用方法、樣品處理方法以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析等一系列的實(shí)驗(yàn)操作技能,還能更直觀地了解生態(tài)學(xué)相關(guān)設(shè)計(jì)思路及實(shí)驗(yàn)方法,鍛煉實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力和生態(tài)學(xué)思維能力,為今后的科研工作打下基礎(chǔ)。該實(shí)驗(yàn)需要全體學(xué)生共同參與分解袋的制作、實(shí)驗(yàn)期間的管理、樣品的預(yù)處理及最終數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析等,鍛煉了學(xué)生團(tuán)結(jié)協(xié)作的能力,以及分析問題和解決問題的能力。此外,該實(shí)驗(yàn)對(duì)于進(jìn)一步提高學(xué)生設(shè)計(jì)生態(tài)學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)?zāi)芰傲私庀嚓P(guān)生態(tài)學(xué)研究方法具有重要意義。

    [1] WEIL R R, MAGDOFF F. Significance of soil organic matter to soil quality and health. In: Magdoff F, Weil RR (Eds.), Soil Organic Matter in Sustainable Agriculture [M]. Boca Raton: CRC Press, 2004.

    [2] 孫尚華.土壤碳、氮循環(huán)對(duì)全球環(huán)境因子變化的響應(yīng):土地利用類型、N沉積和氣候變暖對(duì)土壤C、N循環(huán)的影響[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2014.

    [3] 田秋香,張威,閆穎,等.穩(wěn)定性同位素技術(shù)在土壤重要有機(jī)組分循環(huán)轉(zhuǎn)化研究中的應(yīng)用[J].土壤,2011, 43(6): 862–869.

    [4] JAMES TW, GEORGE A. KOWALCHUK, R A, et al. Summer warming accelerates sub-arctic peatland nitrogen cycling without changing enzyme pools or microbial community structure[J]. Global Change Biology, 2012, 18(1): 138–150.

    [5] 宋長春,宋艷宇,王憲偉,等.氣候變化下濕地生態(tài)系統(tǒng)碳、氮循環(huán)研究進(jìn)展[J].濕地科學(xué),2018, 16(3): 424–431.

    [6] SCHLESINGER W H, ANDREWA J A. Soil respiration and the global carbon cycle[J]. Biogeochemistry, 2000, 48(1): 7–20.

    [7] 李玉中,王慶鎖,鐘秀麗,等.羊草草地植被:土壤系統(tǒng)氮循環(huán)研究[J].植物生態(tài)學(xué)報(bào),2003, 27(2): 177–182.

    [8] GESSNER M O, SWAN C M, DANG C K, et al. Diversity meets decomposition[J]. Trends In Ecology & Evolution, 2010, 25(6): 372–380.

    [9] CONANT R T, RYAN M G, AGREN G I, et al. Temperature and soil organic matter decomposition rates-synthesis of current knowledge and a way forward[J]. Global Change Biology, 2011, 17(11): 3392–3404.

    [10] STEINBEISS S, BEβler H, ENGELS C, et al. Plant diversity positively affects short-term-soil carbon storage in experimental grasslands[J]. Global Change Biology, 2008,14(12): 2937–2949.

    [11] CESARZ S, FENDER A C, BEYER F, et al. Roots from beech (.) and ash (.) differentiallyaffect soil microorganisms and carbon dynamics[J]. Soil Biology & Biochemistry, 2013, 61: 23–32.

    [12] 雷帥,何春霞,張勁松,等.穩(wěn)定碳同位素技術(shù)在生態(tài)系統(tǒng)研究中的應(yīng)用[J]. 同位素,2019, 32(1): 1–11.

    [13] 張勝.同位素示蹤技術(shù)的原理及應(yīng)用闡釋[J].生物學(xué)教學(xué),2018, 43(8):79–80.

    [14] 袁宇翔.基于C、N穩(wěn)定同位素技術(shù)的興凱湖食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)研究[D].長春:中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所),2018.

    [15] 胡亮亮.農(nóng)業(yè)生物種間互惠的生態(tài)系統(tǒng)功能[D]. 杭州:浙江大學(xué),2014.

    [16] CHENG L, BOOKER F L, TU C, et al. Arbuscular Mycorrhizal Fungi Increase Organic Carbon Decomposition Under Elevated CO2[J]. Science, 2012, 337(6098): 1084–1087.

    [17] 林光輝.穩(wěn)定同位素生態(tài)學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2013.

