UPLC-MS/MS同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦與氨氯地平濃度

李艷玲 王曼 王振磊 王鴻芡 夏伯姍 岳嬌梁秀芳 南峰 向瑾 王永生 秦永平 張梅

摘要：建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦與氨氯地平的濃度，用于研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)。采用Waters BEH C18（2.1mm×50mm，1.7μm）色譜柱，流動(dòng)相A：甲酸：氨水：水（1：0.2：1000，v/v/v），流動(dòng)相B：甲酸：氨水：乙腈：水（1：0.2：950：50，v/v/v/v），進(jìn)行梯度洗脫，流量0.3mL/min，以d3-替米沙坦、d4-氨氯地平作內(nèi)標(biāo)。血漿樣本液液萃取后，采用SHIMADZU SIL-30 AD型UPLC進(jìn)樣分離，美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500質(zhì)譜儀在MRM模式下檢測(cè)。結(jié)果表明：替米沙坦在0.50～500ng/mL范圍內(nèi)，氨氯地平在0.05～8.00ng/mL范圍內(nèi)線性良好;替米沙坦及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.43～，氨氯地平及內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間均為1.31min;替米沙坦萃取回收率103.0%～104.2%、氨氯地平萃取回收率54.6%～66.5%;方法的特異性、靈敏性、線性、精密度、準(zhǔn)確度、基質(zhì)效應(yīng)以及穩(wěn)定性驗(yàn)證數(shù)據(jù)均符合相關(guān)要求。該法快速、靈敏、專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，適用于替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度測(cè)定。

關(guān)鍵詞：UPLC-MS/MS;替米沙坦;氨氯地平;血藥濃度

中圖分類號(hào)：R917 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-5124（2019）07-0066-08

收稿日期：2019-01-21;收到修改稿日期：2019-03-06

作者簡(jiǎn)介：李艷玲（1994-），女，山西運(yùn)城市人，碩士研究生，專業(yè)方向?yàn)樗幬锓治觥?/p>

通信作者：張梅（1963-），女，四川成都市人，教授，主要從事中藥及復(fù)方物質(zhì)基礎(chǔ)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究。

0 引言

高血壓與心腦血管疾病密切相關(guān)，其高發(fā)病率和高致死率極大地影響公眾健康[1-3]。替米沙坦（telmlsartan）是一種廣泛用于治療高血壓和心力衰竭的血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑（angiotensin 11 receptorblockers，ARBs）[4-6]，氨氯地平（amlodipine）是一種長(zhǎng)效、可有效控制血壓的二氫吡啶類鈣通道拮抗劑[7]。研究表明，替米沙坦和氨氯地平在單藥治療高血壓方面已顯示出良好的療效[8]，而替米沙坦/氨氯地平片（40/5mg）是替米沙坦和氨氯地平的復(fù)方制劑，其在降低血壓方面被認(rèn)為比單藥治療更有效、更耐受，且優(yōu)于其他傳統(tǒng)聯(lián)合用藥方案[9-10]。在研究替米沙坦/氨氯地平片的藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度時(shí)，需要測(cè)定兩種藥物的血藥濃度。目前，國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道的LC-MS/MS分析方法多集中于單獨(dú)測(cè)定生物樣本中替米沙坦[11-13]或氨氯地平[14-16]的含量，同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的方法國(guó)內(nèi)外較少報(bào)道。張鶴等[17]在測(cè)定Beagle犬血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度時(shí)分別采用乙腈沉淀蛋白測(cè)定替米沙坦和液液萃取測(cè)定氨氯地平兩個(gè)方法，需要處理兩份樣本、進(jìn)樣兩次，工作量大、耗時(shí)長(zhǎng)，靈敏度低，且采用非同位素內(nèi)標(biāo)奈普生和鹽酸克倫特羅;Ravi VB等[18]采用固相萃?。⊿PE）同時(shí)測(cè)定人血漿中替米沙坦和氨氯地平的濃度，以非同位素標(biāo)記藥物卡馬西平作內(nèi)標(biāo)，存在血漿用量大（250μL）、成本高、耗時(shí)長(zhǎng)，精密度較差等問(wèn)題。本研究使用同位素標(biāo)記藥物作內(nèi)標(biāo)，用100μL血漿，在堿性條件下通過(guò)液液萃取，一次進(jìn)樣可同時(shí)測(cè)定血漿中高響應(yīng)、高濃度的替米沙坦和低濃度的氨氯地平濃度，具有線性范圍廣、靈敏度高、血漿用量少、準(zhǔn)確度和精密度好、操作簡(jiǎn)便，耗時(shí)短、成本低等特點(diǎn)，適用于高通量的分析檢測(cè)工作，已成功應(yīng)用于健康志愿者口服替米沙坦/氨氯地平片（40/5mg）后的臨床藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究的大量樣本（5400余個(gè)）檢測(cè)，結(jié)果良好。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

