藏用藥棘豆的種類及其藥用價值研究進展

裴娜 歐陽輝 馮育林 楊世林 鐘國躍

藏用藥棘豆包含的品種多樣，有必要對其品種進行整理，并對其活性成分進行研究。本文概述了藏用藥棘豆的基本特點和生長習慣，進一步整理了藏用藥棘豆品種整理，分析了藏用藥棘豆活性成分，以為該藥物的臨床應用提供可行性借鑒。

在傳統(tǒng)的藏藥中，以較為常見的鐮形棘豆為例，其作為豆科棘豆屬植物鐮形棘豆的干燥全草，清熱解毒，用于疫癘等疾病的治療中，可發(fā)揮生肌愈瘡、澀脈止血、通便的效能;外敷治瘡癤腫痛。主要組成成分為黃酮類、生物堿類、多糖類、揮發(fā)油及皂苷等。棘豆的化學成分和體外抑菌活性，采用GC-MS技術對各植物乙醇提取物的化學成分進行分析與鑒定;巖青蘭、旱辣蓼和輪葉棘豆中具有生物活性的化合物分別為13、19、15種，其中黃酮類化合物分別為9、12、13種。現(xiàn)就藏用藥棘豆品種整理和活性成分研究如下。

1. 藏用藥棘豆概述

藏用藥棘豆為多年生草本，密被灰白色短柔毛。嫩莖呈鈍方柱形，密被柔毛，老莖近圓柱形的藥材。羽狀復葉長2-5cm;托葉膜質(zhì)，基部與葉柄貼生，分離部分披針狀錐形，疏被柔毛。多花組成頭形總狀花序，果時伸長;花冠紫色。其生長習性為：在半干旱半荒漠地區(qū)生長良好。極度耐旱，耐寒性亦佳。由于美麗棘豆建植和維護成本低，抗干擾能力和自我修復能力強，同其他沙漠化植物一樣，是良好的干旱區(qū)城市園林綠化的優(yōu)良花卉植物選擇。輪葉棘豆 Oxytropis chiliophylla Royle的全草 。7-9月收集狼把草，清洗切條，晾干。茯苓功效特異，苦，寒。有毒性;功效與作用特異，活血消炎，治腹瀉止痛。用于外傷流血、瘡癤腫疼、腸炎腹瀉;外敷可快速消腫、活血。

2. 藏用藥棘豆品種整理

基于中醫(yī)異病同治理論，預測出棘豆止咳散中多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘具有多成分-多靶點-多通路的特點，為棘豆止咳散的基礎研究、臨床應用提供了理論依據(jù);利用中藥數(shù)據(jù)庫（TCMID）搜索多葉棘豆單味蒙藥治療急性支氣管炎、哮喘的靶點，通過String數(shù)據(jù)庫對關鍵作用靶點構建蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡;多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘的作用機制，借助Clue Go對關鍵作用靶點進行基因分析和KEGG富集;共得到86個多葉棘豆治療急性支氣管炎、哮喘的作用靶點，富集分析其生物過程與細胞缺氧反應、炎癥反應最為密切，KEGG分析腫瘤壞死因子（TNF）信號通路最為顯著，靶點腫瘤壞死因子α與有強烈的結合活性。

基于沙棘油的調(diào)控研究等，因其化學成分變化賦予了其多成分、多靶點調(diào)控機制，故在實踐中發(fā)揮了顯著的臨床指導效應;采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）法檢測沙棘油樣品中脂肪酸的組成;通過中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫與分析平臺（TCMSP）搜索，Swiss TargetPrediction數(shù)據(jù)庫預測沙棘油有效成分對應靶點;通過DisGeNET等數(shù)據(jù)庫，獲取炎癥相關靶點;構建沙棘油抗炎的“活性成分-作用靶點”的網(wǎng)絡圖譜軟件，基于生物活性的潛在分析等，在錄入STRING平臺構建靶點間的蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡的靶點中，基于GO富集分析和KEGG通路富集的數(shù)據(jù)庫等發(fā)揮了顯著的富集效應;通過測定并篩選得到肉豆蔻酸、棕櫚酸、棕櫚油酸等8種活性成分，檢索并預測得到208個對應靶點。利用在線網(wǎng)站篩選出PPARG、PPARA、PTPN1、PTGES、RORC等19個成分和疾病的交集靶點，涉及信號通路有癌癥通路、非酒精性脂肪肝（NAFLD）等。

