調(diào)強放療聯(lián)合化療對子宮內(nèi)膜癌患者療效和癌基因表達的影響

張明川，王莉

子宮內(nèi)膜癌是在圍絕經(jīng)期以及絕經(jīng)后女性中一種較為常見的生殖道惡性腫瘤，大約占婦科腫瘤的30%，且發(fā)病率和病死率在世界范圍內(nèi)均有持續(xù)上升的趨勢，臨床癥狀一般表現(xiàn)為陰道不規(guī)則出血[1]?；加凶訉m內(nèi)膜癌的患者其原癌基因與抑癌基因會產(chǎn)生突變，影響子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展，嚴重威脅著患者的健康[2]。臨床上常使用手術(shù)切除治療，但是單純的手術(shù)治療效果往往不佳，患者仍需接受放療或者化療，提高其治療效果。目前化療和放療的方案不一，不同的治療方案其治療效果不同[3]。本研究使用調(diào)強放療聯(lián)合紫杉醇+鉑類（TC）化療治療子宮內(nèi)膜癌，旨在探究其治療效果及對患者原癌基因、抑癌基因的影響。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2017年1月—2018年1月在我院收治的100例Ⅲ期子宮內(nèi)膜癌患者，按照數(shù)字隨機表法分為化療組和聯(lián)合組各50例?；熃M患者年齡35～55歲，平均（45.5±9.5）歲，腺癌26例，鱗癌24例；淺肌層浸潤患者18例，深肌層浸潤患者32例；Ⅲa期患者18例，Ⅲb期患者11例，Ⅲc期患者21例；化療組患者年齡34～52歲，平均（42.5±9.5）歲，腺癌22例，鱗癌28例；淺肌層浸潤患者21例，深肌層浸潤患者29例；Ⅲa期患者19例，Ⅲb期患者15例，Ⅲc期患者16例。排除標準：排除有放療史、化療史的患者；排除心功能不全的患者，排除存在溝通障礙的患者，排除并發(fā)其他惡性腫瘤的患者，排除妊娠期或哺乳期婦女；排除在其他醫(yī)療機構(gòu)接受過治療的患者。本研究所有患者及其家屬均知情，簽署知情通知書，并經(jīng)過我院倫理委員會批準。2組患者在年齡、病理類型、浸潤程度及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 2組患者一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 治療方法2組患者在進行化療和調(diào)強放療前均進行常規(guī)手術(shù)治療，留取腹腔沖洗液行細胞學(xué)檢查找癌細胞，行筋膜外全子宮+雙附件切除+盆腔淋巴結(jié)切除術(shù)。化療組在術(shù)后進行常規(guī)化療治療，使用紫杉醇+鉑類（TC）化療方案，紫杉醇135 mg/m2與0.9%的氯化鈉注射液500 mL進行靜脈滴注；卡鉑300 mg/m2與0.9%的氯化鈉注射液500 mL進行靜脈滴注。21 d為一個療程，持續(xù)2個療程。聯(lián)合組在化療組的基礎(chǔ)上使用調(diào)強放療進行治療，在化療治療2個療程結(jié)束后，進行調(diào)強放療，運用CT模擬定位增強掃描，范圍為第3腰椎椎體上緣水平至坐骨結(jié)節(jié)下5 cm，其中層距3 cm，進行規(guī)范行靶區(qū)勾畫，使用調(diào)強計劃設(shè)計，使用5-7野進行調(diào)強放療，劑量 1.8～2.0 Gy/次，4～5 次/周，放療共進行 24～28 次，總放射劑量為50.4～56.0 Gy。治療過程中若患者出現(xiàn)嚴重放射免疫排斥，則及時終止放射治療。

1.2.2 治療前后生活質(zhì)量評分使用癌癥生活質(zhì)量量表（QLQ-52）[4]對2組患者治療前后生活質(zhì)量進行評分，共包括生理功能、心理功能、獨立性、社會關(guān)系、環(huán)境及精神支柱等6個功能子量表，包括52個條目；每個功能評分共100分，分數(shù)越高，患者的生活質(zhì)量越好。

