藥用茶葉提取物的制備工藝研究

付長華

（花園藥業(yè)股份有限公司 浙江金華 322121）

茶葉提取物經(jīng)過精制達(dá)到藥用級要求就是藥用茶葉提取物。茶葉提取物中的主要成份為茶多酚，茶多酚是茶葉中兒茶素類、黃酮類、酚酸類和花色素類化合物的總稱，約占茶葉干重的15%～25%，兒茶素類化合物主要包括表兒茶素類（EC）、表沒食子兒茶素（EGC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）和表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）[1]。據(jù)有關(guān)報(bào)道，茶多酚在降血脂、抑制血栓的形成、降血壓、擴(kuò)張血管、抑制脂質(zhì)過氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化等領(lǐng)域均有著不容忽視的重要作用。茶多酚在醫(yī)藥、日化、化妝品、食品、油脂、保健等諸多方面具有廣闊的應(yīng)用前景，然而茶葉中含有的咖啡堿易引起中樞神經(jīng)興奮，有提神、醒腦的功效。1989 年，Lima DR 的研究報(bào)道稱，對咖啡堿敏感的人群一次性攝取10 mg 咖啡堿便會(huì)引起某些不適癥狀，如焦慮、惡心、頭痛和失眠等。因此，藥用茶葉提取物工藝研究就是要獲得高含量的兒茶素及低含量的咖啡因（Caf），在醫(yī)藥領(lǐng)域有諸多含藥用茶葉提取物的藥品被應(yīng)用于臨床，如心腦健片、心腦健膠囊、茶色素膠囊等，這些產(chǎn)品作為心血管治療藥物已投入生產(chǎn)和臨床使用。茶葉提取物的制備工藝研究最早興起于上世紀(jì)60 年代，而工業(yè)化生產(chǎn)開始于上世紀(jì)90 年代。參照國內(nèi)公開的茶葉提取物的制備工藝報(bào)道，大致有以下幾種：（1）溶劑提取-金屬離子沉淀富集-酸溶解-有機(jī)溶劑萃取-回收溶劑-干燥[2]；（2）溶劑提取-回收濃縮-氯仿萃取脫除咖啡因-乙酸乙酯萃取[3]；（3）浸漬滲漏冷提取-二級萃取-二級柱分離[4]。藥用級茶葉提取物的制備工藝主要包括：茶葉選擇→提取→過濾→堿沉→酸溶→萃取→濃縮→干燥→粉碎→包裝。本研究主要對藥用茶葉提取物的生產(chǎn)制備關(guān)鍵工藝進(jìn)行了研究。現(xiàn)報(bào)道如下：

1 儀器與材料

1.1 儀器 提取罐、堿沉罐、酸溶罐、減壓濃縮器（均由浙江金安制藥機(jī)械有限公司提供）；離心萃取機(jī)（鄭州天一萃取科技有限公司）；真空干燥箱（常州潤邦干燥設(shè)備有限公司）；高效液相色譜儀（Aligent公司）。

1.2 材料 茶葉（浙江省東陽市東白山茶場、蘇州古雨春茶業(yè)有限公司）；氫氧化鈣（上海江滬鈦白化工制品有限公司）；乙酸乙酯（安徽華誼化工有限公司）。

2 工藝研究與結(jié)果

2.1 茶葉選擇 對不同產(chǎn)地、不同采用季節(jié)、不同加工方式、不同批次茶葉的主要成分含量進(jìn)行了測定，并對結(jié)果進(jìn)行比較，最后選用在春夏兩季采收的浙江東白山高山茶葉，用設(shè)備進(jìn)行全自動(dòng)加工，收集茶片。要求為細(xì)度過60 目的細(xì)茶片≤20%，茶葉中含有的EC 和EGCG 總量≥6%。見表1。

表1 不同產(chǎn)地茶葉樣品中主要成分含量（%）

2.2 提取 將原料投入提取罐中，溫度控制在80℃，提取30 min，將提取液過濾至堿沉淀罐，再將茶葉渣排出。茶多酚熱敏性高，提取溫度不宜過高，溫度控制在70～90℃，提取時(shí)間不宜過長，控制在15～30 min/次，8～10 倍量水提取2 次，收集前2 次提取液，有效成分的提取率可達(dá)80%以上。

2.3 過濾 由于碎茶原料中細(xì)末多、含有一定的泥沙和雜質(zhì)，容易造成出料堵塞，過濾時(shí)間長，會(huì)限制生產(chǎn)的進(jìn)度，我們通過在多功能提取罐底部增加篩網(wǎng)很好地解決了這一難題。

