楊瑞昆 鄔思芳 閆 君 舒積成 張 銳 張升林 曹天佑 劉建群
中圖分類號 R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408(2019)05-0638-04
DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.05.12
摘 要 目的:分離并鑒定雷公藤乙酸乙酯部位和水部位化學(xué)成分,為其后續(xù)藥理研究提供基礎(chǔ)。方法:采用MCI GEL-CHP 20P柱層析、C18反相硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、高效液相色譜等方法對雷公藤乙酸乙酯部位和水部位提取物進(jìn)行分離、純化,通過核磁共振氫譜、核磁共振碳譜及理化性質(zhì)對分離的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果:從雷公藤乙酸乙酯部位中分離得到2個化合物,分別鑒定為直楔草酸(化合物1)、鄰苯二甲酸二丁酯(化合物2);從雷公藤水部位中分離得到8個糖苷類化合物,分別鑒定為2,6-二甲氧基-4-羥甲基-苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物3)、2,6-二甲氧基-4-羥基苯酚-1-O-葡萄糖苷(化合物4)、4-羥基-1-(2-羥乙基)-苯基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(化合物5)、3,4-二甲氧基-苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (化合物6)、β-腺苷(化合物7)、丁香苷(化合物8)、表兒茶素-8-C-β-D-半乳糖苷(化合物9)、2-羥基柚皮素-7-O-β-葡萄糖苷(化合物10)。結(jié)論:本研究分離并鑒定了雷公藤乙酸乙酯部位和水部位化學(xué)成分。
關(guān)鍵詞 雷公藤;分離;鑒定;高效液相色譜法;糖苷類化合物
Separation and Identification of Chemical Components in Ethyl Acetate Fraction and Water Fraction from Tripterygium wilfordii
YANG Ruikun1,WU Sifang2,YAN Jun1,SHU Jicheng1,ZHANG Rui1,ZHANG Shenglin1,CAO Tianyou1,LIU Jianqun1(1.Key Lab of Modern Chinese Medicine Preparation Minisery of Education, Jiangxi University of TCM, Nanchang 330004, China;2.East Street Community Health Service Center, Pingxiang Municipal Second People’s Hospital, Jiangxi Pingxiang 337000, China)
ABSTRACT OBJECTIVE: To separate and identify chemical components in ethyl acetate fraction and water fraction from Tripterygium wilfordii, and to provider basis for further pharmacological study. METHODS: The ethyl acetate fraction and water fraction from T. wilfordii were separated and purified by MCI GEL-CHP 20P column chromatography, C18 RP silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 gel column chromatography and HPLC. The structures of compounds were analyzed and identified by 1H-NMR, 13C-NMR and physicochemical properties. RESULTS: Two compounds were isolated from ethyl acetate fraction of T. wilfordii, namely orthosphenic acid (compound 1), dibutylphthalate (compound 2). Eight glucosides were isolated from water extract of T. wilfordii, namely 2,6-dimethoxy-4-hydroxymethyl-phenyl-1-O-beta-D-glucopyranoside (compound 3), 2,6-dimethoxy-4-hydroxyphenol-1-O-β-D-glucoside(compound 4), 4-hydroxy-1-(2-hydroxyethyl)-phenyl-3-O-β-D-glucopyranoside (compound 5), 3,4-dimethoxy-phenyl-1-O-β-D-glucopyranoside (compound 6),β-adenosine (compound 7), ligustrin (compound 8), epicatechin-8-C-β-D-galactoside (compound 9) and 2-hydroxynaringenin-7-O-β-glucoside (compound 10). CONCLUSIONS: Chemical components of ethyl acetate fraction and water fraction are separated and identified from T. wilfordii.
