抗生素軟膏控制菌檢驗的方法研究

河南省駐馬店市食品藥品檢驗所（463000）趙正威 趙曉麗

河南省駐馬店市中醫(yī)院（463000）段海洋

抗生素軟膏在臨床治療中屬于常見的外用型抗菌抗生素，分為眼膏和抗生素兩種類型。大量研究數(shù)據(jù)顯示，患者使用抗生素軟膏是為了抑菌、提高機體抗感染能力，但是小部分患者在使用金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌污染的抗生素或者眼膏后加重病情甚至會導致失明。這就需要對抗生素安全進行檢驗，保證抗生素使用有效性。用藥前依照規(guī)范要求對其進行再次確定，并對使用抗生素軟膏進行微生物檢查意義重大。國內(nèi)目前針對抗生素軟膏的應(yīng)用已制定相關(guān)標準，需在使用前采取微生物檢驗，但是檢驗受多方面因素影響，易出現(xiàn)誤差或者不成功情況，因此采取何種方式對抗生素軟膏中的微生物加以檢驗成為關(guān)注焦點，我院對抗生素軟膏控菌檢驗中采取離心沉淀方法聯(lián)合薄膜過濾方法，效果極為理想，特作以下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取駐馬店市中醫(yī)院2017年1月～2017年11月68例患者使用的抗生素軟膏隨機分為兩組進行檢驗，設(shè)備儀器如下：①電子天平（生產(chǎn)廠家：上海光正醫(yī)療儀器有限公司），要求最大重量200g，分度值為0.1g，經(jīng)研究人員使用和驗證后確定其精準度符合研究需要。②離心機（生產(chǎn)廠家：長沙湘儀離心機儀器有限公司，容量：4×100ml，12×10ml，轉(zhuǎn)速最高至4000rpm）。③負壓過濾裝置（生產(chǎn)廠家：天津市津騰實驗設(shè)備有限公司）。④試藥：司盤-80、吐溫-80、十四烷酸異丙酯、單硬脂酸甘油酯。菌種：依照研究目的選擇金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌兩種菌種。⑤供試品：本次研究所使用抗生素軟膏均為紅霉素軟膏。⑥培養(yǎng)基：使用常規(guī)試驗用培養(yǎng)基。

1.2 檢驗方法 檢驗前準備：將使用器械及試劑等所需物品進行常規(guī)消毒，保證檢驗結(jié)果。將5g司盤-80、5g吐溫-80和3g單硬脂酸甘油酯放入燒杯中，然后將燒杯放置在提前備好的115℃的恒溫環(huán)境，持續(xù)3min后，保證檢驗物品安全，避免誤差，滅菌完成后，需在使用前再次加熱使其融化，之后靜置于45℃的水中水浴。供試品溶液制作步驟：將5g紅霉素軟膏放入乳化劑中，并在45℃的水中逐漸震動搖晃，直到全部乳化為止。然后將溫度為45℃，濃度為0.9%的氯化鈉溶液加入燒杯中，劑量為80ml，再次行搖勻操作，供試品溶液制作完成。

1.2.1 對照組采取離心沉淀方法，具體步驟如下：將100ml檢驗溶液置于離心管內(nèi)，分別加入金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌菌群約50cfu，然后行離心操作約5min后除去上層液體，將底部含有細菌的液體保留約0.2mL，并加入0.1%的氯化鈉溶液約10mL搖晃均勻。

1.2.2 研究組在對照組基礎(chǔ)上使用薄膜過濾方法。離心檢驗與對照組一致，然后在底部含有細菌的液體中加入氯化鈉溶液約10mL搖晃均勻，并放置于0.45μm空隙的薄膜中進行過濾，然后使用1000ml對溶液進行沖洗置于培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿放置于37℃環(huán)境下20h左右，最多不得超過48h。吸取培養(yǎng)液置于卵黃高鹽瓊脂培養(yǎng)基。

1.3 統(tǒng)計學分析 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS20.0軟件分析。其中計量資料以%表示，采用X2檢驗，計數(shù)資料以（表）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組抗生素軟膏控制菌檢驗陽性率及準確率對比 研究組金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌陽性率及準確率均高于對照組（P<0.05），見附表。

附表 兩組抗生素軟膏控制菌檢驗陽性率及準確率對比(例,%)

2.2 兩組抗生素檢驗效果對比 研究組聯(lián)合方法供試液為均勻乳白色，能夠直觀排除抑菌成分，效果顯著優(yōu)于對照組（P<0.05），研究結(jié)果顯示，兩組檢驗方式雖然都具有較為理想的效果，其供試品顏色為均勻乳白色溶液，但是研究組聯(lián)合使用方式能夠?qū)⑵渲械囊志煞诌^濾掉，菌群生長態(tài)勢較為典型化。

3 討論

抗生素軟膏作為臨床治療常見抗生藥物，分為軟膏和眼膏兩種，主要是將這種藥物外涂于患者傷口或者患處，起到一定的抑菌抗感染的效果。因為該類藥物具有非常明顯的抑菌性，敏感性可達到內(nèi)用藥的基本甚至幾十倍，此外，這種藥物對革蘭陽性球菌的抑制及殺菌效果也極為明顯。主要是用過抑制細菌中的異亮氨酸TRNA合成酶，阻止蛋白質(zhì)與菌群結(jié)合，不良癥狀較小，但是也會因各種內(nèi)外界因素造成不良情況發(fā)生。

研究數(shù)據(jù)證實，金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌兩種抑制菌對抗生素軟膏起到一定破壞作用，對抗生素軟膏形成污染。而這幾種細菌大量存在于人們生活環(huán)境中，像土壤、空氣以及水中都大量存在，而銅綠假單細胞菌喜陰濕，在潮濕環(huán)境中容易大量繁衍。那么如何保存抗生素軟膏，以提高其使用安全性，比對已打開抗生素軟膏中的金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌進行常規(guī)檢驗，一旦發(fā)現(xiàn)超標立即處理，不再使用。因抗生素軟膏自身具有一定的抑菌成分，在傳統(tǒng)的檢驗過程中容易引起檢驗結(jié)果出現(xiàn)偏差，或者出現(xiàn)不成功等現(xiàn)象，對照組檢驗結(jié)果顯示，研究組金黃色葡萄球菌、銅綠假單細胞菌陽性率及準確率均高于對照組（P<0.05）。這就充分說明，研究組經(jīng)過兩種方式檢驗后，抗生素自身抑菌成分得到明顯過濾，對于菌群的檢驗結(jié)果更為真切。此外研究組聯(lián)合方法供試液為均勻乳白色，能夠直觀排除抑菌成分，效果顯著優(yōu)于對照組（P<0.05），這充分表明，雖然兩組檢驗方式都具有較為理想的效果，其供試品顏色為均勻乳白色溶液，但是研究組聯(lián)合使用方式能夠?qū)⑵渲械囊志煞诌^濾掉，菌群生長態(tài)勢較為典型化。離心沉淀方式以離心高速旋轉(zhuǎn)后沉淀分層的原理將抑菌成分加以提取，而過濾法則更為精細化，將抑菌成分更為精準的排出。

綜上所述，抗生素軟膏控制菌檢驗采取離心沉淀方法聯(lián)合薄膜過濾方法可行性強，能夠排除干擾項，檢出準確率更為明顯，應(yīng)進一步推廣使用。