    Application of determination of organic matter decomposition based on stable isotope in ecological experiment teaching

    HE Lei, CHEN Xin, TANG Jianjun

    (National Biological Experimental Teaching Demonstration Center, Zhejiang University, Hangzhou 310058, China)

    Stable isotope technology is an important research means of ecology. In this paper, the stable isotope technology is applied to the open experiment teaching of ecology, and the experiment of organic matter decomposition based on stable isotope is designed. This experiment has strong inquiry with high students’ participation, which broadens students’ understanding of ecological research methods, helps them to understand the application of stable isotope technology in the field of ecological research, and greatly improves their ability to design and participate in relevant ecological experiments.

    stable isotope; organic decomposition; ecological experiment teaching; stable nitrogen isotope; stable carbon isotope

    G642.423

    A

    1002-4956(2019)11-0174-03

    10.16791/j.cnki.sjg.2019.11.042

    2019-03-22

    浙江大學(xué)通識(shí)教育改革項(xiàng)目(2018);“物種多樣性維持稻田系統(tǒng)產(chǎn)量和土壤肥力穩(wěn)定性的生態(tài)學(xué)機(jī)理”國際合作項(xiàng)目(31661143001);黃河三角洲生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金項(xiàng)目(2016KFJJ02)

    何磊(1987—),女,浙江金華,博士,實(shí)驗(yàn)師,主要研究方向?yàn)樯鷳B(tài)學(xué)和實(shí)驗(yàn)室管理與建設(shè)。E-mail: helei8705@zju.edu.cn