日本SHIMADZU SIL-30 AD型高效液相色譜儀;美國(guó)AB Sciex QTRAP 5500三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜儀;數(shù)據(jù)采集用Analyst工作軟件（Version 1.6.3）;5810R低溫離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf公司）;XP205DR十萬(wàn)分之一電子分析天平（法國(guó)Mettler Toledo公司）;Targin BT-Ⅲ水浴式氮吹儀（北京踏錦科技有限公司）。

1.2 試藥

苯磺酸氨氯地平對(duì)照品，中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100374-201204，純度99.9%：替米沙坦對(duì)照品，中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)100629-201202，純度99.6%;同位素標(biāo)記的替米沙坦（d3-替米沙坦）對(duì)照品，加拿大TRC公司，批號(hào)1-TEK-100-2，化學(xué)純度97.0%，同位素純度99.1;同位素標(biāo)記的氨氯地平（d4-氨氯地平）對(duì)照品，加拿大TRC公司，批號(hào)11-PSB41-1，化學(xué)純度98.0%，同位素純度99.7%。試驗(yàn)制劑（替米沙坦氨氯地平片，四川自豪時(shí)代藥業(yè)有限公司，批號(hào)：160405，規(guī)格：40/5mg/片）;參比制劑（替米沙坦氨氯地平片，勃林格殷格翰國(guó)際藥業(yè)有限公司，批號(hào)：505254，規(guī)格：40/5mg/片）。乙腈、甲酸，美國(guó)Thermo Fisher公司，色譜純;氨水，二氯甲烷、異丙醇，成都科隆公司，分析純;超純水，美國(guó)Millipore公司Millipore型超純水器自制。

2 方法

2.1 色譜條件

色榭主：Waters BEH C18（2.1mm×50mm，1.7μm）色譜柱，美國(guó)Waters公司;柱溫：40℃;流動(dòng)相A：甲酸：氨水：水（1：0.2：1000，v/v/v），流動(dòng)相B：甲酸：氨水：酬青：水（1：0.2：950：50，v/v/v/v），流量0.3mL/min。梯度洗脫：0.01～1.10min，B相38%～100%;1.10～1.80min，B相維持100%;1.80～1.81min，B相100%～38%：1.81～2.50min，B才匪時(shí)寺38%。流量：0.3mL/min，進(jìn)樣量：5μL，進(jìn)樣時(shí)長(zhǎng)：2.50min。

2.2 質(zhì)譜條件

采用多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)（MRM，multiple reactionmonitoring），ESI（電噴霧離子源，electron sprayionization）正離子化方式檢測(cè)，氣簾氣35 psi（1psi=6894.757Pa），霧化氣60psi，加熱輔助氣60psi，噴霧電壓5500V，離子源溫度500℃，去簇電壓70V，射人電壓10V，射出電壓13V。替米沙坦、d3-替米沙坦的檢測(cè)離子對(duì)分別為（m/z）515.2→276.2、518.2→279.2，碰撞能量38V;氨氯地平、d4-氨氯地平的檢測(cè)離子對(duì)分別為（m/z）409.2→238.2、413.2→238.2，碰撞能量15V。

2.3 溶液的配制

2.3.1 替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線儲(chǔ)備液及工作液配制

用十萬(wàn)分之一天平分別精密稱取替米沙坦對(duì)照品10mg（相當(dāng)于替米沙坦9.96mg），苯磺酸氨氯地平對(duì)照品10mg（相當(dāng)于氨氯地平7.20mg），用甲醇分別定容于50mL容量瓶，混勻即得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液，替米沙坦?jié)舛葹?0000，9000，5000，1600，400，100，20，10ng/mL，氨氯地平濃度為160，144，80，40，16，4，2，1ng/mL，置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.2 替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控儲(chǔ)備液及工作液配制

采用2.3_1方法分別制得質(zhì)量濃度為200μg/mL的替米沙坦儲(chǔ)備液和150μg/mL的氨氯地平儲(chǔ)備液。替米沙坦/氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成相應(yīng)的質(zhì)控工作液，替米沙坦?jié)舛葹?000，800，30，10ng/mL，氨氯地平濃度為128，20，3，1ng/mL，置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.3.3 內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液及工作液配制

