醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑復(fù)方威麥寧膠囊的急性毒理實(shí)驗(yàn)研究

曲靖市第一人民醫(yī)院，云南 曲靖 655000

金蕎麥具有清熱解毒、排膿祛痰之功效，常用來(lái)治療肺癰腫等各種肺部疾病[1-2]。研究表明金蕎麥具有明顯的抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，從其根莖中提取的威麥寧是抗癌活性物質(zhì)[3-4]。在此基礎(chǔ)上研制出用于治療腫瘤的國(guó)家二類新藥—威麥寧膠囊。復(fù)方威麥寧膠囊是威麥寧膠囊的基礎(chǔ)上再加入另外兩種抗腫瘤活性藥絞股藍(lán)和巖白菜素。全方以祛邪為主，兼以扶正，金蕎麥以滌痰、化瘀、清熱，化解體內(nèi)毒邪，再佐以絞股藍(lán)補(bǔ)虛藥物，扶固正氣，并助力驅(qū)邪，使正氣得安，邪氣不留；巖白菜素以抗炎抗菌、鎮(zhèn)咳祛痰平喘，從整體調(diào)節(jié)機(jī)體的病理狀態(tài)[5-8]。為確保復(fù)方威麥寧膠囊臨床應(yīng)用的安全性，對(duì)其進(jìn)行急性毒理實(shí)驗(yàn)研究，以期為臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 受試藥物 復(fù)方威麥寧膠囊(批號(hào)：2017 1223，曲靖市第一人民醫(yī)院)；羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，批號(hào)：20140520，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

1.1.2 供試品配制 取一定量的受試藥物，加少量0.5% CMC-Na溶液攪拌均勻，再加入0.5% CMC-Na溶液至所需體積，用磁力攪拌器攪拌，配制成濃度為0.4 g/mL的供試品溶液。保存條件：常溫。

1.1.3 陰性對(duì)照配制 取一定量的CMC-Na，加入純水溶解，配制成濃度為0.5% 的CMC-Na溶液。保存條件：2～8 ℃。

1.1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF級(jí)SD大鼠，雌雄各半，體重(180±20)g，由上海西普爾—必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。動(dòng)物生產(chǎn)許可證：SCXK(滬)2013-0016，動(dòng)物質(zhì)量合格證：20130016002182。飼養(yǎng)條件：晝夜明暗交替時(shí)間：12 h/12 h，最小換氣次數(shù)：≥15次/h，溫度：20.0～24.9 ℃，最大日溫差：≤ 4 ℃，相對(duì)濕度43.5%～55.6%。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 劑量設(shè)計(jì) 本供試品臨床上規(guī)格為0.35 g/粒，每日服3次，每次4～5?；蜃襻t(yī)囑，約口服4.2～5.25 g/d，成人按60 kg計(jì)算，臨床劑量約為70～87.5 mg/kg；本供試品可配制的最大可用于大鼠給藥的濃度約為400 mg/mL，按最大給藥體積20 mL/kg/次，給藥當(dāng)天共給藥3次，給藥劑量為24 g/kg，約為臨床劑量的274倍。

1.2.2 動(dòng)物分組及劑量 雌、雄動(dòng)物分別按體重進(jìn)行均衡分為陰性對(duì)照組和復(fù)方威麥寧組，每組20只，雌雄各半，于D-1進(jìn)行分組，分組后雌雄動(dòng)物體重不超過各自平均體重的20%。具體分組及劑量信息見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥

注：本實(shí)驗(yàn)中給藥日為試驗(yàn)第1天(D1)，給藥前1天為(D-1)，依次類推。

1.3 各種指標(biāo)的檢測(cè)頻率和方法

1.3.1 臨床觀察 給藥日每次給藥前和給藥后1 h內(nèi)觀察1次；非給藥日每天上午下午各觀察1次。

1.3.2 體重 所有動(dòng)物在給藥前(D-1)進(jìn)行1次稱重用于動(dòng)物分組，D1、D2、D7、D14各稱重1次。體重稱量在上午進(jìn)行。

1.3.3 攝食量 所有動(dòng)物在D2、D7、D13上午測(cè)定飼料添加量，添加后24 h測(cè)定飼料剩余量。計(jì)算各組平均攝食量，平均攝食量=(該組添加量-該組剩余量)/該組動(dòng)物數(shù)。

1.4 組織病理學(xué)檢查 給藥后D15解剖大鼠，解剖后觀察動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎等主要臟器的組織變化進(jìn)行檢查，并記錄所有異常改變。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用SPSS 13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果以均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)表示。對(duì)體重?cái)?shù)據(jù)用Levene’s檢驗(yàn)方法進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)。若方差不齊(P≤0.01)，根據(jù) Welch檢驗(yàn)結(jié)果判斷總體差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義；以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 給予復(fù)方威麥寧膠囊粉末大鼠反應(yīng)情況 復(fù)方威麥寧膠囊對(duì)動(dòng)物的一般毒性表現(xiàn)不明顯。見表2。

