戚小燕,張德勇*,嚴(yán)小平,郭淑紅
(浙江樹(shù)人大學(xué)生物與環(huán)境工程學(xué)院, 浙江 杭州310015)
我國(guó)黃酒為世界三大釀造酒之一,它選用大米、粟、黍米作為原材料,屬于低酒精度釀造酒。黃酒糟為釀造過(guò)程中的主要副產(chǎn)物,出糟率一般在20%~30%。以喂飯法生產(chǎn)干型黃酒為例,一家年產(chǎn)萬(wàn)噸黃酒的企業(yè)年產(chǎn)酒糟約727 噸,其他類(lèi)型黃酒出糟率更高。我國(guó)黃酒廠家已過(guò)萬(wàn),酒糟產(chǎn)出量十分龐大,其潛在價(jià)值亟待挖掘。黃酒糟中富含淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪和纖維素等,極具資源價(jià)值[1-3]。當(dāng)前黃酒糟主要用作動(dòng)物飼料或食用菌培養(yǎng)基,形式較為單一粗放,其中豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)未得到高值化利用,造成很大浪費(fèi)。盡管在糟燒酒、調(diào)味品等領(lǐng)域的應(yīng)用也有一些探索,但尚未形成規(guī)模[4-6]。由于不同地區(qū)、不同廠家的黃酒風(fēng)味千差萬(wàn)別,黃酒糟中殘留的物質(zhì)也不盡相同。因此對(duì)特定來(lái)源的黃酒糟進(jìn)行成分分析,對(duì)于后續(xù)開(kāi)發(fā)應(yīng)用具重要意義。
按照國(guó)標(biāo)GB 5009.3-2016,用4 只稱(chēng)量瓶分別放黃酒糟約4g,105℃5h 后再40℃30min、105℃1h 反復(fù)干燥至稱(chēng)量物恒重。水分=[(M1-M2-m)/(M1-m)]×100%。(m 稱(chēng)量瓶質(zhì)量;M1稱(chēng)量瓶及樣品總質(zhì)量;M2干燥恒重后稱(chēng)量瓶及樣品總質(zhì)量)。
參照國(guó)標(biāo)GB 5009.4-2016,取4 只坩堝加適量酒糟于150℃、300℃炭化至無(wú)煙。于馬弗爐中500℃灼燒5h,冷卻后室溫放5min 再干燥30min,重復(fù)上述灼燒至恒重?;曳?(M2-M1)/(m-M1)×100%。(m 總質(zhì)量;M1坩堝質(zhì)量;M2 恒重后總質(zhì)量)。
按照國(guó)標(biāo)GB 5009.5-2016,稱(chēng)取約3g 酒糟于100mL 定氮瓶中,加入30mL 消化液消化,轉(zhuǎn)移并定容至100mL。取10mL 消化液于凱氏定氮儀上蒸餾,結(jié)束后滴定回流液,即滴加0.05mol/L標(biāo)準(zhǔn)鹽酸至溶液變灰。蛋白質(zhì)=[(V1-V0)×0.05×0.014*5.83×100]/[m×10/100]。(V1、V0為樣液和空白對(duì)照耗鹽酸量;m 樣品質(zhì)量)。
按照國(guó)標(biāo)GB 5009.9-2016,取4g 酒糟用乙醚去脂肪、乙醇去可溶性糖,用蒸餾水轉(zhuǎn)移到錐形瓶并加30mL 鹽酸,100℃水浴冷凝回流2h。調(diào)pH7.0,加20mL 乙酸鉛,定容500mL 并過(guò)濾。取50mL 至燒杯測(cè)還原糖,G=m1/[50/250×V1/100]。淀粉=[(G1-G0)×0.9×100]/[m×1000]。(G1、G0分別為試樣水解液和空白對(duì)照中還原糖含量;m 試樣質(zhì)量)。
按照國(guó)標(biāo)GB 5009.6-2016,取5g 酒糟加30mL 酶液于60℃酶解1h,再加甲醇氯仿提取30min。過(guò)濾后濾液65℃水浴至濃稠。加乙醚、硫酸銅并振蕩10min,取醚層3000r/min 離心5min。取10mL 上清蒸干后稱(chēng)重。脂肪=[(M1-M2)×4×100%]/m。(m 樣品質(zhì)量;M1蒸干后總質(zhì)量;M2稱(chēng)量瓶質(zhì)量)。
參照文獻(xiàn)[7],無(wú)菌稱(chēng)取25g 黃酒糟溶于250mL蒸餾水作為10 倍稀釋液,再逐級(jí)稀釋2 次得103倍稀釋液。分別接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂、孟加拉紅、高鹽察氏固體培養(yǎng)基并培養(yǎng)。細(xì)菌為37℃、2 天,霉菌和酵母菌為28℃、1 周。最后計(jì)算每克樣品中菌落數(shù)。
如表1 所示,水分四次測(cè)定結(jié)果分別為46.92%、49.97%、46.93%、50.36%,均值為48.44%。
表1 黃酒糟中水分含量
如表2 所示,灰分四次測(cè)定結(jié)果分別為0.697%、0.773%、0.710%、0.753%,均值為0.733%。
表2 黃酒糟中灰分含量
如表3 所示,蛋白三次測(cè)定結(jié)果分別為14.51%、14.12%,14.28%,均值為14.30%。
表3 黃酒糟中蛋白質(zhì)含量
如表4 所示,淀粉三次測(cè)定結(jié)果分別為33.48%、32.51%、33.09%,平均值為33.03%。
如表5 所示,脂肪三次測(cè)定結(jié)果分別為1.62%、1.38%、1.52%,平均值為1.51%。
表4 黃酒糟中淀粉含量
表5 黃酒糟中脂肪含量
如表6 所示細(xì)菌、霉菌、酵母分別為1.5*104-1.0*105、7.2*104-3.1*105、0.7*103-1.1*103 CFU/g。
表6 黃酒糟中的微生物
本研究顯示紹興黃酒糟除水分48.44%以外,占比最高的為淀粉33.03%和蛋白質(zhì)14.30%,其他如脂肪、灰分等則占比甚低。其中淀粉含量與其他地區(qū)的黃酒糟(約15%)相比也偏高,推測(cè)是因?yàn)榻B興黃酒釀造中使用了較多的生麥曲作糖化劑,而生淀粉糖化時(shí)難以被充分利用導(dǎo)致殘留淀粉較多。另外,紹興黃酒糟中微生物也很多,其一般為釀酒過(guò)程中留存下來(lái)的無(wú)害的細(xì)菌、霉菌及酵母。發(fā)酵結(jié)束后酵母大量沉淀,經(jīng)壓榨絕大多數(shù)殘留在酒糟中,是微生物的重要組成。釀酒過(guò)程中這些微生物能通過(guò)復(fù)雜代謝使黃酒呈現(xiàn)獨(dú)特風(fēng)味,其風(fēng)味物質(zhì)部分也會(huì)殘留在酒糟中,有資源價(jià)值。