1.2.3 治療效果根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的標準評定治療效果[5]，完全緩解：患者所有病變均消失。部分緩解：患者腫瘤直徑總和縮小范圍≥30%；穩(wěn)定：患者腫瘤直徑總和縮小的范圍＜30%，增大的范圍＜25%；進展：患者機體內(nèi)出現(xiàn)其他病變，腫瘤增大范圍＞25%，又有新的腫瘤出現(xiàn)。治療總有效率=完全緩解率+部分緩解率。

1.2.4 檢測原癌基因、抑癌基因表達量抽取2組患者治療前后清晨空腹靜脈血5 mL，在抗凝管中保存，之后使用轉(zhuǎn)速為3 000 r/min的離心機，離心處理20 min，放入潔凈的EP試管中，分離上層血清，在-80℃環(huán)境中保存,待用。采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)對原癌基因c-erbB2、c-myc、K-ras，抑癌基因P53、P16、第10號染色體上磷酸酶和張力蛋白同源缺失的基因（PTEN）進行檢測，嚴格按照定量PCR儀的操作說明書進行。依次加入反應(yīng)物2.5 μL的稀釋10倍的PCR緩沖液，1.5 μL MgCl2溶液，0.5 μL上游引物和下游引物，最后加水配成總體積為25 μL的反應(yīng)體系。PCR反應(yīng)條件是：94℃反應(yīng)1 min；55℃反應(yīng) 1 min；72℃反應(yīng) 1 min，進行35個循環(huán)，72℃反應(yīng)延長5 min，重復(fù)最少3次；以βactin為內(nèi)參基因。采用2-ΔΔCt方法計算出需要檢測c-erbB2、c-myc、K-ras、P53、P16、PTEN 的表達量。

1.2.5 不良反應(yīng)對2組患者在治療過程中出現(xiàn)的神經(jīng)癥狀、消化道癥狀、脊髓抑制以及惡心嘔吐等不良反應(yīng)進行統(tǒng)計，并進行組間比較。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。定量資料用均數(shù)±標準差（±s）描述，組間比較采用兩獨立樣本均數(shù)的t檢驗，治療前后比較采用配對t檢驗；定性資料用例數(shù)和百分比進行描述，組間比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者治療前后生活質(zhì)量評分比較2組患者治療前生活質(zhì)量評分比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后2組患者生活質(zhì)量評分均高于治療前，且聯(lián)合組患者生活質(zhì)量評分高于化療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 2組患者治療前后生活質(zhì)量評分比較 （分±s）

表2 2組患者治療前后生活質(zhì)量評分比較 （分±s）

組別 n 生理功能治療前 治療后化療組 50 70.24±2.89 79.26±3.26 14.640 0.001聯(lián)合組 50 70.25±2.88 86.24±4.57 20.930 0.001 t 0.017 8.792 P 0.986 0.001 t P組別 n 心理功能治療前 治療后化療組 50 69.73±2.01 81.25±3.98 18.270 0.001聯(lián)合組 50 69.24±2.00 87.24±4.61 25.330 0.002 t 1.221 6.955 P 0.225 0.001 t P組別 n 獨立性治療前 治療后化療組 50 71.11±3.11 80.11±3.24 14.170 0.001聯(lián)合組 50 71.24±3.12 84.33±4.12 17.910 0.001 t 0.209 5.693 P 0.835 0.001 t P組別 n 社會關(guān)系治療前 治療后化療組 50 78.24±3.13 81.53±3.66 4.831 0.001聯(lián)合組 50 78.26±3.11 85.26±4.53 9.008 0.001 t 0.032 4.529 P 0.974 0.001 t P組別 n 環(huán)境治療前 治療后化療組 50 70.15±2.98 85.24±4.52 19.710 0.001聯(lián)合組 50 70.17±2.99 89.34±5.12 22.860 0.001 t 0.034 4.245 P 0.973 0.001 t P組別 n 精神支柱治療前 治療后化療組 50 65.23±1.98 79.56±3.28 26.450 0.001聯(lián)合組 50 65.31±2.01 82.37±4.12 26.320 0.001 t 0.201 3.773 P 0.842 0.001 t P