KEYWORDS Tripterygium wilfordii; Separation; Identification; HPLC; Glucosides compound
類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎屬于嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病之一,被喻為“不死的癌癥”[1]。雷公藤(Tripterygium Wilfordii Hook)為衛(wèi)矛科雷公藤屬植物,相關(guān)研究[2]發(fā)現(xiàn),雷公藤對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫功能亢進(jìn)性疾病具有很好的療效。雷公藤的主要有效成分有二萜、三萜和生物堿三大類成分,但這些主要有效成分多數(shù)也具有一定毒性,如雷公藤甲素和雷公藤紅素具有心、肝、腎、生殖系統(tǒng)和消化系統(tǒng)等毒性[3-5]。目前,雷公藤活性成分的研究主要集中在中小極性部位[6-7],極性大的水部位未見相關(guān)報道,因此可對其進(jìn)行深入研究,以豐富雷公藤化學(xué)成分。筆者在此基礎(chǔ)上,采用MCI GEL-CHP 20P柱層析、C18反相硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析、高效液相色譜(HPLC)等方法對雷公藤乙酸乙酯部位和水部位提取物進(jìn)行分離純化,通過核磁共振氫譜(1H-NMR)、核磁共振碳譜(13C-NMR)及理化性質(zhì)對分離的化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,為進(jìn)一步研究雷公藤的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其后續(xù)藥理研究提供參考。
1 材料
1.1 儀器
AVANCE核磁共振波譜儀(瑞士布魯克公司);高分辨率電噴霧質(zhì)譜(HRESI-MS)儀器(美國AB Sciex公司);1260 HPLC儀(美國安捷倫公司);ODS-A C18色譜柱(日本YMC公司)。
1.2 藥品與試劑
雷公藤藥材于2014年10月采自江西省萍鄉(xiāng)市,經(jīng)江西中醫(yī)藥大學(xué)劉建群教授鑒定為衛(wèi)矛科雷公藤屬植物雷公藤的干燥根;中性氧化鋁(上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號:20161006);硅膠(青島海洋化工廠分廠,批號:17021030169 );薄層色譜(TLC)硅膠板(青島康鼎硅膠有限公司,批號:20161013);Sephadex LH-20凝膠樹脂、MCI GEL-CHP 20P樹脂均購自日本三菱株式會社;甲醇為色譜純,水為雙蒸水,其余試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 提取與分離
取雷公藤干燥根119 kg,切片后用95%乙醇400 L,于70 ℃加熱回流提取3次,每次回流1.5 h。合并3次提取液,減壓濃縮后得浸膏12 kg;然后將浸膏用乙酸乙酯溶解,靜置,分離沉淀和上清液,再減壓濃縮后得乙酸乙酯部位浸膏1.87 kg,乙酸乙酯不溶部位浸膏7.5 kg;將乙酸乙酯不溶部位浸膏置于2% H2SO4 15 L中充分?jǐn)嚢枞芙?,過濾后,向續(xù)濾液中加入25%氨水至pH為10,再用等體積的乙酸乙酯萃取3次,減壓濃縮后得到水部位浸膏1.15 kg。
2.1.1 乙酸乙酯部位提取與分離 取“2.1”項下乙酸乙酯部位浸膏1.87 kg,經(jīng)中性氧化鋁柱色譜層析(200~300目),石油醚-乙酸乙酯(1 ∶ 0、4 ∶ 1、3 ∶ 2、2 ∶ 3,V/V)及乙酸乙酯-甲醇(1 ∶ 0、3 ∶ 1、1 ∶ 1、0 ∶ 1,V/V)梯度洗脫后,收集流分,每個流分共收集50 L,根據(jù)TLC檢測結(jié)果,合并極性相近流分,得到8個流分(Fr.1~Fr.8)。將Fr.7(其余未分離到化合物,故未寫出,下同)流分經(jīng)MCI GEL-CHP 20P柱分離,甲醇-水(0 ∶ 1、1 ∶ 9、1 ∶ 1、3 ∶ 1、1 ∶ 0,V/V)梯度洗脫后,TLC檢測后合并極性相近流分,得到6個流分(Fr.7.1~Fr.7.6)。Fr7.5流分經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離,甲醇洗脫,TLC檢測后合并流分,得到4個流分(Fr7.5.1~Fr7.5.4);Fr7.5.3流分經(jīng)甲醇重結(jié)晶純化,得到化合物1(23 mg)。Fr7.6流分經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離,甲醇洗脫后,得到3個流分(Fr7.6.1~Fr7.6.3);Fr7.6.2經(jīng)制備HPLC法分離純化[流動相為甲醇-水 (88 ∶ 12,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物2(11 mg,保留時間為13.82 min)。