用10mL甲醇溶解d3-替米沙坦對(duì)照品1mg（規(guī)格：1.0mg/#k）于10mL容量瓶中，即得濃度為100μg/mL的d3替米沙坦儲(chǔ)備液;用十萬(wàn)分之一天平精密稱取d4-氨氯地平對(duì)照品1mg（規(guī)格：5.0mg/瓶），置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并定至刻度，即得濃度為100μg/mL的d4-氨氯地平儲(chǔ)備液。d3-替米沙坦/d4-氨氯地平儲(chǔ)備液用35%乙腈水溶液進(jìn)一步稀釋成內(nèi)標(biāo)工作液，制得濃度為20ng/mL的d3-替米沙坦和0.5ng/mL d4-氨氯地平（d3-TM-20ng/mL+d4-AL-0.5ng/mL），置-35℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.4 樣品預(yù)處理與測(cè)定方法

取血漿樣本100μL，加入50μL內(nèi)標(biāo)工作液，加入50μL0.5%氨水，混勻后加入2.0mL，萃取劑（二氯甲烷：異丙醇=97：3），渦旋混合5min，低溫離心5min（3000r/min，8℃），射水真空泵負(fù)壓抽棄水層，轉(zhuǎn)移下層有機(jī)層至尖底試管中，于40℃水浴中通空氣流揮干。殘?jiān)?0μL35%乙腈（含0.2%甲酸）復(fù)溶，取上清液進(jìn)樣5μL。

2.5 方法學(xué)相關(guān)考察

2.5.1 專屬性

在本實(shí)驗(yàn)條件下，使用6個(gè)不同來(lái)源的空白基質(zhì)，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作，分析評(píng)價(jià)藥物及內(nèi)標(biāo)出峰處是否產(chǎn)生干擾，考察替米沙坦和氨氯地平的專屬性。

2.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將替米沙坦/氨氯地平標(biāo)準(zhǔn)曲線系列工作液按照1：19（v/v）的比例平行加入到空白血漿中，得替米沙坦質(zhì)量濃度為500，450，250，80，20，5，1，0.5ng/mL和氨氯地平質(zhì)量濃度為8，7.2，4，2，0.8，0.2，0.1，0.05ng/mL的替米沙坦/氨氯地平混合標(biāo)準(zhǔn)曲線血漿樣品。按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作，以樣品和內(nèi)標(biāo)的峰面積比（area ratio）為縱坐標(biāo)，樣品濃度（ng/mL）為橫坐標(biāo)，以1/c²為權(quán)重系數(shù)進(jìn)行回歸，得血漿中替米沙坦和氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.5.3 準(zhǔn)確度與精密度

將替米沙坦/氨氯地平質(zhì)控系列工作液按照1：19（v/v）的比例平行加入到空白血漿中，得替米沙坦質(zhì)量濃度為400，40，1.5，0.5ng/mL（定量下限）和氨氯地平質(zhì)量濃度為6.4，1，0.15，0.05ng/mL（定量下限）的替米沙坦/氨氯地平混合質(zhì)控血漿樣本，每個(gè)濃度平行6份，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作檢測(cè)3批，分析計(jì)算批內(nèi)、批間精密度和準(zhǔn)確度。定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)。分析方法的準(zhǔn)確度表示為標(biāo)示濃度的回收率（RE%）。精密度表示為測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。

2.5.4 稀釋系數(shù)考察

制備高濃度血漿樣本，理論濃度分別為替米沙坦800ng/mL，氨氯斷平12.8ng/mL，將空白血漿與檢測(cè)血漿按照=1：1（v/v）稀釋6份，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作后進(jìn)樣。計(jì)算其精密度和準(zhǔn)確度。

2.5.5 萃取回收率

制備高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本，每個(gè)濃度3份，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作，以提取后的高、中、低3個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本進(jìn)樣得到的峰面積與空白血漿直接加入相應(yīng)基質(zhì)效應(yīng)工作液后進(jìn)樣得到的未提取峰面積的比值，計(jì)算血漿中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的萃取回收率。

2.5.6 基質(zhì)效應(yīng)

取6個(gè)不同來(lái)源的空白血漿，每一空白血漿6份，共計(jì)36份，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作，向揮干后的空白血漿樣本中加入底、高濃度相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液含內(nèi)標(biāo)工作液，分別得到基質(zhì)樣品中替米沙坦、氨氯地平與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦、d4-氨氯地平的峰面積，同時(shí)以相應(yīng)進(jìn)樣濃度工作液直接進(jìn)樣得到對(duì)照樣品中藥物及內(nèi)標(biāo)的峰面積?；|(zhì)效應(yīng)為基質(zhì)樣品的平均峰面積與對(duì)照樣品的平均峰面積的比值。

