青海省海晏縣綿羊流產(chǎn)原因的血清學(xué)調(diào)查

柳 存,鐵富萍,張海瑾

(1.青海省海晏縣青海湖鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站,青海 海晏812200;2.青海省海晏縣畜牧獸醫(yī)站,青海 海晏 812200)

近年來(lái)隨著青海省海晏縣畜牧業(yè)的不斷發(fā)展,綿羊的一些傳染病在縣境內(nèi)時(shí)有發(fā)生,特別是出現(xiàn)以母羊流產(chǎn)、死胎、公羊睪丸腫大等侵害生殖系統(tǒng)為特征的一類病尤為突出。其發(fā)生與流行已嚴(yán)重影響和阻礙了海晏縣養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展,而且給廣大牧民群眾造成了較大的經(jīng)濟(jì)損失。因此,為了查清青海省海晏縣綿羊群中流產(chǎn)原因是否與布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲病有關(guān)以及這4 種病在海晏縣境內(nèi)的感染情況,為今后制定出疫病的有效綜合防制措施提供科學(xué)依據(jù),我們對(duì)青海省海晏縣的流產(chǎn)較為嚴(yán)重的綿羊群進(jìn)行了血清學(xué)檢測(cè),報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 被檢血清 被檢血清均采自青海省海晏縣自然放牧的流產(chǎn)較為嚴(yán)重綿羊群,采血時(shí)均空腹、頸靜脈采集,采集后擺成斜面,置4 ℃冰箱5 h 后,放在室溫待血清析出后收集血清,-20 ℃冷凍保存待檢。

1.2 診斷試劑

1.2.1 布魯桿菌的抗原(生產(chǎn)批號(hào)：200802)、陽(yáng)性血清(生產(chǎn)批號(hào)：2008)、陰性血清(生產(chǎn)批號(hào)：2008),中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)。

1.2.2 衣原體IHA 抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清、稀釋液,均購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,批號(hào)分別為090323、090323、090323 和 090323(090218)。

1.2.3 弓形蟲IHA 抗原、陰性血清、陽(yáng)性血清、稀釋液,均由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn),批號(hào)分別是：20090512、20090421、20090412和20090409。

弓形蟲的ELISA 診斷抗原P30 由日本國(guó)家原生動(dòng)物疾病研究控制中心提供,青海省畜牧科學(xué)院所生物技術(shù)研究室保存。

1.2.4 新孢子蟲的GST-NcSAG1t 蛋白在以前的研究中進(jìn)行了克隆、表達(dá)和純化;陰、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)血清,均為日本國(guó)家原蟲中心玄學(xué)南博士惠贈(zèng),青海省畜牧科學(xué)院所生物技術(shù)研究室保存。

1.3 操作與判定(1)布魯桿菌試管凝集反應(yīng)按照部頒規(guī)程[1-2]進(jìn)行操作及判定;(2)衣原體、弓形蟲間接血凝試驗(yàn)(IHA)均按診斷液使用說明書進(jìn)行,待檢血清效價(jià)達(dá)到或超過1∶16 和1∶64 判為陽(yáng)性;(3)弓形蟲、新孢子蟲的ELISA 的判定標(biāo)準(zhǔn)均為兩孔待檢樣品的平均值等于或大于0.1 為陽(yáng)性,低于0.1 為陰性。

2 結(jié)果

見表1。

表1 青海省海晏縣綿羊布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲抗體檢測(cè)結(jié)果

2.1 布魯桿菌用試管凝集反應(yīng)(SAT)檢測(cè)了110份綿羊血清,未檢出陽(yáng)性血清。

2.2 衣原體采用間接血凝試驗(yàn)(IHA)檢測(cè)了314份綿羊血清,檢出27 份陽(yáng)性,陽(yáng)性率為8.6%。其中200 份生產(chǎn)母牛血清中檢出20 份陽(yáng)性,陽(yáng)性率為10%,114 份種公羊血清中檢出7 份陽(yáng)性,陽(yáng)性率為6.14%。

2.3 弓形蟲的檢測(cè)結(jié)果(1)弓形蟲采用間接血凝試驗(yàn)(IHA)共檢測(cè)綿羊血清110 份,陽(yáng)性血清4份,陽(yáng)性率為3.64%;(2)弓形蟲采用重組蛋白P30作為ELISA 診斷抗原共檢測(cè)綿羊血清110 份,檢出陽(yáng)性血清14 份,陽(yáng)性率為12.73%。

2.4 用犬新孢子蟲的重組蛋白GST-NcSAGlt 作為ELISA 診斷抗原檢測(cè)的94 份被檢綿羊血清中,共檢出N.caninum 抗體陽(yáng)性血清4 份,陽(yáng)性率為4.26%。

3 討論

3.1 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明,青海省海晏縣綿羊群中衣原體、弓形蟲、新孢子蟲的平均感染率為6.64%,布魯桿菌病的感染率為零,而衣原體和弓形蟲病的感染率都比較高,弓形蟲病的感染率高達(dá)12.73%,新孢子蟲病的感染相對(duì)較低,這說明該縣綿羊群中衣原體、弓形蟲、新孢子蟲都有感染,尤其弓形蟲病的感染較為嚴(yán)重,要引起有關(guān)部門的足夠重視,做好綜合防治工作。

3.2 布魯桿菌病曾經(jīng)是引起牲畜流產(chǎn)的主要原因,但是經(jīng)過多年的防治,青海省海晏縣的布魯桿菌病已經(jīng)達(dá)到穩(wěn)定控制區(qū)標(biāo)準(zhǔn)[3]。這次檢測(cè)沒有檢出陽(yáng)性,充分肯定了本縣綿羊布魯桿菌病的防治工作取得的成績(jī)和效果。但今后仍然要加強(qiáng)對(duì)布魯桿菌病的檢測(cè)工作,從而防止布魯桿菌病的發(fā)生。

3.3 通過本次的檢測(cè)結(jié)果可以說明,引起青海省海晏縣綿羊流產(chǎn)的原因與衣原體、弓形蟲、新孢子蟲的感染有一定聯(lián)系,主要原因可能是由衣原體和弓形蟲感染引起的。因?yàn)閾?jù)資料記載,衣原體、弓形蟲、新孢子蟲都能引起懷孕母羊的流產(chǎn)[4-8]。

3.4 隨著畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)迅速發(fā)展,畜禽及其產(chǎn)品的交易日益頻繁,因此加大了疫病的傳播機(jī)會(huì)。我們要加強(qiáng)對(duì)布魯桿菌、衣原體、弓形蟲、新孢子蟲、隱孢子蟲的檢疫工作,在種公羊的引進(jìn)和串換時(shí)防止和杜絕引進(jìn)感染有疫病的羊只,定期對(duì)海晏縣全縣的綿羊群進(jìn)行以上幾種病的血清學(xué)檢測(cè),檢出陽(yáng)性應(yīng)采取措施,及時(shí)進(jìn)行淘汰凈化處理。

3.5 加大宣傳力度,普及疫病防制知識(shí),通過廣播電視、手機(jī)短信微信、發(fā)放宣傳材料等多種形式,加大對(duì)廣大農(nóng)牧民群眾有關(guān)以上4 種人獸共患病的流行、臨床癥狀、傳播方式、防治措施及其對(duì)人的危害性等方面的知識(shí)宣傳和防范措施。搞好環(huán)境衛(wèi)生、飲食衛(wèi)生、個(gè)人衛(wèi)生等防護(hù)制度,凈化畜群,從而減少這4 種病對(duì)人獸健康的危害和威脅。