采用超高效液相色譜-四極桿-靜電場軌道阱高分辨率質(zhì)譜聯(lián)用技術（UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS）對西藏沙棘中的化學成分進行定性分析，隨后通過DPPH自由基和超氧陰離子清除實驗評價石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水4個不同極性部位的抗氧化活性，并利用網(wǎng)絡藥理學方法進行功能富集和通路分析，篩選抗氧化相關成分并初步闡釋作用機制，在此基礎上整合多源信息對抗氧化質(zhì)量標志物進行預測分析;從西藏沙棘中共鑒定出51個化學成分，包括黃酮類18個、萜類14個、生物堿類6個、香豆素和苯丙素類各4個、揮發(fā)性成分3個、多酚類2個。不同部位的抗氧化能力：乙酸乙酯>正丁醇>水>石油醚。西藏沙棘的主要年成分分析中，基于槲皮素、木犀草素及山柰酚等黃酮類成分的分析，在PI3K/Akt和FoxO信號通路發(fā)揮抗氧化作用。綜合干法和濕法結果預測槲皮素、木犀草素和山柰酚為西藏沙棘的抗氧化質(zhì)量標志物。

國內(nèi)外學者從黃花棘豆中發(fā)現(xiàn)了近300多個化合物，包括生物堿類、黃酮類和三萜皂苷類等類型。其生物活性涉及抗腫瘤、抗乙型肝炎病毒、殺蟲、抑菌、抗缺氧等相關化合物的效應。采用CCK-8法，檢測黃酮化合物對人肺腺癌A549細胞的抑制作用;從鐮形棘豆的乙酸乙酯部位分離中得到7-羥基二氫黃酮及2、4-二羥基二氫查爾酮;且經(jīng)HPLC純度證實>98%;CCK-8法結果顯示，7-羥基二氫黃酮及2，4-二羥基二氫查爾酮均能顯著抑制A549細胞活力，并呈量效關系，48h的IC50值分別為137.6μg/mL和63.83μg/mL。分離得到的2個黃酮成分對A549細胞均有良好的抑制作用，為后期抗肺癌機制研究提供了實驗基礎。由己內(nèi)酰胺聚合而成的尼龍6和由己二酸和己二胺聚合而成的尼龍66。聚酰胺分子中含有豐富的酰胺基團，可與酚類、醌類、硝基化合物等形成氫鍵而被吸附，與不能形成氫鍵的化合物分離。常用藏藥材鐮形棘豆（Oxytropis falcata Bunge）和肉果草（Lancea tibetica Hook.f.et Thoms）為研究對象，構建了高效、普適性、能實現(xiàn)系統(tǒng)分離的二維液相色譜方法;利用建立的二維液相色譜分離方法，對鐮形棘豆和肉果草進行了化學成分研究;ODS C18和XAqua C18色譜柱具有分離選擇性。因此，在二維制備中選擇了XAqua C18制備柱對組分1-5進行了進一步的分離并從鐮形棘豆中得到了8個純度大于98%的化合物。其中包括1個酚酸類化合物、1個酰胺類生物堿以及6個黃酮類化合物。通過對兩種藏藥的化學成分及其分離方法的研究，進一步完善了鐮形棘豆和肉果草的物質(zhì)基礎研究，實現(xiàn)HPLC-DPPH分析方法與二維制備液相色譜的結合，為從天然產(chǎn)物中導向分離活性化合物提供了參考。從瘤胃瘺管每天給5只山羊投服黃花棘豆粉末（10g/kgB·W），以研究該草對山羊的毒性。試驗羊在18-22天開始出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，表現(xiàn)為精神沉郁，目光呆滯，反應遲純，喜臥，四肢無力，后肢麻痹，少尿等;在33-65天內(nèi)死亡。實驗室檢查發(fā)現(xiàn)，肝功明顯變化，GOT活性，黃疸指數(shù)明顯升高，血漿α-甘露糖苷酶活性降低，（GSH-Px）活性無變化，尿低聚糖含量升高，在濃縮尿中可檢出生物堿。

