Elabela在鑒別腎嫌色細胞細胞癌和嗜酸細胞瘤中的意義

徐 鋒，吳 瓊，婁 巖，張藝獻，欒如梅，姜福全

(1.吉林大學第二醫(yī)院 腎病內科，吉林 長春130041； 2.吉林大學中日聯誼醫(yī)院 a.病理科；b.泌尿外科，吉林 長春130033)

腎嫌色細胞癌(CRCC)是一種低度惡性的腫瘤，具有發(fā)生肉瘤樣去分化和遠處轉移的可能。腎嗜酸細胞瘤(Oncocytoma)是一種典型的良性腫瘤，二者預后差異很大[1]。嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤均起源于腎小管，兩者在組織學形態(tài)和免疫表型上經常出現重疊而造成診斷上的困難，二者均可表現為顆粒狀的嗜酸性胞漿和界限不清的細胞輪廓。免疫組織化學染色有助于來區(qū)分這兩種疾病，CK7是臨床最常應用的指標之一。然而現有的免疫組化指標還存在一些缺陷，臨床上亟需一種特異性更強的免疫組化指標。

Elabela(ELA)又稱為Apela或Toddler，是2013年發(fā)現的G蛋白偶聯受體-血管緊張素Ⅱ 1型受體相關蛋白(APJ)的內源性配體[2-5]，在成體動物體內集中分布在腎臟，前列腺和血管內皮[2,6-9]。已有研究證實，ELA可以促進細胞增殖，減少細胞凋亡[10]，加速血管生成[6]，與腫瘤血管發(fā)生和腫瘤生長關系密切[11-12]。最近研究表明，ELA在腎臟腫瘤病理鑒別診斷上具有一定意義[13]。本研究，我們應用免疫組化染色法檢測了ELA在腎嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤中的表達情況，探討其在這兩種腎臟腫瘤診斷和鑒別診斷中的意義。

1 材料與方法

1.1 材料收集2001年-2019年間吉林大學中日聯誼醫(yī)院和吉林大學第一醫(yī)院收治28例腎嫌色細胞癌和16例嗜酸細胞瘤病例標本。ELA購自美國AbboMax公司，生物素化的山羊抗多價(羊抗兔IgG)購自中國中杉金橋生物技術有限公司。

1.2 方法根據WHO 2013分類標準，所有腫瘤均根據HE染色進行形態(tài)學分類，兩名高年資主治以上病理醫(yī)師盲法判斷免疫組化結果。對于每種染色，記錄陽性細胞的百分比。超過10%腫瘤細胞陽性的病例為陽性，低于10%者記為陰性。

1.3 免疫組化檢測石蠟包埋的組織標本進行常規(guī)切片,厚度4 μm。采用En Vision 2步法進行免疫組織化學法染色。使用Leica DM500 microscop(Leica DFC295)觀察分析結果并拍照。

1.4 統計學分析運用SPSS 24.0軟件對數據資料進行處理，等級資料的秩和檢驗用于各項免疫組化表達差異的比較。以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HE染色28例嫌色細胞癌，瘤組織主要呈致密片狀排列，由薄的纖維血管分開，5例具有管狀結構，1例小梁狀結構，1例具有乳頭狀結構。瘤細胞中等大小，胞質豐富，嗜酸性，邊界清楚，核不規(guī)則(圖1 A)。16例嗜酸細胞瘤，瘤組織主要呈巢狀或管狀排列。3例見瘤體中央纖維瘢痕。瘤細胞由幾乎圓形的嗜酸細胞構成?？梢姴糠旨毎嗽龃蟆⒉灰?guī)則，染色質呈粗大顆粒樣(圖1 B)。

2.2 免疫組織化學染色CK7 在胞質、胞膜表達。嫌色細胞癌67.86%(19/28)具有彌漫陽性表達，7.14%(2/28)具有散在陽性表達。嗜酸細胞瘤37.5%(6/16)具有灶狀陽性表達，25%(4/16)具有散在陽性表達。CK7在嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤兩者當中的表達，差異不具有統計學意義，P>0.05(表1)。

