GRP78、CHOP和 Beclin-1與持續(xù)性房顫患者左心耳的關(guān)系

劉金鵬，張二偉,張格慶,白夢媛,費 瑜

(吉林大學(xué)第二醫(yī)院 心內(nèi)科,吉林 長春130041)

左心耳(LAA)是從左心房起始的指狀延伸，具有緩解心房壓力和分泌心房肽等作用[1,2]。有研究顯示，復(fù)雜的LAA結(jié)構(gòu)和功能與持續(xù)性房顫(PeAF)病理過程有關(guān)[3-6]，但也有不同的報道[7]，為此，本文對PeAF患者LAA結(jié)構(gòu)功能進(jìn)行檢測，并探討GRP78、 CHOP和 Beclin-1與LAA結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

依據(jù)《心房顫動:目前的認(rèn)識和治療的建議-2018》[8]和《赫爾辛基宣言》，選擇2017年1月-2018年4月我院行食道超聲心動圖(TEE)的陣發(fā)性AF(PAF)和PeAF患者，前者27例，男15例，女12例，年齡63.56±11.29歲，后者18例，男12例，女6例，年齡69.72±10.59歲。兩組患者經(jīng)詢問病史、體格檢查、有關(guān)實驗室、常規(guī)心電圖及心臟超聲等檢查后比較一般資料，結(jié)果具有可比性。惡性腫瘤，內(nèi)分泌性及自身免疫性疾病，嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全，感染性疾病，肺纖維化，急性心梗，心肌病，風(fēng)心病，嚴(yán)重高血壓未控制(血壓≥160/100 mmHg)，近期(1個月內(nèi))重大手術(shù)史等均排除本研究范圍之外。

1.2 實驗方法

用彩色多普勒超聲儀(Philips iE33，荷蘭)在LAA的長軸切面測量如下指標(biāo)。

1.2.1LAA的形態(tài)結(jié)構(gòu) 在LAA最大舒張狀態(tài)時：①測量左心房與 LAA壁交界點至LAA與左上肺靜脈交界點的距離，即LAA開口的寬度(LAAW)；②測量LAAW中點至LAA頸部的距離，即LAA長度(LAAL)。

1.2.2LAA的功能 將取樣線與LAA長軸角度調(diào)到最小，在AF節(jié)律下使用脈沖多普勒：①測量LAA血流頻譜中的最大正向流速，即LAA排空速度(LAA-EV);②測量LAA血流頻譜中的最大負(fù)向流速，即LAA充盈速度(LAA-FV)。

1.2.3采集所有患者肘靜脈血，將5 ml的血液以3 000 r/min 離心，10 min后收取上清，-80℃保存待測。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CHOP)和 Beclin-1 的水平采用ELISA檢測。試劑盒購于塔爾德生物技術(shù)有限公司。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 PeAF患者血漿GRP78、 CHOP和Beclin-1水平與左心耳結(jié)構(gòu)功能的變化

與PAF組比較，PeAF組血漿 GRP78、CHOP 和 Beclin-1 的水平以及LAAW、LAAL均明顯升高，而LAA-EV、LAA-FV均明顯降低(P<0.05)(見表1)。

表1 PeAF患者血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平與左心耳結(jié)構(gòu)功能的變化

*P<0.05，與 PAF組相比

2.2 相關(guān)分析

LAAW和LAAL分別與血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明顯正相關(guān)(r=0.571，r=0.592；r=0.498，r=0.439；r=0.419，r=0.500，均P<0.05)；LAA-EV和LAA-FV分別與血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.599，r=-0.480；r=-0.421，r=-0.438；r=-0.487，r=-0.526，均P<0.05)。

3 討論

近年研究發(fā)現(xiàn),LAA口部主要是由富含彈性纖維的膠原層組成，其內(nèi)有少量散雜的心肌細(xì)胞，但沒有血管成分。它是多條優(yōu)勢傳導(dǎo)通路如Bachmann束、Marshal韌帶等交匯處,成為潛在的折返性心律失常的關(guān)鍵傳導(dǎo)區(qū)，因此它是房性心律失常產(chǎn)生和維持的重要部位[9]。有研究發(fā)現(xiàn) PeAF患者LAAW明顯大于PAF患者，舒張期 LAA-EV明顯小于非PeAF患者[3,4]。還有研究發(fā)現(xiàn),隨著AF病程的延長，心房與心室也會發(fā)生相應(yīng)變化，如左心房內(nèi)徑、左心室內(nèi)徑、 LAAW、 LAAL增大，左心室射血分?jǐn)?shù)、LAA-EF、LAA-EV、LAA-FV降低等[5]。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)報道大致相符，進(jìn)一步證明PeAF患者存在LAA結(jié)構(gòu)和功能異常。