3. 不同品種藏用藥棘豆活性成分研究綜述

經(jīng)D101大孔樹脂純化后，沙棘黃酮中相關指標的純度如：沙棘果渣、沙棘籽、沙棘葉分別為73.3%、66.7%、36.7%。單因素分析表明，沙棘葉，優(yōu)化乙醇體積分數(shù)、料液比、提取時間和提取次數(shù);以總黃酮提取率、石油醚脫脂、乙醇體積分數(shù)、提取溫度、料液比（g/mL）、提取時間、提取次數(shù)、總黃酮提取率70%、80℃，1：16，2h，3次，7.10%。

砂珍棘豆，多年生草本，高5-15cm。根長圓柱形，黃褐色。莖短縮或幾乎無地上莖。葉叢生，多數(shù)葉為輪生小葉的復葉，葉軸密被長柔毛，每葉有6-12輪，每輪有4-6小葉，均密被長柔毛;托葉卵形，先端尖，密被長柔毛;小葉片線形、披針形或線狀長圓形，長3-10mm，寬1-2mm，先端銳尖，基部楔形，邊緣常內(nèi)卷?？偦ü６噍^葉長，總狀花序縮短近頭狀，生于花室頂端;苞片線形;萼鐘狀，長3-4mm，密被長柔毛;萼齒線形，與萼簡近等長或為萼簡長的1/3，密被長柔毛;花較小，長8-10mm，粉紅色或帶紫色，旗瓣倒卵形，先端圓或微凹，基部有短爪，翼瓣和龍骨瓣較旗瓣短;雄蕊10，二體;子房有短柔毛，花柱先端稍內(nèi)彎。莢果寬卵形，膨脹，長約1cm，先端具短喙，表面密被短柔毛?；ㄆ?-7月，果期7-9月。LC-MS/MS檢測推測沙棘黃酮的快速降血糖的藥用功能可能跟異鼠李素、槲皮素和山奈酚含量相關。

寬苞棘豆中含有酚類物質(zhì)、鞣質(zhì)、還原性糖、皂甙、生物堿、黃酮及其甙類、氨基酸和氰甙。鐮形棘豆有19個共有指紋峰，輪葉棘豆有24個共有指紋峰，鐮形棘豆和輪葉棘豆有11個共有指紋峰。通過對照品對照，指認了兩種藥材中共有的7個指紋峰以及輪葉棘豆特有的1個指紋峰的化合物結構。研究結果表明，兩種藥材盡管在化學成分上存在一定差異，但是其主要成分基本相同，因此從化學成分的角度上為兩種藥材均作為“俄大夏”入藥提供了科學依據(jù)，同時也提示為了保證臨床用藥的療效和一致性。利用MTT比色法測定大果沙棘果渣黃酮對HT29結腸癌細胞生長的抑制率;用單細胞凝膠電泳技術（SCGE）觀察大果沙棘果渣黃酮對HT29細胞DNA的損傷情況。大果沙棘果渣黃酮在濃度20-200mg/L時對結腸癌細胞有明顯的抑制作用，作用72h最大抑制率為81.28%;單細胞凝膠電泳顯示大果沙棘果渣黃酮作用細胞48h后可見明顯的彗星狀拖尾。

綜上所述，藏用沙棘豆的活性成分中，黃酮類和三萜皂苷類等類型，在抗腫瘤上，通過提取相關化合物，以發(fā)揮抗乙型肝炎病毒、殺蟲、抑自由基等的突出作用。上文概述了藏用藥棘豆的基本特點和生長習慣，進一步整理了藏用藥棘豆品種整理，分析了藏用藥棘豆活性成分，以為本病的網(wǎng)絡藥理學機制研究提供可行性借鑒。

作者簡介：

裴娜（1983.9-），漢族，女，江西余干人，本科，藥師;研究方向：主要從事藥學研究。