2.1.2 水部位提取與分離 取“2.1”項下水部位浸膏,經(jīng)C18反相硅膠柱分離,甲醇-水(0 ∶ 1、3 ∶ 7、6 ∶ 4、1 ∶ 0,V/V)梯度洗脫,分析液相檢測合并流分,得到4個流分(Fr1~Fr4)。Fr3流分經(jīng)MCI GEL-CHP 20P柱分離,甲醇-水 (1 ∶ 9、2 ∶ 8、3 ∶ 7、1 ∶ 1、7 ∶ 3、1 ∶ 0,V/V)梯度洗脫,得到4個流分(Fr3.1~Fr3.4)。Fr3.2流分經(jīng)C18反相硅膠柱分離,甲醇-水(2 ∶ 8、3 ∶ 7、1 ∶ 1、7 ∶ 3、1 ∶ 0,V/V)梯度洗脫,TLC檢測合并流分,得到6個流分(Fr3.2.1~Fr3.2.6)。Fr3.2.1經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離,甲醇洗脫,得5個流分(Fr3.2.1.1~Fr3.2.1.5)。Fr3.2.1.1流分經(jīng)制備HPLC法分離純化[流動相為甲醇-水(18 ∶ 82,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物3(14 mg,保留時間為14.40 min)。Fr3.2.1.2經(jīng)C18反相硅膠柱分離,甲醇-水(1 ∶ 9、2 ∶ 8、3 ∶ 7、6 ∶ 4、1 ∶ 0,V/V)梯度洗脫,經(jīng)TLC檢測合并流分,得到4個流分(Fr3.2.1.2.1~Fr3.2.1.2.4)。Fr3.2.1.2.3流分經(jīng)制備HPLC分離純化[流動相為甲醇-水(17 ∶ 83,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物4(11 mg,保留時間為17.42 min)、化合物5(25 mg,保留時間為19.28 min)、化合物6(9 mg,保留時間為24.69 min)。Fr3.2.2經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離,95%甲醇洗脫,得6個流分(Fr3.2.2.1~Fr3.2.2.6)。Fr3.2.2.6流分經(jīng)制備HPLC法分離純化[流動相為甲醇-水(20 ∶ 80,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物7(8 mg,保留時間為15.61 min)。Fr3.2.4經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離,70%甲醇洗脫,得5個流分(Fr3.2.4.1~Fr3.2.4.5)。Fr3.2.4.2流分經(jīng)制備HPLC法分離純化[流動相為甲醇-水(20 ∶ 80,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物8(9 mg,保留時間為18.92 min);Fr3.2.4.3流分經(jīng)制備HPLC法分離純化[流動相為甲醇-水(21 ∶ 79,V/V),流速為2 mL/min,檢測波長為210 nm],得化合物9(10 mg,保留時間為16.39 min)、化合物10(12 mg,保留時間為17.21 min)。
2.2 結(jié)構(gòu)鑒定
采用MS、1H-NMR 、13C-NMR等波譜手段及其理化性質(zhì)對化合物1~10進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,結(jié)果如下。
化合物1:白色晶體(甲醇)。香草醛-濃硫酸加熱顯紅色,分子式為C30H48O5。ESI-MS(m/z):487[M-H]-。1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:3.76(1H,d,J=4.3 Hz,H-2),0.94(3H,d,J=7.1 Hz,H-23),4.07(1H,d,J=8.2 Hz,H-24),3.60(1H,d,J=8.2 Hz,H-24),0.99(3H,s,H-25),0.89(3H,s,H-26),1.11(3H,s,H-27),1.03(3H,s,H-28),1.19(3H,s,H-30)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD) δ:29.05(C-1),74.45(C-2),108.36(C-3),47.61(C-4),48.45(C-5),34.92(C-6),20.56(C-7),51.4(C-8),38.32(C-9),54.04(C-10),35.5(C-11),30.34(C-12),40.52(C-13),40.46(C-14),30.34(C-15),37.61(C-16),31.38(C-17),46.16(C-18),31.56(C-19),41.53(C-20),31.12(C-21),35.5(C-22),7.87(C-23),73.03(C-24),17.43(C-25),16.91(C-26),18.61(C-27),32.47(C-28),182.97(C-29),32.8(C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8]基本一致,確定化合物1為直楔草酸。
化合物2:淡黃色油狀物(甲醇),分子式為C16H22O4。ESI-MS(m/z):279[M+H]+,(600 MHz,CD3OD)δ:7.61(2H,m,H-3,6),7.72(2H,m,H-4,5),4.29(4H,t,J=6.6 Hz,H-8,8′ ),1.71(4H,m,H-9,9′ ),1.45(4H,m,H-10,10′ ),0.98(6H,d,J=7.4,11Hz,H-11,11′ )。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:133.73(C-1,2),130.02(C-3,6),132.49(C-4,5),169.45(C-7,7′ ),66.8(C-8,8′ ),31.87,66(C-9,9′ ),20.41(C-10,10′ ),14.2(C-11,11′ )。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]基本一致,確定化合物2為鄰苯二甲酸二丁酯。
