兒科臨床抗菌藥物耐藥性研究

陳曉艷

【摘要】目的：了解某第一醫(yī)院2009年至2018年兒科住院患者臨床分離細(xì)菌的分布及抗菌藥物耐藥情況。方法：收集2009年1月至2018年12月兒科病房臨床分離的非重復(fù)細(xì)菌，用紙片擴(kuò)散法或自動化儀器法進(jìn)行抗菌藥物敏感性試驗，按照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）2015標(biāo)準(zhǔn)判定藥物敏感結(jié)果，用WHONET5 6軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果：10年期間共分離2593株非重復(fù)細(xì)菌，其中革蘭陽性菌占54.5%，革蘭陰性菌占45.5%。分離最多的細(xì)菌前五位分別為：大腸埃希菌（16.0%）、表皮葡萄球菌（14.1%）、屎腸球菌（10.8%）、肺炎克雷伯茵（10.6%）、金黃色葡萄球菌（8.4%）。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的檢出率分別為24.1%和72.3%，葡萄球菌中未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的菌株。屎腸球菌對萬古霉素總耐藥率為1.1%，對利奈唑胺總耐藥率為0.4%，糞腸球菌未檢出對萬古霉素和利奈唑胺耐藥菌株。大腸埃希菌對亞胺培南總耐藥率為1.5%，對美羅培南總耐藥率為1.9%。肺炎克雷伯菌對亞胺培南總耐藥率為8.9%，對美羅培南總耐藥率為9.2%。非發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌中，鮑曼不動桿菌對亞胺培南和美羅培南的總耐藥率分別為39.5%和40.3%，銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的總耐藥率分別為11.1%和7.2%。結(jié)論：兒科病房臨床標(biāo)本中分離的MRSA、耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌（CRE）和耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌（CRAB）檢出率不斷增加，應(yīng)采取行之有效的感染控制措施

【關(guān)鍵詞】細(xì)菌耐藥性;藥敏方法;藥敏儀器

【中圖分類號】R969.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1004-597X（2019）17-0039-02

引言

隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌耐藥問題隨之而來，給臨床抗感染治療帶來嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，這使得監(jiān)測臨床分離菌株的分布及耐藥性變遷變得尤為重要。近年來，細(xì)菌耐藥率隨抗菌藥物的廣泛使用逐漸升高，甚至出現(xiàn)多重耐藥菌、超級細(xì)菌、泛耐藥菌等，細(xì)菌耐藥的問題已成為全球性的公共醫(yī)療問題。

1材料

菌株來源收集2009年1月至2018年12月某第一醫(yī)院兒科病房患者臨床送檢標(biāo)本所分離細(xì)菌，對同一患者分離的重復(fù)菌株只用首次分離菌。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、糞腸球菌ATCC29212、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、肺炎鏈球菌ATCC49619和流感嗜血桿菌ATCC49247。抗菌藥物氨芐西林、哌拉西林、阿莫西林/克拉維酸、頭孢哌酮/舒巴坦、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢西丁、氨曲南、亞胺培南、美羅培南、阿米卡星、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、甲氧芐氨嘧啶一磺胺甲噁唑、多黏菌素、米諾環(huán)素、四環(huán)素、紅霉素、利福平、萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺。藥敏實驗用MH瓊脂培養(yǎng)基。

2實驗方法

菌種鑒定和藥敏試驗按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》的常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、分離與鑒定，用法國生物梅里埃的產(chǎn)品VITEK2—compact全自動細(xì)菌檢測系統(tǒng)以及美國BD—Phoenix100全自動細(xì)菌檢測系統(tǒng)及試劑進(jìn)行藥敏試驗，按照美國實驗室標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)測所（CLSI）2015版標(biāo)準(zhǔn)，對藥物敏感結(jié)果進(jìn)行分析。其中頭孢哌酮/舒巴坦及米諾環(huán)素用Kirby—Bauer法測量抑菌環(huán)直徑，頭孢哌酮/舒巴坦參考頭孢哌酮折點標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析。質(zhì)控菌株為金葡菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853。β內(nèi)酰胺酶檢測用頭孢硝噻吩試驗定性檢測β內(nèi)酰胺酶，按CLSI推薦的紙片法篩選和酶抑制劑增強(qiáng)確認(rèn)試驗檢測大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌和奇異變形菌中產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶（ES-BLs）菌株。耐萬古霉素腸球菌（VRE）檢測經(jīng)儀器法藥敏試驗測定結(jié)果為非敏感株者，用萬古霉素E—test條測定最低抑菌濃度（MIC）值。耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌（CRE）對亞胺培南、美羅培南耐藥檢測用紙片擴(kuò)散法或儀器法檢測，腸桿菌科細(xì)菌如果出現(xiàn)亞胺培南和（或）美羅培南不敏感菌株，需要用E—test條檢測其MIC值。泛耐藥株（XDR）：指僅對1～2種潛在有抗菌活性的藥物（主要指替加環(huán)素和/或多黏菌素）敏感，對其余抗生素不敏感：多重耐藥株（MDR）：指對通常敏感的3類或3類以上抗菌藥物同時呈現(xiàn)耐藥的細(xì)菌。

3統(tǒng)計學(xué)處理

采用WHONE T5.6統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計數(shù)資料用百分率表示。

4結(jié)果

4.1腸球菌屬

腸球菌屬對常用抗菌藥均有較高的耐藥率。屎腸球菌對大部分抗菌藥的耐藥性強(qiáng)于糞腸球菌，其中對氨芐西林的耐藥率為80.5%，遠(yuǎn)高于糞腸球菌（2.8%）。尚未發(fā)現(xiàn)對替考拉寧、替加環(huán)素、萬古霉素和利奈唑胺耐藥的腸球菌。

4.2葡萄球菌屬細(xì)菌對常用抗菌藥物的耐藥率

10年間金黃色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的平均檢出率為24.1%（52例/216例），MRSA主要分離自痰標(biāo)本（25.0%）、血標(biāo)本（13.5%）;MRCNS（甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌）的平均檢出率為72.3%（434例/600例），主要分離自血標(biāo)本（24.2%）、腦脊液標(biāo)本（11.8%）。MRSA和MRCNS對大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類藥物的耐藥率均顯著高于MSSA（甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌）和MSCNS（甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），MRSA中有73.1%菌株對甲氧芐啶一磺胺甲噁唑敏感，未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素和利奈唑胺耐藥的葡萄球菌。金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌對臨床常用抗菌藥物耐藥率。

4.3非發(fā)酵糖革蘭陰性菌

不動桿菌屬中97.9%（508/519）為鮑曼不動桿菌，該菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為80.3%和79.1%，除對替加環(huán)素全部敏感以外，對米諾環(huán)素的敏感率也很高（97.6%），但對大多數(shù)監(jiān)測抗菌藥物的耐藥率均>70%;銅綠假單胞菌對亞胺培南和美羅培南的耐藥率分別為29.7%和28.4%，對阿米卡星的敏感率最高，為91.0%。嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌對米諾環(huán)素和左氧氟沙星的敏感率均>80%。

5討論

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，臨床細(xì)菌藥敏試驗方法和檢測儀器更加豐富。隨著廣譜抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌耐藥問題隨之而來，給臨床抗感染治療帶來嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，這使得監(jiān)測臨床分離菌株的分布及耐藥性變遷變得尤為重要。

綜上所述，兒科病房臨床標(biāo)本中分離的MRSA、耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌（CRE）和耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌（CRAB）檢出率不斷增加，應(yīng)采取行之有效的感染控制措施。