    猜你喜歡
    同位素穩(wěn)定性葉片
    月季葉片“雕刻師”
    兩種噴涂方法在TRT葉片上的對(duì)比應(yīng)用及研究
    非線性中立型變延遲微分方程的長時(shí)間穩(wěn)定性
    半動(dòng)力系統(tǒng)中閉集的穩(wěn)定性和極限集映射的連續(xù)性
    深空探測用同位素電源的研究進(jìn)展
    基于CFD/CSD耦合的葉輪機(jī)葉片失速顫振計(jì)算
    《同位素》(季刊)2015年征訂通知
    同位素(2014年3期)2014-06-13 08:22:28
    硼同位素分離工藝與生產(chǎn)技術(shù)
    同位素(2014年2期)2014-04-16 04:57:15
    穩(wěn)定同位素氘標(biāo)記蘇丹紅I的同位素豐度和化學(xué)純度分析
    同位素(2014年2期)2014-04-16 04:57:12
    模糊微分方程的一致穩(wěn)定性
    久久热精品热| 欧美一区二区国产精品久久精品| a在线观看视频网站| 成人鲁丝片一二三区免费| 天堂av国产一区二区熟女人妻| av福利片在线观看| 亚洲美女视频黄频| videossex国产| 极品教师在线视频| 少妇高潮的动态图| 最好的美女福利视频网| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲成人中文字幕在线播放| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 色噜噜av男人的天堂激情| 五月伊人婷婷丁香| 啪啪无遮挡十八禁网站| 婷婷丁香在线五月| 伦理电影大哥的女人| 深夜a级毛片| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 成人av在线播放网站| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美zozozo另类| 国产精品伦人一区二区| 黄色一级大片看看| 99久久精品热视频| av视频在线观看入口| 免费看av在线观看网站| av在线亚洲专区| 亚洲精品在线观看二区| 国产精品女同一区二区软件 | 黄色一级大片看看| 久久这里只有精品中国| 日日干狠狠操夜夜爽| 成人二区视频| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲自拍偷在线| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| 久9热在线精品视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲av二区三区四区| avwww免费| 欧美在线一区亚洲| 级片在线观看| 亚洲成人久久性| 亚洲av成人av| 热99re8久久精品国产| 真人做人爱边吃奶动态| 日本五十路高清| 久久久精品欧美日韩精品| 国产中年淑女户外野战色| 可以在线观看毛片的网站| 国产高潮美女av| 久久人人爽人人爽人人片va| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品电影一区二区三区| 日本与韩国留学比较| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产亚洲精品av在线| 日本五十路高清| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲欧美激情综合另类| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国产高清有码在线观看视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品 | 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 免费在线观看日本一区| av天堂在线播放| 国产一区二区三区视频了| 久久99热6这里只有精品| 久久九九热精品免费| 桃红色精品国产亚洲av| 99在线视频只有这里精品首页| 如何舔出高潮| 免费在线观看日本一区| 少妇高潮的动态图| 国内精品美女久久久久久| 国产 一区精品| 久久精品影院6| 久久久久久久精品吃奶| 午夜激情欧美在线| 国产精品永久免费网站| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 五月伊人婷婷丁香| 禁无遮挡网站| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品一区二区三区人妻视频| 91久久精品国产一区二区三区| 久久久久性生活片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 精品乱码久久久久久99久播| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲成av人片在线播放无| 午夜福利18| 男女之事视频高清在线观看| 高清在线国产一区| 国产乱人视频| 亚洲av熟女| 直男gayav资源| 熟女电影av网| 综合色av麻豆| 女的被弄到高潮叫床怎么办 | 免费大片18禁| 午夜久久久久精精品| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产亚洲欧美98| 免费看光身美女| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 在线观看午夜福利视频| 麻豆一二三区av精品| 久久热精品热| 男女之事视频高清在线观看| 天堂影院成人在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 欧美在线一区亚洲| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产一区二区在线观看日韩| 成年人黄色毛片网站| 中文字幕高清在线视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 在线观看午夜福利视频| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 精品一区二区免费观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 91狼人影院| avwww免费| 日本一二三区视频观看| 午夜视频国产福利| 婷婷六月久久综合丁香| 在线免费观看不下载黄p国产 | 97热精品久久久久久| 中文字幕久久专区| 国产精品无大码| 免费人成视频x8x8入口观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 免费观看在线日韩| 国产黄色小视频在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 99久久九九国产精品国产免费| 我的女老师完整版在线观看| 热99re8久久精品国产| 日本熟妇午夜| 我的女老师完整版在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 五月玫瑰六月丁香| 国产精品久久久久久久久免| 免费在线观看影片大全网站| 丝袜美腿在线中文| 国产精品电影一区二区三区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 又爽又黄无遮挡网站| 看十八女毛片水多多多| 国产精品一区二区三区四区久久| 婷婷丁香在线五月| 亚洲专区中文字幕在线| 中国美女看黄片| 99久久精品一区二区三区| 美女大奶头视频| 一区二区三区免费毛片| 日韩在线高清观看一区二区三区 | 色视频www国产| 国语自产精品视频在线第100页| 亚洲av成人av| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产一区二区三区视频了| 欧美性感艳星| 天堂网av新在线| 精品人妻1区二区| 欧美成人a在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 美女大奶头视频| 一本久久中文字幕| 内射极品少妇av片p| 亚洲av.av天堂| 精品无人区乱码1区二区| 