2.5.7 穩(wěn)定性

以35%乙腈（含0.5%甲酸）為溶劑，將相應(yīng)儲(chǔ)備液配制成與標(biāo)準(zhǔn)曲線最高管進(jìn)樣濃度一致的穩(wěn)定性考察工作液，每個(gè)分別制備6份，以峰面積比值計(jì)算平均穩(wěn)定性偏差考察儲(chǔ)備液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性，工作液短期保存穩(wěn)定性和長(zhǎng)期保存穩(wěn)定性。

按照實(shí)際測(cè)定過(guò)程可能影響藥物穩(wěn)定性的因素，以涵蓋血漿樣品的預(yù)期保存條件，分別制備高、低2個(gè)濃度質(zhì)控血漿樣本，按照“2.4樣品預(yù)處理與測(cè)定方法”下操作，記錄色譜峰面積，由當(dāng)日標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其濃度，與配制濃度比較考察各因素的穩(wěn)定性。

3 結(jié)果

3.1 專屬性

空白血漿色譜圖見圖1（a）和圖1（b），替米沙坦（TM）、氨氯地平（AL）及其內(nèi)標(biāo)（d3-TM、d4-AL）出峰處均無(wú)響應(yīng)。最低定量限濃度血漿樣本進(jìn)樣后，替米沙坦與內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦的保留時(shí)間為1.43min、氨氯地平與d4-氨氯地平的保留時(shí)間為1.31min。其色譜圖見圖Z（o）和圖1（d），由圖可知血漿內(nèi)源性雜質(zhì)均不干擾替米沙坦、內(nèi)標(biāo)d3-替米沙坦及氨氯地平、d4-氨氯地平的測(cè)定。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

以待測(cè)物濃度x為橫坐標(biāo)，待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值y為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸得替米沙坦、氨氯地平的標(biāo)準(zhǔn)曲線。替米沙坦：y=0.0716x+0.0103（r²=0.9988）;氨氯地平：y-0.916x-0.001 94（r²=0.9990），權(quán)重系數(shù)為1/c²。結(jié)果表明，替米沙坦在0.5～500ng/mL、氨氯地平在0.05～8ng/mL范圍線性良好。定量下限是指標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)，替米沙坦信噪比（S/N）為33，氨氯地平信噪比（S/N）為19.8，

3.3 準(zhǔn)確度與精密度

如表1所示，替米沙坦每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度（RSD%）在0.8%～5.2%之間，批間精密度在3.1%～7.3%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度（RE%）在89.4%～109.2%，批間準(zhǔn)確度在96.1%～105.1%。氨氯地平每一濃度水平樣品的批內(nèi)精密度在 0.9%～6.7%之間，批間精密度在3.5%～5.9%之間;批內(nèi)準(zhǔn)確度在94.0%～109.4%，批間準(zhǔn)確度在98.3%～105.4%。其中最低管濃度（定量下限）替米沙坦準(zhǔn)確度范圍為89.4%～99.8%，精密度小于6.2%，氨氯地平準(zhǔn)確度范圍為94.0%～101.7%，精密度小于6.7%。

3.4 稀釋系數(shù)考察

分別考察了2倍的稀釋驗(yàn)證，結(jié)果可知，替米沙坦精密度為2.8%，氨氯地平精密度為1.1%，替米沙坦準(zhǔn)確度偏差為-1.9%，氨氯地平準(zhǔn)確度偏差為6.1%。

3.5 基質(zhì)效應(yīng)

以內(nèi)標(biāo)校準(zhǔn)后測(cè)定6次的平均基質(zhì)效應(yīng)低、高濃度血漿樣本中替米沙坦分別為100.4%，100.8%，氨氯地平分別為107.0%，106.5%;替米沙坦RSD分別為3.6%和3.4%，氨氯地平分別為1.2%和1.2%，結(jié)果見表2。

3.6 萃取回收率

替米沙坦、氨氯地平在低、中、高3個(gè)質(zhì)控水平的回收率分別為103.0%～104.2%和54.6%～66.5%，表明萃取效率令人滿意，且無(wú)濃度依賴性。結(jié)果見表2。

3.7 穩(wěn)定性

儲(chǔ)備液穩(wěn)定性數(shù)據(jù)及血漿樣本各項(xiàng)相關(guān)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)如表3、表4所示，平均穩(wěn)定性偏差均小于10%，符合穩(wěn)定性相關(guān)要求。