以往的研究顯示AF心房肌組織和心耳組織中有GRP78、CHOP、 GRP94和Beclin-1表達(dá)，它們與心房內(nèi)徑增大呈正相關(guān)[10-12]，但近年來有關(guān)PeAF與LAA形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系越來越受到人們重視。Kishima H回顧性研究了225名患者(PeAF76例，PAF70例，對照組79例)，并用超聲心動圖和計算機(jī)斷層掃描研究LAA形態(tài)與其重塑的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PeAF的發(fā)生與非雞翼型LAA的高發(fā)病率相關(guān)，它的重塑可導(dǎo)致LAA形態(tài)學(xué)改變[13]。本研究發(fā)現(xiàn)PeAF患者血漿 GRP78、CHOP 和 Beclin-1的水平升高，且與LAAW、LAAL、LAA-EV和LAA-FV密切相關(guān)，提示GRP78、CHOP 和 Beclin-1影響了PeAF 患者LAA結(jié)構(gòu)和功能。GRP78和CHOP是一種與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上啟動未折疊蛋白反應(yīng)跨膜蛋白相結(jié)合的結(jié)合蛋白，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時，它們與跨膜蛋白分離，并啟動未折疊蛋白反應(yīng)，同時激活一系列細(xì)胞凋亡信號途徑，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，因而它是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的標(biāo)志性蛋白。Beclin-1是細(xì)胞發(fā)生自噬的一種關(guān)鍵蛋白，作為一種調(diào)控自噬和凋亡之間平衡的重要連接分子，它的升高不僅預(yù)示細(xì)胞發(fā)生自噬，而且預(yù)示著細(xì)胞凋亡發(fā)生。PeAF患者發(fā)生的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在引起心房細(xì)胞凋亡的同時，可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，這種自噬是一種適應(yīng)性反應(yīng)，對維持基本的細(xì)胞代謝中起著重要作用，當(dāng)嚴(yán)重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激不能被自噬所逆轉(zhuǎn)，過度自噬將再一次啟動細(xì)胞凋亡途徑，加重心房細(xì)胞凋亡，這種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬相互影響相互作用，改變了PeAF患者LAA 結(jié)構(gòu)，并影響了它的功能，而功能改變可促進(jìn)結(jié)構(gòu)重構(gòu)，結(jié)果導(dǎo)致PeAF的發(fā)生和持續(xù)。

引起PeAF患者內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬變化的確切因素還不十分清楚，結(jié)合文獻(xiàn)我們推測可能是與下列因素有關(guān)：①LAA解剖特點和血流動力學(xué)引起LAA壓力過高，當(dāng)LAA入口明顯增寬,并呈球形或半球形改變不能緩解壓力時，過高的壓力迫使心房細(xì)胞能量代謝障礙和鈣超載，它們可以引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[14]，進(jìn)而誘發(fā)自噬。②過高壓力可刺激LAA壓力感受器，促進(jìn)神經(jīng)內(nèi)分泌物質(zhì)釋放，如利鈉肽，腎素血管緊張素系統(tǒng)等，它們可引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[6,11,15]，進(jìn)而誘發(fā)自噬。③LAA壓力過高可使機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激[16]和炎癥反應(yīng)，進(jìn)而激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，造成LAA組織損傷，同時誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生自噬。

綜上所述，本研究進(jìn)一步證明了LAA結(jié)構(gòu)功能異常與PeAF有關(guān)，發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬是LAA結(jié)構(gòu)功能改變的原因之一。但本研究還存在收集的病例數(shù)較少以及未對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬導(dǎo)致PeAF患者LAA結(jié)構(gòu)功能改變的具體信號通路進(jìn)行研究的不足。因此，相關(guān)內(nèi)容有待于進(jìn)一步深入研究。