香菇慶科212三級(jí)菌種培養(yǎng)基配方篩選

(1.貴州大學(xué)， 貴陽(yáng) 550025； 2.貴州省印江縣食用菌產(chǎn)業(yè)辦， 貴州 印江 555200；3.貴州水西謠食用菌種植專業(yè)合作社， 貴州 黔西 551500；4.貴州永興農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司， 貴州 三都 558109)

香菇屬中低溫型變溫結(jié)實(shí)性菇類，高溫出菇的香菇品種少，導(dǎo)致夏季鮮香菇供應(yīng)不足[1]。貴州香菇生產(chǎn)技術(shù)相對(duì)落后，存在夏菇生產(chǎn)菌種混亂、栽培技術(shù)不配套，效益低等現(xiàn)象。隨著香菇產(chǎn)業(yè)化發(fā)展，對(duì)生產(chǎn)工藝、產(chǎn)量及品質(zhì)提出了更高的要求[2]，其產(chǎn)量、質(zhì)量及生產(chǎn)效益都與菌種質(zhì)量?jī)?yōu)劣有關(guān)。本課題組以前期篩選出的適宜貴州栽培的高溫香菇品種慶科212[3]為材料，研究不同配方培養(yǎng)基對(duì)其三級(jí)菌種生長(zhǎng)情況的影響，以期為良種制定配套夏菇菌種制作良法，實(shí)現(xiàn)香菇錯(cuò)季栽培提供參考。

1 材料與方法

1.1供試菌種及地點(diǎn)

慶科212由貴州永興農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限公司引進(jìn)并提供；試驗(yàn)在貴州大學(xué)、印江縣、黔西縣和三都縣農(nóng)業(yè)園區(qū)進(jìn)行。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1母種培養(yǎng)基

1) 配方。

配方1：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨3 g，瓊脂20 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂1 g，維生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方2：馬鈴薯150 g，麥粒100 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀0.5 g，硫酸鎂0.5 g，蛋白胨2 g，瓊脂20 g，維生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方3：棉籽殼30 g，麥麩50 g，葡萄糖25 g，蛋白胨5 g，瓊脂0.5 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，維生素B 110 mg，水1 000 mL。

配方4：木屑14 g，麥麩6 g，胡蘿卜200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蛋白胨5 g，磷酸二氫鉀3 g，硫酸鎂1.5 g，水1 000 mL。

2) 母種培養(yǎng)基制作。

用18 mm×18 mm的試管分裝制作好的培養(yǎng)基，每個(gè)配方設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)各分裝5支試管，滅菌擺斜面，接入慶科212菌種，于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)暗光培養(yǎng)。

1.2.2原種培養(yǎng)基

配方1：竹柳木屑45%、麥粒33%、棉籽殼15%、麥麩5%、石膏1%、硫酸鎂0.1%、過磷酸鈣0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方2：梨枝屑45%、麥粒33%、棉籽殼15%、麥麩5%、石膏1%、硫酸鎂0.1%、過磷酸鈣0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方3：茶枝屑45%、麥粒33%、棉籽殼15%、麥麩5%、石膏1%、硫酸鎂0.1%、過磷酸鈣0.5%、糖0.5%、尿素0.5%。

配方4：樺槁木屑45%、麥粒33%、棉籽殼15%、麥麩5%、石膏1%、硫酸鎂0.1%、過磷酸鈣0.5%、糖0.5%，尿素0.5%。

1.2.3栽培種培養(yǎng)基

配方1：棉籽殼30%、竹柳木屑50%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%。

配方2：棉籽殼30%、樺槁木屑50%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%。

配方3：棉籽殼30%、梨枝屑50%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%。

配方4：棉籽殼30%、茶枝屑50%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%。

1.2.4原種、栽培種培養(yǎng)基制作

按照各配方比例，準(zhǔn)確稱量主(輔)料，攪拌混勻使培養(yǎng)料含水量達(dá)55%～60%，裝袋(聚丙烯塑料袋，規(guī)格15 cm×55 cm×0.004 cm，投干料為1.5 kg/袋)，每配方設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)為20袋，共240袋。裝袋好后放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌2 h，冷卻接種，避光培養(yǎng)。

1.3觀察記載項(xiàng)目

1) 各配方母種試管培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)情況(菌絲長(zhǎng)勢(shì)、顏色、密度、菌落邊緣整齊度、生長(zhǎng)勢(shì)、氣生菌絲量、滿管天數(shù)和生長(zhǎng)速度)。用劃線法觀察記錄菌絲生長(zhǎng)速度和滿管天數(shù)。

2) 各配方原種、栽培種培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)情況(菌絲長(zhǎng)勢(shì)、顏色、滿袋天數(shù)和生長(zhǎng)速度)。用劃線法觀察記錄菌絲生長(zhǎng)速度和記錄滿袋天數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1不同配方試管培養(yǎng)基母種菌絲生長(zhǎng)情況分析

表1可見，慶科212在配方2和配方4母種培養(yǎng)基上菌絲長(zhǎng)勢(shì)表現(xiàn)好，均為：菌絲潔白，濃密，整齊，粗壯，氣生菌絲量多；配方3菌絲稀疏，氣生菌絲量少，表現(xiàn)最差。

表1 各母種培養(yǎng)基配方中慶科212菌絲生長(zhǎng)情況

配方菌絲長(zhǎng)勢(shì)滿管時(shí)間/d生長(zhǎng)速度/(mm·d-1)2菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯,氣生菌絲量多194.26±0.083a A4菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯,氣生菌絲量多213.62±0.101b B1菌絲潔白,較密,整齊,較粗壯,氣生菌絲量多223.51±0.085b B3菌絲白,稀疏,較亂,較粗壯,氣生菌絲量少233.48±0.040b B