化合物3:淡黃色粉末(甲醇),Molisch 反應(yīng)為陽性,分子式為C15H22O9。ESI-MS(m/z):347[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:6.71(2H,s,H-3,5),4.55(2H,s,CH2OH),4.84(1H,d,7.6 Hz,H-1′ ),3.85(6H,s,OCH3×2)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:135.43(C-1),154.38(C-2,C-6),105.78(C-3,C-5),139.83(C-4),65.25(CH2OH),105.58(C-1′ ),75.87(C-2′ ),78.48(C-3′ ),71,65(C-4′ ),77.97(C-5′ ),62.71(C-6′ ),57.11(OCH3×2)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]基本一致,確定化合物3為2,6-二甲氧基-4-羥甲基-苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物4:白色粉末(甲醇),Molisch反應(yīng)為陽性,分子式為C14H20O9。ESI-MS(m/z):333[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:6.12(2H,s,H-3,5),4.67(1H,d,J=7.4 Hz,H-1′ ),3.79(6H,s,OCH3×2)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:129.51(C-1),154.86(C-2,C-6),94.43(C-3,C-5),156.23(C-4),106.22(C-1′ ),75.79(C-2′ ),78.38(C-3′ ),71.34(C-4′ ),77.89(C-5′ ),62.64(C-6′ ),56.83(OCH3×2)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致,確定化合物4為2,6-二甲氧基-4-羥基苯酚-1-O-葡萄糖苷。
化合物5:黃色油狀物(甲醇),Molisch反應(yīng)為陽性,分子式為C14H20O8。ESI-MS(m/z):317[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:7.08(1H,d,J=1.7 Hz,H-2),6.77(1H,dd,J=8.2,1.7 Hz,H-4),6.75(1H,d,J=8.2 Hz,H-5),2.71(1H,t,J=7.1 Hz,CH2CH2OH),3.70(1H,m,CH2CH2OH),4.76(1H,d,J=7.4 Hz,H-1′ ),3.90(1H,dd,J=12.1,1.9 Hz,H-6′ a),3.48(1H,m,H-6′ b)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:146.74(C-1),119.39(C-2),132.09(C-3),125.2(C-4),117(C-5),146.72(C-6),39.67(CH2CH2OH),64.49(CH2CH2OH),104.33(C-1′ ),74.98(C-2′ ),77.65(C-3′ ),71.44(C-4′ ),78.38(C-5′ ),62.54(C-6′ )。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]基本一致,確定化合物5為4-羥基-1-(2-羥乙基)-苯基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物6:白色針晶(甲醇),Molisch反應(yīng)為陽性,分子式為C14H20O8。ESI-MS(m/z):317[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:6.82(H,d,J=2.7 Hz,H-2),6.85(H,d,J=8.8 Hz,H-5),6.67(H,dd,J=8.8,2.7 Hz,H-6), 4.78(1H,d,J=7.4 Hz,H-1′),3.90(1H,dd,J=12.1,2.2 Hz,H-6′a),3.68(1H,dd,J=12.1,6.1 Hz,H-6′b), 3.78(3H,s,OCH3-3),3.81(3H,s,OCH3-4)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:146.02(C-1),103.89(C-2),154.06(C-3),151.12(C-4),109.2(C-5),113.69(C-6),103.54(C-1′),75.07(C-2′),78.1(C-3′),71.63(C-4′),78.36(C-5′),62.71(C-6′),56.43(OCH3-3),57.1(OCH3-4)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]基本一致,確定化合物6為3,4-二甲氧基-苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。
化合物7:白色針晶(甲醇),分子式為C10H13N5O4。ESI-MS(m/z):268[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,DMSO-d6)δ:8.13(1H,s,H-2),8.34(1H,s,H-8),5.87(1H,d,J=6.2 Hz,H-1′),4.60(1H,s,H-2′),4.14(1H,s,H-3′),3.96(1H,m,H-4′),3.66(2H,m,H-5′a),3.54(2H,m,H-5′b)。13C-NMR(150 MHz,DMSO-d6)δ:152.41(C-2),149.08(C-4),119.38(C-5),156.19(C-6),139.95(C-8),87.93(C-1′),73.46(C-2′),70.69(C-3′),85.92(C-4′),61.7(C-5′)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]基本一致,確定化合物7為β-腺苷。