婷婷精品国产亚洲av| 欧美一区二区亚洲| 午夜老司机福利剧场| 女人被狂操c到高潮| 国产 一区 欧美 日韩| 久久久久性生活片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 又紧又爽又黄一区二区| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲国产欧美人成| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品国产亚洲av天美| 国内精品一区二区在线观看| 午夜福利18| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美色欧美亚洲另类二区| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| av在线蜜桃| 亚洲av成人av| 麻豆成人午夜福利视频| 99热精品在线国产| 日本黄大片高清| 精品免费久久久久久久清纯| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲综合色惰| 欧美成人免费av一区二区三区| 免费观看在线日韩| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产色婷婷99| www.色视频.com| 在线免费观看不下载黄p国产 | 午夜亚洲福利在线播放| 国内精品久久久久精免费| 亚洲成人中文字幕在线播放| 一级黄片播放器| 一个人看的www免费观看视频| 精品久久国产蜜桃| 99热这里只有是精品50| 国产免费av片在线观看野外av| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲经典国产精华液单| 69人妻影院| 99热精品在线国产| 丰满人妻一区二区三区视频av| 成人鲁丝片一二三区免费| av在线蜜桃| 99国产精品一区二区蜜桃av| av专区在线播放| 一区福利在线观看| 女人被狂操c到高潮| 三级国产精品欧美在线观看| 性色avwww在线观看| 亚洲,欧美,日韩| 国产男人的电影天堂91| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 婷婷精品国产亚洲av在线| www.www免费av| 老司机深夜福利视频在线观看| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产一区二区三区视频了| 国产高清有码在线观看视频| 免费av观看视频| 亚州av有码| 婷婷丁香在线五月| av中文乱码字幕在线| 成年人黄色毛片网站| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲欧美激情综合另类| av天堂中文字幕网| 久久久久久久精品吃奶| 国产免费男女视频| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 九色国产91popny在线| www日本黄色视频网| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品不卡国产一区二区三区| 久久久久久久精品吃奶| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产精品爽爽va在线观看网站| 老女人水多毛片| eeuss影院久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产毛片a区久久久久| 久久久久久久午夜电影| 免费观看精品视频网站| 亚洲av免费在线观看| 亚洲人成网站在线播| 午夜免费成人在线视频| 热99re8久久精品国产| 欧美三级亚洲精品| 嫁个100分男人电影在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 99九九线精品视频在线观看视频| 看片在线看免费视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美区成人在线视频| АⅤ资源中文在线天堂| 乱码一卡2卡4卡精品| av在线蜜桃| 最近视频中文字幕2019在线8| 日韩大尺度精品在线看网址| 美女黄网站色视频| 黄色丝袜av网址大全| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 久久久色成人| 成人美女网站在线观看视频| 久久久午夜欧美精品| 91久久精品国产一区二区成人| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 麻豆成人午夜福利视频| 日本黄大片高清| 久久久久国内视频| 麻豆成人av在线观看| 精品免费久久久久久久清纯| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| av专区在线播放| 深夜精品福利| 亚洲在线观看片| 黄色女人牲交| 免费黄网站久久成人精品| 精品人妻1区二区| 亚洲成人久久爱视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 精品久久久久久久末码| 在线a可以看的网站| 日本爱情动作片www.在线观看 | 村上凉子中文字幕在线| xxxwww97欧美| 久久热精品热| 亚洲人与动物交配视频| 日韩一本色道免费dvd| 在现免费观看毛片| 小说图片视频综合网站| 俺也久久电影网| 在线观看66精品国产| 亚洲国产精品成人综合色| 成人永久免费在线观看视频| 免费观看人在逋| 韩国av一区二区三区四区| 精品久久国产蜜桃| 成人精品一区二区免费| 国产精品日韩av在线免费观看| 成人美女网站在线观看视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 乱码一卡2卡4卡精品| 精品一区二区免费观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲久久久久久中文字幕| 少妇被粗大猛烈的视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲自拍偷在线| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产爱豆传媒在线观看| 乱系列少妇在线播放| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 热99re8久久精品国产| ponron亚洲| 国产人妻一区二区三区在| 悠悠久久av| 麻豆国产av国片精品| 全区人妻精品视频| 亚洲四区av| 国产极品精品免费视频能看的| 97热精品久久久久久| 一级黄色大片毛片| 99riav亚洲国产免费| 国产老妇女一区| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久久久国内视频| 永久网站在线| 国产精品一区www在线观看 | 亚洲男人的天堂狠狠| 色噜噜av男人的天堂激情| 校园春色视频在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 国产精品一及| 久久久久久久亚洲中文字幕| 天堂√8在线中文| 淫妇啪啪啪对白视频| 国产精品人妻久久久影院| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 香蕉av资源在线| 黄色丝袜av网址大全| 一进一出好大好爽视频| 成人美女网站在线观看视频| 国产黄a三级三级三级人| 成人一区二区视频在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 免费av观看视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 尾随美女入室| 欧美zozozo另类| 国产乱人伦免费视频| 免费搜索国产男女视频| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产真实乱freesex| 中文字幕av成人在线电影| 国产欧美日韩一区二区精品| 成人国产一区最新在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产精品福利在线免费观看| 