菌絲滿管時(shí)間，配方3(23 d)>配方1(22 d)>配方4(21 d)>配方2(19 d)，配方2菌絲滿管時(shí)間最少。

菌絲生長(zhǎng)速度由快到慢的順序?yàn)椋号浞?(4.26 mm·d-1)>配方4(3.62 mm·d-1)>配方1(3.51 mm·d-1)>配方3(3.48 mm·d-1)；經(jīng)多重比較，配方2菌絲生長(zhǎng)速度極顯著快于其它3個(gè)配方，配方1、配方4、配方3之間菌絲生長(zhǎng)速度無(wú)顯著差異。

慶科212母種培養(yǎng)基以配方2(馬鈴薯150 g，麥粒100 g，葡萄糖20 g，磷酸二氫鉀0.5 g，硫酸鎂0.5 g，蛋白胨2 g，瓊脂20 g，維生素B 110 mg，水1 000 mL)為好。

2.2不同配方原種培養(yǎng)料菌絲生長(zhǎng)情況分析

表2可見，慶科212菌絲長(zhǎng)勢(shì)在配方1和配方4上表現(xiàn)好，菌絲潔白，濃密，粗壯；配方2次之，配方3上表現(xiàn)稍差。

表2 各原種培養(yǎng)基配方中慶科212菌絲生長(zhǎng)情況

配方菌絲長(zhǎng)勢(shì)滿袋時(shí)間/d生長(zhǎng)速度/(mm·d-1)4菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯821.56±0.017a A1菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯831.50±0.007b A2菌絲潔白,較濃密,整齊,較粗壯831.48±0.012b A3菌絲潔白,較濃密,較亂,較粗壯851.27±0.022c B

菌絲生長(zhǎng)速度由快到慢的順序?yàn)椋号浞?(1.56 mm·d-1)>配方1(1.50 mm·d-1)>配方2(1.48 mm·d-1)>配方3(1.27 mm·d-1)。經(jīng)F測(cè)驗(yàn)和多重比較，配方4菌絲生長(zhǎng)速度最快，與配方3達(dá)極顯著差異，與配方1、配方2達(dá)顯著差異；配方1、配方2顯著快于配方3，配方1與配方2無(wú)顯著差異。菌絲滿袋時(shí)間以配方4最短，配方3最長(zhǎng)。各處理菌絲滿袋所需時(shí)間：配方3(85 d)>配方2(83 d)=配方1>配方4(82 d)。

慶科212原種培養(yǎng)料適宜配方以配方4(樺槁木屑15%、麥粒63%、棉籽殼15%、麥麩5%、石膏1%、硫酸鎂0.1%、過磷酸鈣0.5%、糖0.5%，尿素0.5%)為好。

2.3不同配方栽培種培養(yǎng)料菌絲生長(zhǎng)情況分析

表3可見，慶科212菌絲長(zhǎng)勢(shì)在配方2和配方3上表現(xiàn)好，菌絲潔白，濃密，粗壯；配方1、配方4表現(xiàn)較差。從菌絲生長(zhǎng)速度來看，由快到慢的順序?yàn)椋号浞?(1.63 mm·d-1)>配方3(1.59 mm·d-1)>配方1(1.23 mm·d-1)>配方4(1.18 mm·d-1)。配方2和配方3差異不顯著，二者與配方1、配方4達(dá)極顯著差異；配方1和配方4差異不顯著。

表3 各配方栽培種培養(yǎng)料慶科212菌絲生長(zhǎng)情況

配方菌絲長(zhǎng)勢(shì)滿袋時(shí)間/d生長(zhǎng)速度/(mm·d-1)2菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯891.63±0.013a A3菌絲潔白,濃密,整齊,粗壯901.59±0.023a A1菌絲潔白,較濃密,較粗壯931.23±0.002b B4菌絲潔白,較濃密,較粗壯941.18±0.018b B

慶科212栽培種培養(yǎng)料適宜配方以配方2(闊葉雜木屑20%、樺槁木屑60%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%)和配方3(闊葉雜木屑20%、果樹枝屑60%、麥麩18%、石膏1%、糖1%、過磷酸鈣0.5%、尿素0.3%、50%的多菌靈0.1%，含水量為55%～60%)為好。

3 討論與結(jié)論

3.1慶科212是適宜貴州夏季栽培的優(yōu)良香菇高溫菌株，具有產(chǎn)量高、抗性較強(qiáng)、商品性好，菌齡短等優(yōu)點(diǎn)[4]。

3.2本試驗(yàn)中原種配方3、栽培種配方4培養(yǎng)基中茶枝屑含量都超過45%，其中菌絲生長(zhǎng)勢(shì)和生長(zhǎng)速度都不理想，可能與茶枝屑混雜茶葉中茶多酚、醛類等抑菌物質(zhì)增多，影響香菇菌絲的生長(zhǎng)有關(guān)。為減少木材的消耗和生產(chǎn)成本，利用廢棄茶枝條做香菇菌棒培養(yǎng)料，可增加生產(chǎn)效益，但茶枝屑含量的添加量不宜過多。

3.3本試驗(yàn)中原種配方4和栽培種配方2培養(yǎng)基主料為樺槁木屑，其中菌絲生長(zhǎng)勢(shì)和生長(zhǎng)速度好，貴州省樺槁木材多，生長(zhǎng)速度適中，可以作為慶科212原種和栽培種主料進(jìn)行生產(chǎn)和推廣應(yīng)用。