包被共軛亞油酸對山羊瘤胃氫化、腸道及乳脂肪酸的影響

胡 波，魏佩玲，張蓉銀，高維明

（新疆畜牧科學(xué)院畜牧業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，新疆烏魯木齊 830026）

共軛亞油酸是一個通用術(shù)語，用于描述亞油酸瘤胃生物氫化過程中產(chǎn)生的亞油酸的位置異構(gòu)體和幾何異構(gòu)體（Lourenco等，2010）。日糧多不飽和脂肪酸廣泛存在于瘤胃，導(dǎo)致亞油酸和亞麻酸的平均損失率分別為86%和87%（Glasser等，2008）。因此，通過鈣鹽、甲醛處理、酰胺鍵或脂質(zhì)包被來保護日糧脂質(zhì)不被瘤胃生物氫化，防止瘤胃微生物功能的任何變化，增加多不飽和脂肪酸的十二指腸流量。如使用鈣鹽處理的C18：2 trans-10、cis-12的瘤胃生物氫化值估計為80%，而使用脂質(zhì)包被的瘤胃氫化值約為65%（Perfield等，2004）。 在 奶 牛 體 內(nèi)，C18：2 trans-10，cis-12經(jīng)靜脈注入十二指腸的轉(zhuǎn)化效率相對穩(wěn)定，平均為22%（Maxin等，2010）。在奶山羊中，十二指腸灌注后C18：2 trans-10，cis-12的乳轉(zhuǎn)化效率為18%，這可能受日糧添加脂質(zhì)類型和濃縮料比例的影響（Schmidely和 Andrade，2011）。因此，本研究旨在評價日糧添加包被共軛亞油酸對奶山羊十二指腸脂肪酸和營養(yǎng)物質(zhì)（干物質(zhì)、有機物、中性洗滌纖維和淀粉）在小腸流動的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與日糧 試驗選擇12只體重（61.9±8.57）kg處于泌乳期的多胎次薩能奶山羊，適應(yīng)期開始時山羊泌乳（65±3）d，平均產(chǎn)奶量為（3.91±0.48）kg/d，乳脂含量為（40.6±6.29）g/L，乳蛋白含量為（31.8±1.81）g/L，根據(jù)產(chǎn)奶量和產(chǎn)后30 d測得的乳脂含量，將同一品種的山羊分隨機分為2組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)1只羊。兩個試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中補充50 g棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸，分別用瘤胃插管和T型十二指腸插管進行6周試驗。將山羊置于代謝籠中，收集糞便和十二指腸樣本。第4～6周山羊自由采食35%青貯玉米、20%甜菜、15%大麥和30%濃縮料的全混合日糧?；A(chǔ)日糧中粗蛋白質(zhì)、有機物、中性洗滌纖維、淀粉含量分別為120、920、380和 175 g/kg，泌乳凈能為 1500 Kcal/kg，基礎(chǔ)日糧脂肪酸組成見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧脂肪酸組成

1.2 樣品收集 在整個試驗過程中，稱量提供給山羊的飼料和剩余飼料，記錄每天采食量。分別在第4和6周采集兩份飼料樣品，進行常規(guī)和脂肪酸分析。山羊每星期在中午稱重一次，試驗第6天分別抽取兩份30 mL的奶樣本，在4℃下保存，用于分析蛋白質(zhì)、脂肪和乳糖含量。直到牛奶成分分析（蛋白質(zhì)含量、脂肪含量和乳糖含量）。相同條件下，在不添加防腐劑的情況下收集另外兩份牛奶樣品，并將其保存在-18℃下，以供牛奶FA成分使用。采用指示劑三氧化鉻法作為標(biāo)記物，參考Brask等（2013）方法測定奶牛十二指腸的消化流量，在標(biāo)記物分布前于第5周取糞便和十二指腸內(nèi)容物作為標(biāo)準(zhǔn)樣本分析三氧化鉻含量，鉻的分析標(biāo)準(zhǔn)是在鉻分布前收集的十二指腸和糞便樣品中加入已知鉻。乳中脂肪酸含量的分析參考Ghazal等（2012）的研究方法。

將糞便排泄流量除以十二指腸鉻濃度計算十二指腸每日干物質(zhì)流量。通過將十二指腸干物質(zhì)流量乘以十二指腸樣品中有機物、中性洗滌纖維、淀粉、脂肪酸含量，計算十二指腸有機物、中性洗滌纖維、淀粉和脂肪酸流量。干物質(zhì)、有機物、中性洗滌纖維和淀粉瘤胃表觀消化率是從十二指腸流量中減去該成分的攝入量的百分比。

1.3 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SAS單因素方差分析，用SNK法進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)分攝入量 由表2可知，與棕櫚油酸鈣組相比，共軛亞油酸組對干物質(zhì)、有機物、淀粉和中性洗滌纖維攝入量無顯著影響（P＞0.05），同時兩組對干物質(zhì)、有機物、中性洗滌纖維和淀粉的十二指腸流量和瘤胃表觀消化率均無顯著影響（P＞0.05）。包被共軛亞油酸組較棕櫚油酸鈣組有降低干物質(zhì)和有機物消化率的趨勢（P=0.08）。