ELA 在胞質中表達。嫌色細胞癌10.71%(3/28)具有陽性表達，21.43%(6/28)具有灶狀陽性表達， 60.71%(17/28)具有散在陽性表達， 7.14%(2/28)無表達(圖2 A)。嗜酸細胞瘤6.25%(1/16)具有灶狀陽性表達，37.5%(6/16)具有散在陽性表達，56.25%(9/16)無表達(圖2 B)。ELA在嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤兩者當中的表達，差異具有統計學意義，P<0.01(表1)。

表1 CK7和ELA免疫組化在腎嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤中的表達差異比較

注：a:CK7 嫌色細胞癌&嗜酸細胞瘤；b:CK7 嫌色細胞癌&嗜酸細胞瘤

圖1 腎嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤形態(tài)學(20×10) 圖2腎嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤免疫組化差異表達ELA(+)(20×10)

3 討論

腎癌約占全球所有癌癥診斷和癌癥死亡人數的2%。腎嫌色細胞癌和腎嗜酸細胞瘤是腎臟組織中較為少見的兩種腫瘤，分別占腎臟腫瘤的5%-7%和5%-9%[1]。腎嫌色細胞癌是一種低度惡性的腎細胞癌,確診有賴于病理診斷,治療以手術為主。腎嗜酸細胞瘤是一種良性腫瘤，生長緩慢，即便發(fā)生腎周脂肪的浸潤和血管浸潤，也不影響其預后。因此，有學者認為對于已經獲得病理確診的腎嗜酸細胞瘤患者可觀察等待[14]。但兩種疾病的癥狀體征及影像學等輔助檢查并不能對腫瘤性質進行判斷，臨床上手術切除方式往往并無差異。而這兩組腫瘤的病理形態(tài)學上的重疊，導致診斷及鑒別診斷的困難，不利于指導預后。

腎嫌色細胞癌的瘤組織呈纖維血管分隔的實性片狀排列，可分為經典型和嗜酸型[15]。經典型具有嗜酸性細胞質和中等大小核的大多邊形細胞。嗜酸型通常具有明顯的核周空暈[16,17]。腎嗜酸細胞瘤的瘤組織呈實性巢團狀、腺泡狀。瘤細胞形態(tài)一致，胞質嗜酸，核小圓形，核分裂象無或罕見[18]。免疫組織化學方面，腎嫌色細胞癌與嗜酸細胞瘤有很大的相似性[19]，CK7被認為是區(qū)分兩種腫瘤的有用標志物[20,21]。

在本研究當中，CK7在嫌色細胞癌和嗜酸細胞瘤兩者當中的陽性表達比例分別為67.86%(19/28)和0(0/16)，與文獻報道相符[22]。而兩種腫瘤均有四分之一的病例CK7表達陰性或僅有散在陽性，因此難以單獨應用該標記物區(qū)分兩種腫瘤。根據文獻報道，有研究者主張用一組包括amylase α1 A、Wnt-5a、FXYD2、ARPP、CD63、TGFβ1、CK7、S100A1、caveolin-1 以及claudin-7 等10 種標記物同時標記鑒別，但實際應用尚存在一定的困難[23]?，F有的免疫組織化學標記物對腎嫌色細胞癌與嗜酸細胞瘤的鑒別仍然存在缺陷，因此亟需找到一種特異強的新型標記物。

ELA是一種由32或21個氨基酸組成的成熟多肽類激素[24]。有研究顯示，在人多能胚胎干細胞當中，ELA作用于PI3K/AKT途徑，能夠通過促進細胞周期進展和有關蛋白質翻譯來增強生長，減少細胞凋亡[10]。PI3K/AKT在正常細胞和癌細胞中均具有抗凋亡特性[25]，在腫瘤生長和發(fā)育中具有重要作用[26]。推測ELA可能具有上述潛在生理功能。

在我們的研究中，作為腎臟惡性腫瘤之一的腎嫌色細胞癌中，ELA的表達顯著高于腎良性腫瘤嗜酸細胞瘤。ELA免疫反應性在腎嗜酸細胞瘤和腎嫌色細胞癌之間的明顯差異，對于兩者之間的鑒別診斷很有意義。因此，我們推測ELA是一種鑒別腎嫌色細胞細胞癌和嗜酸細胞瘤的免疫組化標記物，而ELA在腫瘤形成過程當中的分子機制還需要進一步的研究來探討。