表2 復(fù)方威麥寧急性毒性實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果

注：“—”代表正常。

2.2 單次給藥毒性試驗(yàn)體重變化情況 與陰性對(duì)照組比較，復(fù)方威麥寧組雄性動(dòng)物在給藥后D2、D7、D14體重降低，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著(P<0.05)，復(fù)方威麥寧組雌性動(dòng)物給藥后體重未見明顯異常。見表3。

2.3 單次給藥毒性試驗(yàn)攝食量變化情況 CMC-Na組和復(fù)方威麥寧組動(dòng)物給藥后D2、D7和D13攝食量均未見明顯異常。見表4。

2.4 組織病理學(xué)檢查 由圖1、圖2可知，給藥后所有動(dòng)物體表及各主要器官檢查均未發(fā)現(xiàn)明顯的形態(tài)學(xué)異常。

檢測(cè)時(shí)間組別 雄性CMC-Na組 雄性復(fù)方威麥寧組 雌性CMC-Na組 雌性復(fù)方威麥寧組 D-1198.8±4.6198.7±4.6186.9±4.2187.0±3.8D1179.8±5.7178.3±4.9169.5±4.4170.3±4.4D2204.4±5.5 186.3±9.7?185.7±3.4180.0±12.8D7245.1±7.2 222.9±14.2?202.4±6.8196.9±13.6D14308.3±9.9 289.0±10.3?226.4±9.3228.1±21.1

注：與 CMC-Na組比較，*P<0.05。

檢測(cè)時(shí)間組別 雄性CMC-Na組 雄性復(fù)方威麥寧組 雌性CMC-Na組 雌性復(fù)方威麥寧組 D230.81±0.765531.12±3.76326.58±1.89529.15±3.687D732.01±1.64525.56±3.56019.93±2.29722.26±3.371D1337.92±1.34634.11±1.53429.31±5.47323.05±5.523

3 討論

肺癌(Carcinoma of the lungs)是各種惡性腫瘤中發(fā)病率最高的一種。雖然目前對(duì)肺癌的診斷及治療等方面進(jìn)行了不少改進(jìn)，但肺癌病死率仍急速攀升，而且總體生存率仍然相當(dāng)?shù)汀Ｊ澜绶秶鷥?nèi)肺癌5年相對(duì)生存率僅18.1%，我國(guó)肺癌5年生存率僅為16.1%[9]。據(jù)數(shù)據(jù)顯示我國(guó)每年肺癌新發(fā)病例約70.5萬(wàn)人次，死亡病例約56.9萬(wàn)[10]。早期手術(shù)是肺癌根治的唯一手段，但在大部分的患者就診時(shí)已屬晚期，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，放療和化療成為了主要的治療手段，但放、化療也因毒副作用而降低患者的生存質(zhì)量。即使行肺癌完全切除手術(shù)，但術(shù)后轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤死亡的主要原因。

中醫(yī)藥治療肺癌具有增強(qiáng)放、化療療效，減少放、化療的不良反應(yīng)，改善患者生存質(zhì)量，延長(zhǎng)患者生存時(shí)間等優(yōu)勢(shì)，已成為目前肺癌防治中主要組成部分[11-12]。大量的臨床文獻(xiàn)表明，中西醫(yī)結(jié)合治療已成為肺癌臨床治療的主流[13-15]。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為肺癌的主要病理基礎(chǔ)為正氣虛損、邪毒侵犯、臟腑氣血陰陽(yáng)失調(diào)，其發(fā)生與痰、虛、瘀、毒等密切相關(guān)，因此中醫(yī)治療腫瘤的原則是“扶正培本，清熱解毒”[16-18]。復(fù)方威麥寧膠囊其功效為祛邪扶正、清熱解毒、活血化瘀、消瘀散結(jié)、鎮(zhèn)咳祛痰。在醫(yī)院臨床上應(yīng)用了近十年，主要用于治療腫瘤及呼吸系統(tǒng)感染等疾病，其功能定位為肺癌輔助治療藥，能改善患者癥狀，增強(qiáng)人體免疫功能(扶正)等方面的作用。本研究結(jié)果表明其灌胃量相當(dāng)于臨床成人每日常用(0.088 g/kg)的272倍時(shí)，未出現(xiàn)大鼠中毒或死亡情況，無(wú)法測(cè)出LD50，表明復(fù)方威麥寧膠囊無(wú)明顯毒性。觀察期內(nèi)雄性大鼠體重較正常組增長(zhǎng)略微緩慢，其余未見明顯異常。觀察期結(jié)束后解剖病例檢查未發(fā)現(xiàn)臟器腫大、萎縮、壞死等異?，F(xiàn)象。綜上所訴，復(fù)方威麥寧膠囊未見明顯毒理反應(yīng)，該藥是安全可靠的。