表2 棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸對山羊養(yǎng)分攝入量的影響

2.2 脂肪酸攝入量 由表3可知，包被共軛亞油酸較棕櫚酸鈣顯著降低了脂肪酸總量，C16：0、C18：1 cis -9、C18：2 cis-9，12攝 入 量（P＜0.05），提高了C18：0的攝入量（P＜0.05）。

表3 棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸對山羊脂肪酸攝入量的影響

2.3 十二指腸脂肪酸流量 由表4可知，包被共軛亞油酸和棕櫚油酸鈣對十二指腸脂肪酸流量無顯著影響（P＞0.05），但降低了C16：0和C18：1 cis-9的流量（P＜0.05）。包被共軛亞油酸顯著提高了 C18：2 trans-10，cis12、C18：2 cis-9，trans-11和 C18：2 trans-9，11在十二指腸的流量（P ＜ 0.05），降低了 C18：1 trans-4，5流量（P＜ 0.05），有降低 C18：2 cis-9，trans-12和C18：2 trans-9，cis-12在十二指腸流量的趨勢（P=0.06）

2.4 多不飽和脂肪酸攝入量 由表5可知，日糧添加包被共軛亞油酸對C18：1 cis-9，C18：2 cis-9，12和 C18：3 cis 9，12，15在 瘤 胃 氫 化作用無顯著影響（P＞0.05）。棕櫚油酸鈣組山羊十二指腸幾乎檢測不到C18：2 trans-10，cis-12，而包被共軛亞油酸組山羊十二指腸C18：2 trans-10，cis-12血流為0.75 g/d，占到分布的16%。同樣，棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸山羊C18：2 cis-9，trans-11十二指腸血流分別為0.22和 0.90，平均占 C18：2 cis-9，trans-11分布的15%。

3 討論

本研究中，與棕櫚油酸鈣組相比，包被共軛亞油酸組山羊脂肪酸總攝入量較低，這是因為兩組日糧添加的脂肪含量不同。但兩種處理的十二指腸脂肪酸攝入量均為正，棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸組山羊十二指腸流量分別占脂肪酸總攝入量的126%和132%。Serment（2012）以三氧化鉻為標(biāo)記物，也報道了十二指腸流量分別占脂肪酸攝入量120%～170%。三氧化鉻是一種很方便的標(biāo)記物，但其會高估營養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)的流量。然而，棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸組山羊?qū)κ改c脂肪酸攝入量無顯著影響，說明日糧添加包被共軛亞油酸不影響瘤胃微生物種群或細菌脂質(zhì)合成（Jenkins等，2007）。

表4 棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸對山羊十二指腸脂肪酸流量的影響

表5 棕櫚油酸鈣和包被共軛亞油酸對山羊多不飽和脂肪酸攝入量的影響

在棕櫚油酸鈣組山羊中，C18：2 trans-10，cis-12的十二指腸流量非常低，C18：2 cis-9，trans-11的十二指腸流量為0.22 g/d，與低水平粗飼糧（35%）和高水平精料（70%）的十二指腸流量較低相似（Serment，2012）。相反，影響共軛亞油酸異構(gòu)體十二指腸流動最重要的因素是日糧中脂質(zhì)含量和多不飽和脂肪酸分布、精料比例以及這兩個因素之間的相互作用。事實上，C18：2 cis-9，tans-11和 C18：2 trans-10，cis-12的十二指腸流量在添加60%濃縮料或玉米油、大豆油時均有增加（Duckett等，2002）。本研究中，棕櫚油酸鈣組日糧淀粉含量低于180 g/kg，脂肪酸含量約為3.5%，說明棕櫚油酸鈣組山羊C18：2 trans-10，cis-12產(chǎn)量較低。

本研究中，棕櫚油酸鈣組C18：1cis-9，C18：2 cis-9，12和 C18：3 cis-9，12，15在 瘤胃內(nèi)的生物氫化反應(yīng)分別為61.2%、66.7%和53.1%，但上述脂肪酸不受包被共軛亞油酸的影響，這與Serment（2012）的研究結(jié)果相一致。Glasser等（2008）報道 C18：2 cis-9，12和C18：3 cis-9，12，15的瘤胃生物加氫率分別為86%和87%，本試驗結(jié)果較其低，這可能與上述對這些脂肪酸十二指腸流量高估有關(guān)，但也可能與攝入水平有關(guān)，攝入水平可通過瘤胃流出量的改變而改變生物氫化率Glasser等（2008）。包被共軛亞油酸組山羊C18：2 cis-9，trans-11和C18：2 trans-10，cis-12在十二指腸的利用大概為0.9和0.75 g/d，其代表了瘤胃15%～16%保護率。但使用植物源飽和脂肪基質(zhì)保護的共軛亞油酸約65%能到達綿羊十二指腸（Wynn等，2006），這些結(jié)果的差異可能與動物品種、生理階段（泌乳與生長）、采食量、瘤胃發(fā)酵理化參數(shù)和生物氫化途徑以及這些異構(gòu)體的保護方式有關(guān)。

4 結(jié)論

與添加棕櫚油鈣相比，在奶山羊中飼喂不受瘤胃生物氫化包被共軛亞油酸對干物質(zhì)、有機物、中性洗滌纖維和淀粉攝入量、十二指腸流量及瘤胃表觀消化率無顯著影響。包被共軛亞油酸增加了十二指腸的流量和C18：2 trans-10，cis-12和C18：2 cis-9，trans-11的比例，使瘤胃生物氫化保護率達到15%～16%。