4 應(yīng)用

本法已用于中國(guó)健康受試者，在3個(gè)周期內(nèi)分別單次口服給予替米沙坦/氨氯地平片的血藥濃度測(cè)定，其單次給藥的平均血藥濃度一時(shí)間曲線如圖2所示。由圖可知，試驗(yàn)制劑與參比制劑單次給藥替米沙坦、氨氯地平的藥時(shí)曲線變化趨勢(shì)一致。

5 討論

5.1 樣本預(yù)處理

本研究中替米沙坦、氨氯地平及其內(nèi)標(biāo)為中等極性化合物，由于沉淀蛋白法不能濃集樣本，氨氯地平濃度低，檢測(cè)靈敏度無(wú)法滿足定量要求，因此只能考慮具有濃集功能的固相萃取或液液萃取法，固相萃取成本高，條件優(yōu)化較為復(fù)雜，操作費(fèi)時(shí)，故確定采用液液萃取。在進(jìn)行萃取劑的選擇時(shí)，分別考察了甲基叔丁基醚、二氯甲烷和乙酸乙酯。甲基叔丁基醚萃取回收率過(guò)低;乙酸乙酯萃取回收率與基質(zhì)效應(yīng)雖合格，但易造成色譜柱堵塞;二氯甲烷-異丙醇（97：3，v/v）作萃取劑時(shí)，氨氯地平萃取回收率仍達(dá)不到要求，為了提高氨氯地平的萃取回收率，考慮其結(jié)構(gòu)中的含氮雜環(huán)，發(fā)現(xiàn)萃取時(shí)加入0.5%氨水的堿性環(huán)境，藥物及內(nèi)標(biāo)的萃取回收率和基質(zhì)效應(yīng)均合格（萃取回收率大于50%，基質(zhì)效應(yīng)小于15%），方法學(xué)評(píng)價(jià)結(jié)果證明了這一點(diǎn)。

5.2 內(nèi)標(biāo)選擇

本研究選用的是同位素內(nèi)標(biāo)，其藥物與內(nèi)標(biāo)的色譜行為相似、萃取回收率平行、離子化效應(yīng)相近，測(cè)定結(jié)果更準(zhǔn)確，較文獻(xiàn)使用的內(nèi)標(biāo)：鹽酸克倫特羅、奈普生[17]、卡馬西平[18]等更為理想。d3-替米沙坦做內(nèi)標(biāo)由于有同位素影響，在藥物檢測(cè)離子對(duì)處有峰，為了使內(nèi)標(biāo)在藥物出峰處的響應(yīng)值低于最低檢測(cè)限的20%，我們降低了內(nèi)標(biāo)的使用量。

5.3 色譜質(zhì)譜條件

替米沙坦為高濃度，高響應(yīng)，氨氯地平為低濃度，低響應(yīng)，高濃度替米沙坦由于響應(yīng)太高而超出質(zhì)譜響應(yīng)線性范圍，不能準(zhǔn)確定量，我們通過(guò)調(diào)整質(zhì)譜參數(shù)，使替米沙坦CE由42V降低到38V，響應(yīng)調(diào)整至合理水平，實(shí)現(xiàn)一針進(jìn)樣可同時(shí)分析兩個(gè)濃度差別大的樣本;試驗(yàn)采用梯度洗脫將兩個(gè)藥物成分保留時(shí)間調(diào)整到比較合適，替米沙坦保留時(shí)間為1.43min，氨氯地平為1.31min，保證兩個(gè)成分既能同時(shí)定量又互不干擾;且待每個(gè)樣本出峰后用95%乙腈沖洗色譜柱平衡后再進(jìn)樣，降低了基質(zhì)效應(yīng)，使樣本響應(yīng)度始終保持一致。

6 結(jié)束語(yǔ)

本研究為同時(shí)定量測(cè)定健康受試者血漿中替米沙坦/氨氯地平的血藥濃度，其中替米沙坦最低定量下限為0.50ng/mL，氨氯地平為0.05ng/mL，相較于單獨(dú)或分開測(cè)定血漿中替米沙坦、氨氯地平的濃度（氨氯地平定量下限僅0.1ng/mL），我們實(shí)驗(yàn)建立了一種快速、靈敏的UPLC-MS/MS聯(lián)用技術(shù)，方法簡(jiǎn)便，靈敏度高，精密度好，耗時(shí)短，成本低、血漿用量少（僅100μL），重現(xiàn)性好，適合高通量分析，已經(jīng)成功應(yīng)用于替米沙坦/氨氯地平片在中國(guó)健康受試者的藥代動(dòng)力學(xué)研究。

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（編輯：徐柳）