化合物8:白色粉末(甲醇),Molisch 反應(yīng)為陽性,分子式為C17H24O9。ESI-MS(m/z):373[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:6.77(2H,s,H-3,5),6.57(1H,d,15.8 Hz,CH=CHCH2OH),6.35(1H,dt,J=15.8,5.6 Hz,CH=CHCH2OH),4.24(2H,dd,J=5.6,1.5 Hz,CH=CHCH2OH),4.88(1H,d,J=8 Hz,H-1′),3.88(6H,s,OCH3×2)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:136.02(C-1),154.50(C-2,C-6),105.58(C-3,C-5),135.41(C-4),131.42(CH=CHCH2OH),130.17(CH=CHCH2OH),63.73(CH=CHCH2OH),105.47(C-1′),75.88(C-2′),78.52(C-3′),71,48(C-4′),77.98(C-5′),62.73(C-6′),57.16(OCH3×2)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]基本一致,確定化合物8為丁香苷。
化合物9:黃色粉末(甲醇),Molisch 反應(yīng)為陽性,分子式為C21H24O11。HRESI-MS(m/z):453.139 5[M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:4.61(1H,s,H-2),2.83(1H,dd,J=16.7,1.5 Hz,H-4a),2.87(1H,dd,J=16.7,4.2 Hz,H-4b),6.02(1H,s,H-6),7.04(1H,d,J=1.6 Hz,H-2′),6.77(1H,d,J=8.2 Hz,H-5′),6.83(1H,dd,J=8.2,1.6 Hz,H-6′),4.84(1H,d,J=10.0 Hz,H-1″)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:80.10(C-2),67.59(C-3),29.94(C-4),158.28(C-5),97.15(C-6),157.25(C-7),104.41(C-8),155.59(C-9),100.09(C-10),132.58(C-1′),115.24(C-2′),146.19(C-3′),145.75(C-4′),116.14(C-5′),119.04(C-6′),79.97(C-1″),73.5(C-2″),76.67(C-3″),71.68(C-4″),82.24(C-5″),62.69(C-6″)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[16]基本一致,確定化合物9為表兒茶素-8-C-β-D-半乳糖苷。
化合物10:黃色粉末(甲醇),Molisch 反應(yīng)為陽性,分子式為C21H22O11。HRESI-MS(m/z):451.122 6 [M+H]+,1H-NMR(600 MHz,CD3OD)δ:3.07(2H,s,H-3),5.88(1H,d,1.4 Hz,H-6),5.99(1H,d,J=1.4 Hz,H-8),6.56(2H,d,J=8.5 Hz,H-2′,6′),6.98(2H,d,J=8.5 Hz,H-3′,5′),4.83(1H,d,J=7.6 Hz,H-1″)。13C-NMR(150 MHz,CD3OD)δ:107.74(C-2),42.11(C-3),196.43(C-4),174.78(C-5),93.65(C-6),174.8(C-7),98.03(C-8),158.51(C-9),107.74(C-10),125.81(C-1′),132.67(C-2′,6′),115.88(C-3′,5′),157.39(C-4′),101.79(C-1″),74.15(C-2″),77.47(C-3″),71.28(C-4″),78.46(C-5″),62.44(C-6″)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]基本一致,確定化合物10為2-羥基柚皮素-7-O-β-葡萄糖苷。
3 討論
目前關(guān)于雷公藤的化學(xué)成分研究較多,報道的主要成分有二萜、三萜和生物堿三大類成分,其中二萜類成分主要可分為松香烷型二萜和對映貝殼杉烷型二萜,三萜類成分包括齊墩果烷型三萜、烏索烷型三萜、木栓烷型三萜、去甲木栓烷型三萜;生物堿成分包括吡啶生物堿和倍半萜類生物堿,此外,還有少量大環(huán)多胺生物堿[18-21]??傮w而言,雷公藤化學(xué)成分的研究主要集中在乙酸乙酯、氯仿等中小極性部位[6-7,22],關(guān)于極性大的水部位化學(xué)成分研究基本未見報道。本研究從雷公藤的乙酸乙酯部位分離鑒定了2個單體化合物,從其水部位中分離鑒定了8個糖苷類化合物,為酚苷、黃酮苷和丁香苷。相關(guān)研究[23]發(fā)現(xiàn),丁香苷具有較好的抗炎免疫活性。結(jié)合本課題組前期報道的5個雷公藤糖苷類成分(為松香烷型二萜糖苷)[24],為進(jìn)一步豐富了雷公藤化學(xué)成分的種類,研究雷公藤的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)提供了試驗數(shù)據(jù),也為其后續(xù)藥理研究提供了基礎(chǔ)。
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(收稿日期:2018-09-24 修回日期:2018-12-27)
(編輯:唐曉蓮)