精品午夜福利视频在线观看一区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 午夜久久久久精精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲在线自拍视频| 久久久久久国产a免费观看| 赤兔流量卡办理| 俄罗斯特黄特色一大片| 婷婷亚洲欧美| 男人的好看免费观看在线视频| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲最大成人手机在线| ponron亚洲| 久久精品国产亚洲网站| 国产 一区精品| 精品久久久久久成人av| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产欧美日韩精品一区二区| 免费看美女性在线毛片视频| 99久久九九国产精品国产免费| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久精品91蜜桃| 成人性生交大片免费视频hd| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 又爽又黄无遮挡网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久久免费精品人妻一区二区| 欧美激情在线99| 在线a可以看的网站| 成年人黄色毛片网站| 女同久久另类99精品国产91| 给我免费播放毛片高清在线观看| 嫩草影视91久久| 欧美3d第一页| 日本 av在线| 国产综合懂色| 久久久久久久午夜电影| 国产精品乱码一区二三区的特点| 天天躁日日操中文字幕| 亚洲一区二区三区色噜噜| 一进一出抽搐动态| 少妇人妻一区二区三区视频| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲午夜理论影院| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产高清不卡午夜福利| 精品一区二区三区视频在线| 欧美日本亚洲视频在线播放| 日本在线视频免费播放| 哪里可以看免费的av片| 中国美白少妇内射xxxbb| 久久6这里有精品| 在线观看免费视频日本深夜| 欧美色视频一区免费| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 黄色女人牲交| 国产欧美日韩精品一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 全区人妻精品视频| 国产淫片久久久久久久久| 精品人妻偷拍中文字幕| 如何舔出高潮| 深夜精品福利| 欧美高清成人免费视频www| 国产高清有码在线观看视频| 变态另类丝袜制服| 男女那种视频在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 黄片wwwwww| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 男女下面进入的视频免费午夜| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产黄片美女视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 欧美日韩精品成人综合77777| 极品教师在线视频| 国产不卡一卡二| 欧美3d第一页| 午夜福利18| 又爽又黄无遮挡网站| 91av网一区二区| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 男插女下体视频免费在线播放| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 亚洲欧美清纯卡通| h日本视频在线播放| 免费高清视频大片| 亚洲天堂国产精品一区在线| 久久99热这里只有精品18| 91麻豆av在线| 美女免费视频网站| 欧美丝袜亚洲另类 | 在线免费十八禁| 身体一侧抽搐| 精品欧美国产一区二区三| 熟女电影av网| 国产成人影院久久av| 国产精品亚洲一级av第二区| 夜夜爽天天搞| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲av熟女| 婷婷亚洲欧美| 亚洲五月天丁香| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品久久视频播放| 婷婷精品国产亚洲av| 亚洲五月天丁香| 99视频精品全部免费 在线| 一区二区三区免费毛片| 日本黄大片高清| 女人被狂操c到高潮| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲性久久影院| 俺也久久电影网| 日本五十路高清| 又爽又黄a免费视频| 久久久久久大精品| 一级黄色大片毛片| 免费在线观看成人毛片| 99久久精品热视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久久久久久精品吃奶| 在线观看av片永久免费下载| 九九爱精品视频在线观看| 男女边吃奶边做爰视频| 精品福利观看| 51国产日韩欧美| 草草在线视频免费看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 最近最新免费中文字幕在线| 男人舔奶头视频| 日本在线视频免费播放| 色综合站精品国产| 国语自产精品视频在线第100页| bbb黄色大片| 草草在线视频免费看| 久久久久久久久中文| 国模一区二区三区四区视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美日韩乱码在线| 别揉我奶头 嗯啊视频| 国产 一区精品| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 国产不卡一卡二| 99久久成人亚洲精品观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 波多野结衣巨乳人妻| 免费看美女性在线毛片视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 欧美成人a在线观看| 国产精品久久久久久久电影| 国产淫片久久久久久久久| 成人av一区二区三区在线看| 最新在线观看一区二区三区| 美女免费视频网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 变态另类丝袜制服| 看黄色毛片网站| 男女之事视频高清在线观看| 成人国产综合亚洲| 免费观看的影片在线观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美另类亚洲清纯唯美| 免费电影在线观看免费观看| 欧美潮喷喷水| 国产精品精品国产色婷婷| 色综合婷婷激情| 极品教师在线免费播放| 看片在线看免费视频| 国产伦人伦偷精品视频| 伦理电影大哥的女人| 一边摸一边抽搐一进一小说| 全区人妻精品视频| 99精品久久久久人妻精品| 日韩精品青青久久久久久| 国产亚洲欧美98| 午夜a级毛片| 国产成人a区在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 久久久久久久久久成人| 最近最新免费中文字幕在线| 国内精品美女久久久久久| 亚洲欧美激情综合另类| 一a级毛片在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 天天一区二区日本电影三级| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲成人久久性| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久成人免费电影| 精品久久久久久久久久久久久| 成人特级av手机在线观看| 亚洲成人免费电影在线观看| 精品日产1卡2卡| 欧美黑人欧美精品刺激| 又黄又爽又免费观看的视频| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 老司机深夜福利视频在线观看| 一进一出抽搐动态| 97超视频在线观看视频| 成年版毛片免费区| 桃色一区二区三区在线观看| 在线免费观看的www视频| 亚洲av五月六月丁香网| 日本黄色片子视频|