2.2 2組患者治療效果比較聯(lián)合組治療總有效率為60.00%，高于手術(shù)組的38.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.842，P=0.028）。見表 3。

表3 2組患者治療效果比較 例（%）

2.3 2組患者治療前后原癌基因c-erbB2、c-myc、K-ras的表達量比較治療前2組患者原癌基因的表達量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后2組患者原癌基因的表達量均低于治療前，且聯(lián)合組患者原癌基因的表達量低于化療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表 4。

2.4 2組患者治療前后抑癌基因P53、P16、PTEN的表達量比較治療前2組患者抑癌基因的表達量比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療后2組患者抑癌基因的表達量均高于治療前，且聯(lián)合組患者抑癌基因的表達量高于化療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表 5。

2.5 2組患者治療過程中不良反應(yīng)發(fā)生情況比較聯(lián)合組治療過程中不良反應(yīng)發(fā)生率為4.00%，顯著低于化療組的16.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=4.00，P＜0.05）。見表 6。

3 討論

目前臨床上對于子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機制尚不明確，有研究表明，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生與原癌基因、抑癌基因的突變有關(guān)[6]。臨床上手術(shù)治療效果不佳，本研究選取在我院進行治療的子宮內(nèi)膜癌患者，使用調(diào)強放療與化療進行治療，探究兩者聯(lián)合治療子宮內(nèi)膜癌的效果及對機體原癌基因、抑癌基因的影響，為臨床上此病的治療提供新的方向。調(diào)強放療是在三維適形放療的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的一種新型的放療治療技術(shù)，對患者進行術(shù)前的增強CT掃描，幫助確定進行調(diào)強放療的放射區(qū)域，劃分放射區(qū)域，制定各放射區(qū)域的放射劑量，使病變部位的放射量提高，病變周圍的組織放射量降低，一方面可以有效提高治療效果，另一方面可以有效降低對病變周圍組織的損傷[7-8]。有研究表明，使用調(diào)強放療在多種惡性腫瘤的治療中，均取得良好的治療效果[9-10]。本研究結(jié)果也顯示，聯(lián)合組患者進行治療的不良反應(yīng)發(fā)生率低于化療組（P＜0.05）。

有研究已證實c-erbB2、c-myc、K-ras為代表的原癌基因，以P53、P16、PTEN為代表的抑癌基因等在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展等過程中的作用[11-12]。原癌基因c-erbB2和表皮生長因子受體（EGFR）的結(jié)構(gòu)類似，可以對細胞的生長分化以及發(fā)育過程進行調(diào)節(jié)[13]。原癌基因c-myc所參與編碼的核轉(zhuǎn)錄蛋白，可以對細胞的增殖、分化以及凋亡的過程進行參與，在不同的子宮內(nèi)膜病變中，c-myc的表達不同[14]。原癌基因K-ras是ras基因的一種，位于人12號染色體上，ras基因被突變激活后的表達會對細胞產(chǎn)生刺激，誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生，K-ras基因會對子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生產(chǎn)生很大的影響[15-16]。在患有子宮內(nèi)膜癌的患者機體內(nèi)，原癌基因c-erbB2、c-myc、K-ras呈現(xiàn)高表達的狀態(tài)，參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展。本研究結(jié)果顯示治療后2組患者c-erbB2、c-myc、K-ras表達水平均低于治療前，且聯(lián)合組的表達水平顯著低于化療組。