2.4 堿沉

2.4.1 堿的種類選擇 根據(jù)金屬離子沉淀法原理，取Ca（OH）2、NaOH、KOH 和Na2CO3等4 種堿，均配制成濃度為5%的稀溶液，分別取4 份提取液，向提取液中滴加對應(yīng)堿液，觀察現(xiàn)象，由實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象判斷Ca（OH）2可作為沉淀劑。見表2。

表2 堿的種類選擇

2.4.2 堿沉形式實(shí)驗(yàn) 取Ca（OH）2固體粉末分別配成飽和石灰水、石灰乳，另取不經(jīng)處理的固體粉末，取3 份提取液，進(jìn)行堿沉實(shí)驗(yàn)。用飽和石灰水堿沉?xí)r，沉淀沉降較慢；用石灰乳時(shí)，沉淀沉降較快；加固體粉末時(shí)，沉淀沉降速度與加石灰乳相當(dāng)，但需快速攪拌。通過向提取物中加入堿，使提取液中的茶多酚沉淀下來，起到富集茶多酚并使其與其他限制性成分分離的效果。但查閱相關(guān)文獻(xiàn)可知，茶多酚在堿性環(huán)境極易被氧化破壞，因此，堿沉?xí)r應(yīng)盡量避免茶多酚被破壞。Caf 是弱酸性生物堿，具有親和性，可與茶多酚發(fā)生共沉淀現(xiàn)象，導(dǎo)致堿沉過程Caf 也隨茶多酚一起沉淀，使后續(xù)脫除壓力加大，直接導(dǎo)致提取物中Caf 含量偏高，所以堿沉速度要快。見表3。

表3 堿沉形式實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.5 酸溶 酸轉(zhuǎn)溶是關(guān)鍵控制點(diǎn)，若溶解不完全，會(huì)造成有效成分損失量很大，小試選擇用鹽酸溶液作為轉(zhuǎn)溶液，系統(tǒng)呈糊狀，無法操作，因此，最終選擇了檸檬酸。

2.6 萃取 將茶葉提取液和乙酸乙酯按1:1 的比例加入離心萃取機(jī)中進(jìn)行萃取。我們比較以下3 種萃取方式：（1）攪拌萃取：乙酸乙酯消耗大，操作過程易出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)室離心（4 000 r/min，5 min）或靜置過夜仍無法消除，會(huì)造成EGCG 約5%的損失。（2）模擬逆流萃取柱萃?。褐性囍心M逆流萃取原理，自制逆流萃取柱進(jìn)行萃取，與攪拌萃取相比，萃取過程不會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，但萃取效率不高。（3）離心萃?。阂宜嵋阴ハ妮^攪拌萃取可減少約30%，且不會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，主要成分萃取率高達(dá)95%以上，不會(huì)造成有效成分的損失。通過3 種萃取方式的比較，最終采用離心萃取的方式，萃取比例為1:1。不同單體在水相和有機(jī)相中分配行為不同，利用離心萃取機(jī)的離心作用力能使水相和有機(jī)相實(shí)現(xiàn)快速混合及分離，有機(jī)相中可獲得純度高的有效成分，經(jīng)過2 級離心萃取，可提高茶葉提取物中有效成分的純度和產(chǎn)率，使用的有機(jī)溶劑可回收利用，大大降低了成本，減少了污染。

2.7 濃縮、干燥、粉碎、包裝 萃取液用減壓濃縮器濃縮至白利度為30%～40%，在D 級GMP 車間收膏，采用減壓真空干燥；低溫粉碎，過100 目篩，包裝即得藥用級茶葉提取物。

2.8 樣品含量測定 取3 批藥用級茶葉提取物，按照2015 版《中國藥典》一部[5]，對茶葉提取物含量進(jìn)行檢測，產(chǎn)品均符合藥用級的要求。見表4。

表4 樣品含量測定結(jié)果（%）

3 討論

茶葉提取物生產(chǎn)工藝技術(shù)研究隨著新產(chǎn)品的應(yīng)用及開發(fā)不斷深入，應(yīng)用范圍也在不斷擴(kuò)大。現(xiàn)在，國家對藥品安全越來越重視，監(jiān)管力度不斷加大，相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)、制藥裝備也在不斷發(fā)展，新技術(shù)、新工藝使茶葉提取物的生產(chǎn)更加規(guī)范，產(chǎn)能和收率都有較大的提升。隨著國家環(huán)保監(jiān)管趨嚴(yán)，企業(yè)圍繞節(jié)能減排進(jìn)行了研究和開發(fā)，通過技術(shù)創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)了綠色合成和環(huán)境友好生產(chǎn)。茶葉中含有咖啡因、氨基酸、花黃素等大量的天然植物提取物，我們應(yīng)深度發(fā)掘并研究出新產(chǎn)品，以擴(kuò)展茶葉提取物終端消費(fèi)的產(chǎn)品研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化，進(jìn)而打造茶葉提取物的科研成果產(chǎn)業(yè)鏈。