表4 2組患者治療前后原癌基因c-erbB2、c-myc、K-ras的表達量比較 （±s）

表4 2組患者治療前后原癌基因c-erbB2、c-myc、K-ras的表達量比較 （±s）

組別 n c-erbB2 c-myc K-ras治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后化療組 50 0.23±0.03 0.12±0.02 21.570 0.001 0.93±0.06 0.80±0.02 14.530 0.001 0.88±0.12 0.62±0.07 13.230 0.001聯(lián)合組 50 0.24±0.04 0.09±0.01 25.720 0.001 0.92±0.07 0.56±0.01 36.000 0.001 0.86±0.13 0.50±0.01 19.520 0.001 t 1.414 9.487 0.767 75.890 0.780 12.000 P 0.160 0.001 0.445 0.001 0.426 0.001 t P t P t P

表5 2組患者治療前后抑癌基因P53、P16、PTEN的表達量比較 （±s）

表5 2組患者治療前后抑癌基因P53、P16、PTEN的表達量比較 （±s）

組別 n P53 P16 PTEN治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后化療組 50 0.60±0.03 0.73±0.06 13.700 0.001 0.53±0.06 0.70±0.11 9.594 0.001 0.62±0.04 0.81±0.01 32.580 0.001聯(lián)合組 50 0.61±0.02 0.98±0.01 117.000 0.001 0.52±0.04 0.96±0.03 62.230 0.001 0.63±0.03 0.94±0.06 32.680 0.001 t 1.961 29.060 0.981 16.120 1.414 15.110 P 0.053 0.001 0.329 0.001 0.160 0.001 t P t P t P

表6 2組患者治療過程中不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 例（%）

抑癌基因P53是由11個外顯子以及10個內(nèi)含子構(gòu)成的，主要位于人染色體17p13.1，P53基因的產(chǎn)物P53蛋白可以激活進行轉(zhuǎn)錄，P53基因可以對細胞的生長過程進行調(diào)節(jié)，可以有效抑制細胞的轉(zhuǎn)化生長，但是若出現(xiàn)基因突變或者基因丟失，會促使腫瘤的形成[17]。抑癌基因P16主要位于人染色體9p21，P16基因的產(chǎn)物P16蛋白可以激活進行轉(zhuǎn)錄，其產(chǎn)物是由148氨基酸構(gòu)成的，可以對癌癥進行有效抑制，是一種抑癌蛋白，負調(diào)控細胞的增殖作用來對細胞的分裂和增殖進行抑制[18]。抑癌基因PTEN主要位于人染色體10q23.3上，可以對子宮內(nèi)膜的過度增生、癌變的發(fā)生起到抑制的作用[19]。在患有子宮內(nèi)膜癌的患者機體內(nèi)，抑癌基因P53、P16、PTEN呈現(xiàn)低表達的狀態(tài)，參與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展。本研究結(jié)果顯示治療后2組患者P53、P16、PTEN表達水平均高于治療前，且聯(lián)合組的表達水平顯著高于化療組。但目前臨床上尚無對于子宮內(nèi)膜癌患者運用調(diào)強放療、化療治療后影響癌基因的研究，因此筆者認為調(diào)強放療聯(lián)合化療改善患者原癌基因、抑癌基因的異常表達的結(jié)果還需后續(xù)研究進一步證實。

本研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合組的生活質(zhì)量評分均高于化療組；其治療過程中的不良反應(yīng)發(fā)生率低于化療組，治療效果高于化療組。李國強等[8]研究高危子宮內(nèi)膜癌術(shù)后調(diào)強放療聯(lián)合TC化療的治療效果，認為調(diào)強放療聯(lián)合TC化療效提高高危子宮內(nèi)膜癌術(shù)后的生存質(zhì)量，治療效果較好，與本研究結(jié)果一致。

綜上所述，對子宮內(nèi)膜癌患者進行術(shù)后的化療聯(lián)合調(diào)強放療治療，治療效果顯著，不良反應(yīng)較少，可有效改善原癌基因、抑癌基因的表達情況，提高患者生活質(zhì)量。